地貧基因診斷詳解演示文稿

地貧基因診斷詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)（優(yōu)選）地貧基因診斷目前二頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)我國和β地貧基因突變類型頻率ZhangJ,etal.Hemoglobin.2012Sep3.目前三頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)地中海貧血基因攜帶率

地區(qū)攜帶率(%)

地貧β地貧

廣東8.532.54

廣西11.196.78

云南

四川14.71.9222.62.18

臺灣4.201.10

香港5.023.41Xu,etal.JClinPathol2004,57:517-22.

Cai,etal.ChiJEpidemiol2002,23:281-5.Zhao,etal.ChiJEpidemiol2011,32:352-6.目前四頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)α地貧基因分子基礎(chǔ)缺失型：常見（約占60%）非缺失型：少見（約占40%）目前五頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)α地貧基因分子基礎(chǔ)α1地貧（α

0地貧）：

16號染色體兩個α基因喪失;一個缺失，另一個點(diǎn)突變。

-α/-α或α

地α/α

地α

，--/αα。α2地貧（α+地貧）：

16號染色體一個α基因功能喪失。

-α/αα

或α地α/α

α。目前六頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)血紅蛋白H病:由于α基因3個缺失/突變，使過量的β珠蛋白肽鏈形成β4多聚體（HbH）胎兒水腫：4個α基因全部缺失/突變非缺失型α地貧α地貧基因分子基礎(chǔ)目前七頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)

我國非缺失型地貧常見基因類型：

2CD30GAG(Glu)UnstableHb2CD31AGGAAG(ArgLys)Splicingmutation2CD59GGCGAC(GlyAsp)UnstableHbHbWestmead2CD122CACCAG(HisGln)UnstableHb

HbQS2CD125CTGCCG(LeuPro)UnstableHbHbCS2CD142TAACAA(Gln)Terminatormutationα地貧基因分子基礎(chǔ)目前八頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)α

地貧臨床類型與基因類型的關(guān)系臨床基因靜止型-α/αα輕型-α

/-

α或--/αα中間型--/-

α

重型--/--目前九頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)β地貧基因分子基礎(chǔ)基因缺失：少見(僅見于:41-42)點(diǎn)突變：常見（約占99.5%）目前十頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)β地貧基因分子基礎(chǔ)目前十一頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)

β

地貧臨床類型與基因類型的關(guān)系臨床基因輕型β地/β（β雜合子）中間型β地/β地（β變異型純合子或雙重雜合子）重型β地/β地（β純合子或雙重雜合子）目前十二頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)地中海貧血基因診斷技術(shù)PCR：多重PCR，Gap-PCR，QR-PCR等位基因特異性性寡核苷酸雜交（ASO）反向點(diǎn)雜交（RDB）Southernblot限制性切酶譜分析多重連接酶依賴探針擴(kuò)增技術(shù)(MLPA)多重引物延伸DHPLC基因測序目前十三頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)Genotypingofthe--SEAallelesbyGap-PCR

地貧基因診斷技術(shù)（Gap-PCR）目前十四頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)地貧基因診斷技術(shù)（ASO）目前十五頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)地貧基因診斷技術(shù)（ASO）目前十六頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)地貧基因診斷技術(shù)（RDB）目前十七頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)GenotypeFatherCDs41-42(CTTT)/NMotherIVS-2-654(CT)/NFetusCDs41-42/IVS-2-654NormalcontrolN/N地貧基因診斷技術(shù)（RDB）目前十八頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)地貧基因診斷技術(shù)（MLPA）目前十九頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)地貧基因診斷技術(shù)（DHPLC)目前二十頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)

α地貧(缺失型)的基因診斷

Southern印跡結(jié)合多重PCR結(jié)合缺口PCR(Gap-PCR)

多重連接酶依賴探針實(shí)時熒光定量限制性切酶譜分析溶解曲線分析結(jié)合片段大小分析擴(kuò)增技術(shù)(MLPA)PCR(RQ-PCR)

優(yōu)點(diǎn)可用于分析基因的簡潔，快速，污對儀器要求低，易推重復(fù)性好，特異性高確定cDNA拷貝大片段缺失與重復(fù)染降低，檢測單廣，檢測大片段缺失。，可同時檢測已知與數(shù)，可同時檢突變，結(jié)果可靠，個堿基突變及小未知大片段缺失或重測已知和未知穩(wěn)定性高。片段缺失。復(fù)突變。大片段缺失缺點(diǎn)費(fèi)時、費(fèi)力、需用不能檢測未知缺失及成本高限制了其推廣放射性同位素。非缺失突變。應(yīng)用

PCR診斷方法的可鑒定各種缺失廣泛用于地貧檢測，作為常見地貧基因篩作為補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)補(bǔ)充或佐證。類型?？蓞^(qū)分雜合子及純陰性但高度懷疑地貧或產(chǎn)前篩查合子的補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)。各種α地貧基因診斷方法的優(yōu)缺點(diǎn)及應(yīng)用目前二十一頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)α地貧(非缺失型)的基因診斷PCR結(jié)合限制性內(nèi)切酶酶譜分析：簡便、快捷，但只限于涉及限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)改變的突變和小片段缺失的檢測多重?cái)U(kuò)增不應(yīng)突變系統(tǒng)：簡便、快速，同Gap-PCR一樣，廣泛用于α地貧基因檢測聚合酶鏈反應(yīng)結(jié)合寡核苷酸探針的反向斑點(diǎn)雜交:診斷效率高，廣泛用于常見非缺失型基因檢測

基因芯片：并行性、多樣性及自動化，同時診斷α及β地貧基因測序：可用于檢測未知的非缺失型地貧基因目前二十二頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)β地貧基因診斷

點(diǎn)突變PCR-RDB基因測序目前二十三頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)植入前基因診斷（羊膜穿刺取樣）

母體外周血分離胎兒細(xì)胞進(jìn)行產(chǎn)前診斷

母體血漿或血清中胎兒DNA分析

地貧基因產(chǎn)前診斷新技術(shù)目前二十四頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)地貧基因診斷臨床應(yīng)用目前二十五頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)評價基因診斷結(jié)果應(yīng)注意的問題不同種族/地區(qū)地貧基因突變點(diǎn)有差別臨床貧血的嚴(yán)重程度（即臨床分型）與基因診斷的嚴(yán)重程度一致：確診目前二十六頁\總數(shù)二十九頁\編于十六點(diǎn)評價基因診斷結(jié)果應(yīng)注意的問題臨床貧血嚴(yán)重程度與基因診斷不一致（1）臨床“重”，基因“輕”：①應(yīng)作家系調(diào)查，找診斷證據(jù)(舉例:新疆籍的病例)；②重視Hb電泳結(jié)果；