骨髓增值性疾病相關(guān)分子檢測(cè)

血液腫瘤白血病

造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病。其特征為白血病細(xì)胞在骨髓及其他造血組織中呈惡性、無(wú)限制地增生，浸潤(rùn)全身各組織和臟器。白血病的發(fā)病白血病的分類(lèi)急性白血病的診斷分型FAB分型（1976）FAB：法國(guó)(Franch)美國(guó)(American)英國(guó)(Britain)以血細(xì)胞形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)，專(zhuān)家討論、制訂的關(guān)于急性白血病的分型診斷標(biāo)準(zhǔn)。急性白血病的FAB分型急性髓細(xì)胞白血病未分化型（M0）急性粒細(xì)胞白血病微分化型（M1）急性粒細(xì)胞白血病部分分化型（M2，M2b）急性早幼粒細(xì)胞白血病（M3/APL）急性粒-單核細(xì)胞白血?。∕4，M4Eo）急性單核細(xì)胞白血?。∕5）急性紅白血?。∕6）急性巨核細(xì)胞白血?。∕7）急性髓細(xì)胞白血病atbgweijiasuan白血病的MIC分型白血病的MICM分型分類(lèi)方案制定的意義形態(tài)學(xué)免疫表型遺傳改變臨床特征疾病分類(lèi)治療選擇靶向性治療個(gè)體化治療預(yù)后判斷骨髓增值性腫瘤相關(guān)分子檢測(cè)WHOMPN類(lèi)疾病分型MPN輔助診斷相關(guān)的分子標(biāo)志各分子標(biāo)志檢測(cè)的原理及意義WHO（2008）MPN分型慢性粒細(xì)胞白血病，BCR-ABL陽(yáng)性（CML）慢性中性粒細(xì)胞白血?。–NL）真性紅細(xì)胞增多癥（PV）原發(fā)性骨髓纖維化（PMF）原發(fā)性血小板增多癥（ET）慢性嗜酸性粒細(xì)胞白血病，非特殊類(lèi)型（CEL/HES）肥大細(xì)胞增生癥皮膚肥大細(xì)胞增生癥系統(tǒng)性肥大細(xì)胞增生癥肥大細(xì)胞白血病肥大細(xì)胞肉瘤皮膚外肥大細(xì)胞腫瘤骨髓增殖性腫瘤，無(wú)法分類(lèi)WHOMPN類(lèi)疾病分型MPN輔助診斷相關(guān)的分子標(biāo)志各分子標(biāo)志檢測(cè)的原理及意義2013年之前認(rèn)識(shí)到的不同分子生物標(biāo)志物在MPN輔助診斷中的運(yùn)用2013milestone:FromJanuskinase2tocalre.culin:theclinicallyrelevantgenomiclandscapeofmyeloproliferativeneoplasmsCALR基因突變?cè)诠撬柙鲋敌约膊≈械闹虏“l(fā)現(xiàn)CALR基因突變?cè)诠撬柙鲋敌约膊≈械闹虏“l(fā)現(xiàn)CALR基因突變?cè)诠撬柙鲋敌约膊≈械闹虏“l(fā)現(xiàn)MPN可供診斷和鑒別診斷的分子生物標(biāo)志W(wǎng)HOMPN類(lèi)疾病分型MPN輔助診斷相關(guān)的分子標(biāo)志各分子標(biāo)志檢測(cè)的原理及意義BCR/ABL融合基因費(fèi)城（Ph）染色體t(9:22)：9號(hào)染色體上的ABL基因和22號(hào)染色體上的BCR基因異位融合產(chǎn)生融合基因BCR-ABL。BCR/ABL融合基因方法：RQ-PCRCF值：0.74BCR/ABL融合基因定量檢測(cè)腫瘤減少a≤10%≈1-log≤1%≈2-log≤0.1%IS

