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文檔簡介
微生物與酶制劑工業(yè)詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(優(yōu)選)微生物與酶制劑工業(yè)目前二頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)纖維素燃料乙醇“酶”好時代秸稈、樹葉,這些在很多人眼中稱之為‘廢料’的東西,其實都是寶貝。他們甚至可以成為車用燃料。而酶就像是打開生物世界的鑰匙,通過它的催化作用,能夠?qū)⒅参飶U料中的植物纖維轉(zhuǎn)化為糖,然后再經(jīng)發(fā)酵制成為乙醇。將這些乙醇添加到燃料中,能夠降低石油燃料的消耗,減少有害物質(zhì)的排放,我們把這種用非糧食作物生產(chǎn)出來的乙醇稱之為第二代燃料乙醇。目前三頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)目前四頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)目前五頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)第一節(jié)酶的生產(chǎn)方法一、酶的生產(chǎn)方法1、提取法
采用各種技術(shù),直接從動、植物細(xì)胞或組織中將酶提取出來。提取法雖簡單易行,但受原材料來源的限制。2、化學(xué)合成法
是20世紀(jì)60年代中期出現(xiàn)的新技術(shù)。只能合成那些已知化學(xué)結(jié)構(gòu)的酶;成本比較高。目前仍然停留在實驗室內(nèi)合成的階段。目前六頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)3、微生物發(fā)酵法
是20世紀(jì)50年代以來生產(chǎn)酶的主要方法。利用微生物細(xì)胞的生命活動合成所需酶的方法稱為發(fā)酵法。酶的發(fā)酵生產(chǎn)是現(xiàn)在酶生產(chǎn)的主要方法。目前七頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)1、微生物種類多,酶種豐富;2、微生物生長繁殖快,易提取酶,特別是胞外酶;3、微生物培養(yǎng)基來源廣泛,價格便宜;4、可采用微電腦等新技術(shù),控制酶發(fā)酵生產(chǎn)過程;5、可利用以基因工程為主的近代分子生物學(xué)技術(shù)選育菌種,增加酶的產(chǎn)率和開發(fā)新酶種。二、應(yīng)用微生物來開發(fā)酶的優(yōu)點(diǎn)目前八頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)三、酶發(fā)酵生產(chǎn)的類型1、液體深層發(fā)酵:液體培養(yǎng)基,經(jīng)滅菌、冷卻后,接入產(chǎn)酶細(xì)胞,在一定條件下發(fā)酵。2、固體培養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)基以麩皮、米糠等為主要原料,經(jīng)滅菌后,接入產(chǎn)酶菌株,在一定條件下發(fā)酵。3、固定化細(xì)胞發(fā)酵(70年代后期發(fā)展)將細(xì)胞固定在載體上后,進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)。目前九頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)第二節(jié)酶生物合成的基本理論一、酶生物合成的過程DNARNA蛋白質(zhì)(新生多肽鏈)成熟蛋白質(zhì)(酶)轉(zhuǎn)錄翻譯加工目前十頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)二、酶生物合成的調(diào)節(jié)
按酶生物合成的速度把細(xì)胞中合成的酶分為兩類:組成酶—恒定(速度、濃度)誘導(dǎo)酶—在外界環(huán)境因素誘導(dǎo)下合成速度急增,酶濃度成百上千倍增加目前十一頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)酶合成的調(diào)控類型:誘導(dǎo)和阻遏1、酶合成的誘導(dǎo)作用
加進(jìn)某些物質(zhì),使酶的生物合成開始或加速的現(xiàn)象,稱為誘導(dǎo)作用。誘導(dǎo)物一般是酶催化作用的底物或其底物類似物。
例:乳糖誘導(dǎo)?-半乳糖苷酶的合成淀粉誘導(dǎo)α-淀粉酶的合成目前十二頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)2、酶合成的阻遏(1)終產(chǎn)物阻遏
指酶催化反應(yīng)的產(chǎn)物或代謝途徑的末端產(chǎn)物使該酶的生物合成受到阻遏的現(xiàn)象。(2)分解代謝物阻遏(營養(yǎng)源阻遏)是指某些物質(zhì)經(jīng)過分解代謝產(chǎn)生的物質(zhì)阻遏其他酶合成的現(xiàn)象。
葡萄糖阻遏?-半乳糖苷酶的生物合成果糖阻遏α-淀粉酶的生物合成色氨酸過量時會阻遏催化色氨酸合成的相關(guān)酶目前十三頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)第三節(jié)微生物發(fā)酵產(chǎn)酶工藝
發(fā)酵法生產(chǎn)酶制劑,就是給酶的生產(chǎn)菌種提供適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)和生長環(huán)境,使生產(chǎn)菌大量增殖,同時合成所需要的酶,然后由發(fā)酵所得物料制成酶產(chǎn)品。
現(xiàn)代酶制劑的大規(guī)模生產(chǎn)以深層液體發(fā)酵法為主。無論哪種發(fā)酵法,都要做三方面的工作:(1)從原料準(zhǔn)備培養(yǎng)基;(2)從原始菌種準(zhǔn)備生產(chǎn)菌種;(3)發(fā)酵過程管理。一、發(fā)酵產(chǎn)酶的一般工藝流程目前十四頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)酶發(fā)酵生產(chǎn)的一般工藝流程圖目前十五頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)保藏菌種
試管斜面培養(yǎng)(活化)搖瓶擴(kuò)大培養(yǎng)種子罐培養(yǎng)發(fā)酵罐分離純化酶培養(yǎng)基無菌空氣目前十六頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)二、產(chǎn)酶菌種(一)產(chǎn)酶菌種的要求(1)產(chǎn)酶量高;(2)繁殖快,發(fā)酵周期短;(3)產(chǎn)酶穩(wěn)定性好,不易退化,不易被感染;(4)能夠利用廉價原料,容易培養(yǎng)和管理;(5)最好是產(chǎn)生胞外酶的菌種,利于分離。(6)安全性可靠,非致病菌。目前十七頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(二)常用的產(chǎn)酶微生物大腸桿菌
谷氨酸脫羧酶、天冬氨酸酶、青霉素?;?、天冬酰胺酶、β-半乳糖苷酶、限制性核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、核酸外切酶等。1、細(xì)菌目前十八頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)直狀、近直狀的桿菌,周生或側(cè)生鞭毛,革蘭氏陽性,無莢膜,芽孢中生或近中生??莶菅挎邨U菌是工業(yè)發(fā)酵的重要菌種之一。生產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶、5’-核苷酸酶、某些氨基酸及核苷??莶菅挎邨U菌目前十九頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)鏈霉菌:葡萄糖異構(gòu)酶、青霉素?;?、纖維素酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、幾丁質(zhì)酶等。2、放線菌目前二十頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)黑曲霉:糖化酶、α-淀粉酶、酸性蛋白酶、果膠酶、葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶、核糖核酸酶、橙皮苷酶等。米曲霉:氨基?;?、磷酸二酯酶、果膠酶等。紅曲霉:α-淀粉酶、糖化酶、麥芽糖酶、蛋白酶等。青霉:葡萄糖氧化酶、苯氧甲基青霉素?;?、纖維素酶等。木霉:纖維素酶。根霉:糖化酶、蔗糖酶、堿性蛋白酶,脂肪酶、果膠酶、纖維素酶、半纖維素酶等。毛霉:蛋白酶、糖化酶、α-淀粉酶、脂肪酶、果膠酶、凝乳酶3、霉菌目前二十一頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)啤酒酵母:丙酮酸脫羧酶、醇脫氫酶等。假絲酵母:脂肪酶、尿酸酶、尿囊酸酶、轉(zhuǎn)化酶、醇脫氫酶等。4、酵母目前二十二頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)
工業(yè)規(guī)模應(yīng)用的微生物酶和它們的某些來源酶產(chǎn)酶微生物用途α-淀粉酶枯草芽胞桿菌地衣芽胞桿菌米曲霉淀粉液化,織物退漿,消化助劑,加酶洗滌劑葡萄糖淀粉酶米曲霉,黑曲霉,米根霉制造葡萄糖,發(fā)酵、釀酒等工業(yè)的淀粉水解糖中性蛋白酶枯草芽胞桿菌,米曲霉皮革、毛皮加工,食品加工,調(diào)味品制造、助消化、消炎、啤酒澄清堿性蛋白酶地衣芽胞桿菌加酶洗滌劑植酸酶黑曲霉,畢赤酵母工程菌株飼料添加劑目前二十三頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)纖維素酶里氏木霉、黑曲霉水洗布生產(chǎn),飼料添加劑,消化植物細(xì)胞壁半纖維素酶木霉、曲霉、根霉飼料添加劑,消化植物細(xì)胞壁,低聚木糖生產(chǎn)β-葡聚糖酶枯草芽胞桿菌,黑曲霉,Penicilliumemersonii啤酒釀造,飼料添加劑異淀粉酶產(chǎn)氣克雷伯氏菌,芽孢桿菌淀粉加工乳糖酶乳酸酵母,米曲霉,黑曲霉,米根霉乳品工業(yè)(處理牛乳和乳清)果膠酶曲霉、歐文氏菌水果加工,果汁、果酒澄清,麻類纖維脫膠
工業(yè)規(guī)模應(yīng)用的微生物酶和它們的某些來源目前二十四頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)轉(zhuǎn)化酶啤酒酵母、假絲酵母制造轉(zhuǎn)化糖凝乳酶米赫毛霉,大腸桿菌和真菌生產(chǎn)的重組酶制造乳酪脂肪酶曲霉、根霉、酵母等加酶洗滌劑,油脂加工,生物化工葡萄糖氧化酶青霉、曲霉食品去氧、除葡萄糖,測定葡萄糖葡萄糖異構(gòu)酶凝結(jié)芽胞桿菌,白色鏈霉菌生產(chǎn)果葡糖漿青霉素?;讣?xì)菌、霉菌、放線菌制造6-氨基青霉烷酸