≈3-log≤0.0032%IS

≈4.5-log治療目標(biāo)196019701980199020002010CHRMCyRMMR白消安羥基脲HSCT干擾素-alfa伊馬替尼

（格列衛(wèi)?）二代

TKIsa與基線(xiàn)水平相比較。白血病負(fù)荷MR4.5及更深程度反應(yīng)更深層分子學(xué)反應(yīng)隨著TKI用于治療，疾病所獲得療效越發(fā)深入，要求的檢測(cè)方法也越發(fā)靈敏TKI治療后第3個(gè)月TKI治療后第6個(gè)月TKI治療后第12個(gè)月指南指導(dǎo)的慢粒TKI治療療效監(jiān)測(cè)里程碑TKI治療后第18個(gè)月BCR／ABL標(biāo)準(zhǔn)化：尺子能量準(zhǔn)尺寸的前提！什么是BCR/ABLIS？BCR-ABLIS的臨床意義結(jié)果簡(jiǎn)單、清晰、易懂意義明確國(guó)際臨床試驗(yàn)的結(jié)論來(lái)自于BCR-ABLISCML治療指南的制定基于BCR-ABLIS只有轉(zhuǎn)換為BCR-ABLIS，才能準(zhǔn)確評(píng)價(jià)療效如何使用IS:IS%ratio=local%ratioxconversionfactor.

CF值：0.74BCR/ABL定量標(biāo)準(zhǔn)化報(bào)告示例JAK2MutationsJournalofMolecularDiagnostics,Vol.8,No.4,September2006JAK2基因結(jié)構(gòu)及突變位點(diǎn)MechanismsofDisease,2005;365:1054–61JAK2/V617FMPN患者中JAK2基因c.1849G＞T（V617F）發(fā)生率非常高，約95%的PV，以及50%的ET和PMF患者含有該突變。本檢測(cè)可以用于骨髓增殖性疾病的鑒別診斷，區(qū)別反應(yīng)性血細(xì)胞增多以及其它惡性血液疾病JAK2exon12JAK2exon12突變常見(jiàn)于JAK2V617F陰性的PV患者，而在ET和PMF患者中少見(jiàn)。高度懷疑PV的患者，若JAK2V617F檢測(cè)陰性，則應(yīng)進(jìn)行JAK2exon12突變檢測(cè)JAK2exon12JAK2基因突變檢測(cè)Taqman探針?lè)y(cè)序法MPLMutations

骨髓增殖性疾病患者中除JAK2基因突變外，還可能存在其他導(dǎo)致疾病發(fā)生的基因突變。促血小板生成素受體MPL/TPOR是JAK2的同源性受體。在MPL中存在兩種獲得性突變W515L（TGG→TTG）和W515K（TGG→AAG），MPLW515L/K突變的細(xì)胞對(duì)非細(xì)胞因子依賴(lài)性的增殖并對(duì)TPO高度敏感，可繼發(fā)激活JAK2-STAT等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路.Blood,2006108:3472-3476Leukemia(2008)22,1813–1817Blood,2008112:844-847CALR基因突變檢測(cè)(ET、PMF)CALR基因在人類(lèi)基因組學(xué)中定位于19p13.2，全長(zhǎng)4.2kb，含有9個(gè)外顯子,轉(zhuǎn)錄1.9kb大小的轉(zhuǎn)錄本，并表達(dá)分子質(zhì)量大小為48kD鈣網(wǎng)織蛋白。鈣網(wǎng)蛋白可以作為基因轉(zhuǎn)錄的核激素受體的調(diào)節(jié)中的重要調(diào)節(jié)因子。CALR基因突變的常見(jiàn)形式CALR突變是MPN特異的重現(xiàn)性分子遺傳改變（尤其ET和PMF）CALR突變與另外兩個(gè)常見(jiàn)的骨髓增殖型疾病的腫瘤基因JAK2和MPLW515L/K相互排斥，CALR突變?cè)赑MF或ET的發(fā)病機(jī)理上有著相對(duì)獨(dú)立的機(jī)制或信號(hào)同路。

聯(lián)合JAK2,MPLW515L/K及CALR可將原發(fā)性骨髓纖維化／原發(fā)性血小板增多癥的有效診斷率提高至97%的水平MPN與CALR基因突變CALR的9號(hào)外顯子上存在36種不同形式插入／缺失突變MayoFoundationforMedicalEducationandResearchMayoClinic的MPN診斷流程修訂CSF3R突變與aCML/CNLNEnglJMed.2013May9;368(19):1781-90.PDGFR基因重排FIP1L1-PDGFRa融合基因FIP1L1-PDGFa融合檢測(cè)ETV6-PDGFRβ融合基