工業(yè)規(guī)模應(yīng)用的微生物酶和它們的某些來源目前二十五頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(三)生產(chǎn)菌種的來源1、菌種保藏機(jī)構(gòu)向菌種保藏機(jī)構(gòu)索取有關(guān)的菌株,從中篩選所需菌株。
2、篩選由自然界采集樣品,如土壤、水、動植物體等,從中進(jìn)行分離篩選。目前二十六頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(1)樣品的采集:主要是各種富含所需微生物的土壤、水、氣、枯枝爛葉、爛水果等;產(chǎn)酶菌種篩選步驟:(2)初篩:分離產(chǎn)目的酶的菌株;給予特殊的培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件,進(jìn)而讓目的菌株得以繁殖,盡可能地把只成為目的菌的菌株分離出來。-淀粉酶的篩選目前二十七頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(3)復(fù)篩:從所得菌株中篩選優(yōu)良株在初篩的基礎(chǔ)上,篩選產(chǎn)酶量高、性能更符合生產(chǎn)要求的菌種。誘變育種細(xì)胞雜交原生質(zhì)體融合育種基因工程育種(4)高產(chǎn)菌株的選育目前二十八頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(四)產(chǎn)酶菌種的保存
保藏方法:斜面保藏法,沙土保藏法,真空冷凍干燥保藏法,低溫保藏法,石蠟油保藏法等目前二十九頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(五)生產(chǎn)種子的制備生產(chǎn)種子:由原始保藏菌種,經(jīng)過活化,擴(kuò)大培養(yǎng),用于發(fā)酵罐接種的大量菌體。1、種子制備工藝過程目前三十頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(1)菌種活化
目的:保藏的菌種在用于發(fā)酵生產(chǎn)之前,必須接種于新鮮的斜面培養(yǎng)基上,在一定的條件下培養(yǎng),以恢復(fù)細(xì)胞的生命活動能力。方法:在試管斜面上培養(yǎng)1-3代。(2)擴(kuò)大培養(yǎng)
目的:活化后的菌種經(jīng)過一級至數(shù)級的擴(kuò)大培養(yǎng),以獲得足夠數(shù)量的優(yōu)質(zhì)細(xì)胞。培養(yǎng)基稱為種子培養(yǎng)基。方法:分為實驗室培養(yǎng)和車間培養(yǎng)兩個階段。
目前三十一頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(1)盡量減少傳代次數(shù),以降低菌種衰退和污染的可能性;(2)培養(yǎng)基成分一般應(yīng)比發(fā)酵培養(yǎng)基的氮源豐富;(3)培養(yǎng)時間一般控制在微生物生長的對數(shù)生長期,及時接入下一級培養(yǎng)或發(fā)酵罐;(4)嚴(yán)格控制培養(yǎng)條件(pH、溫度、通氣量等),加強(qiáng)培養(yǎng)過程的實時監(jiān)測。擴(kuò)大培養(yǎng)應(yīng)注意的事項:目前三十二頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)三、培養(yǎng)基
碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子、水等。
培養(yǎng)基是人工配制的供微生物生長、繁殖及合成酶的營養(yǎng)物質(zhì)的混合物。1、選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)2、營養(yǎng)物的濃度及配比合適3、物理、化學(xué)條件適宜4、經(jīng)濟(jì)節(jié)約目前三十三頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)微生物發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基舉例1、枯草桿菌BF7658α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基:玉米粉8%
豆餅粉4%
磷酸氫二鈉0.8%
硫酸銨0.4%
氯化鈣0.2%
氯化銨0.15%
自然pH目前三十四頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)2、黑曲霉糖化酶發(fā)酵培養(yǎng)基
玉米粉10%
豆餅4%
麩皮1%pH4.4~5.0目前三十五頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)四、發(fā)酵條件的控制—影響產(chǎn)酶的幾個重要條件1、溫度的調(diào)節(jié)控制(2)有些微生物生長最適溫度與發(fā)酵產(chǎn)酶的最適溫度有所不同。例:醬油曲霉生產(chǎn)蛋白酶,28℃時蛋白酶產(chǎn)量比在40℃條件下高2~4倍,在20℃條件下發(fā)酵,則蛋白酶產(chǎn)量更高,但細(xì)胞生長速率較慢。
為此,在有些酶的發(fā)酵生產(chǎn)過程中,要在不同的發(fā)酵階段控制不同的溫度,即在微生物生長階段控制在生長的最適溫度范圍,而在產(chǎn)酶階段控制在產(chǎn)酶最適溫度范圍。(1)不同的微生物有不同的最適生長溫度。目前三十六頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)(3)溫度的控制方法
一般采用熱水升溫,冷水降溫。因此,在發(fā)酵罐中均設(shè)有足夠傳熱面積的熱交換裝置,如排管、蛇管,夾套、噴淋管等。目前三十七頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)目前三十八頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)目前三十九頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)2、pH值的調(diào)節(jié)控制(1)不同微生物,其生長繁殖的最適pH值有所不同。(3)有些微生物可以同時產(chǎn)生若干種酶,在生產(chǎn)過程中,通過控制培養(yǎng)基的pH,往往可以改變各種酶之間的產(chǎn)量比例。(2)微生物生長的最適pH值與產(chǎn)酶最適pH值往往不同。目前四十頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)3、溶解氧的調(diào)節(jié)控制
溶解氧指溶解在培養(yǎng)基中的氧。微生物一般只能利用溶解氧。調(diào)節(jié)溶氧速率的方法(1)調(diào)節(jié)通氣量;(2)調(diào)節(jié)氧的分壓;(3)調(diào)節(jié)氣液接觸時間;(4)調(diào)節(jié)氣液接觸面積;(5)改變培養(yǎng)液性質(zhì)。目前四十一頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)目前四十二頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)5、濕度的調(diào)節(jié)控制
用固體培養(yǎng)基生產(chǎn)酶制劑時,一般前期濕度低些,培養(yǎng)后期濕度大些,有利于產(chǎn)酶。4、泡沫形成:通氣攪拌、培養(yǎng)基中某些成分的變化、代謝產(chǎn)生的氣體。危害:阻礙CO2的排除,影響氧的溶解;引起染菌。消泡方法:機(jī)械消泡、化學(xué)消泡。目前四十三頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)五、提高酶產(chǎn)量的措施A添加誘導(dǎo)物對于誘導(dǎo)酶的發(fā)酵生產(chǎn),在發(fā)酵過程中的某個適宜的時機(jī),添加適宜的誘導(dǎo)物,可以顯著提高酶的產(chǎn)量。例如,乳糖誘導(dǎo)β-半乳糖苷酶,纖維二糖誘導(dǎo)纖維素酶,蔗糖甘油單棕櫚酸誘導(dǎo)蔗糖酶的生物合成等。1)通過條件控制提高酶產(chǎn)量目前四十四頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)B控制阻遏物的濃度1.產(chǎn)物阻遏作用是由酶催化作用的產(chǎn)物或者代謝途徑的末端產(chǎn)物引起的阻遏作用。2.分解代謝物阻遏作用是由分解代謝物(葡萄糖等和其它容易利用的碳源等物質(zhì)經(jīng)過分解代謝而產(chǎn)生的物質(zhì))引起的阻遏作用??刂谱瓒粑锏臐舛仁墙獬瓒?、提高酶產(chǎn)量的有效措施。目前四十五頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)采用其他較難利用的碳源,如淀粉等采用補(bǔ)料、分次流加碳源添加一定量的環(huán)腺苷酸(cAMP)對于受代謝途徑末端產(chǎn)物阻遏的酶,可以通過控制末端產(chǎn)物的濃度的方法使阻遏解除。為了減少或者解除分解代謝物阻遏作用,應(yīng)當(dāng)控制培養(yǎng)基中葡萄糖等容易利用的碳源的濃度。目前四十六頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)C添加表面活性劑表面活性劑可以與細(xì)胞膜相互作用,增加細(xì)胞的透過性,有利于胞外酶的分泌,從而提高酶的產(chǎn)量。將適量的非離子型表面活性劑,如吐溫(Tween)添加到培養(yǎng)基中,可以加速胞外酶的分泌,而使酶的產(chǎn)量增加。由于離子型表面活性劑對細(xì)胞有毒害作用,尤其是季胺型表面活性劑是消毒劑,對細(xì)胞的毒性較大,不能在酶的發(fā)酵生產(chǎn)中添加到培養(yǎng)基中。目前四十七頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)D添加產(chǎn)酶促進(jìn)劑
產(chǎn)酶促進(jìn)劑是指可以促進(jìn)產(chǎn)酶、但是作用機(jī)理未闡明清楚的物質(zhì)。例如,添加一定量的植酸鈣鎂,可使霉菌蛋白酶或者桔青霉磷酸二酯酶的產(chǎn)量提高1~20倍;添加聚乙烯醇可以提高糖化酶的產(chǎn)量。目前四十八頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)2)通過基因突變提高酶產(chǎn)量突變:是指生物的遺傳性狀發(fā)生變異,以致影響了生物的正常遺傳,可遺傳的基因突變發(fā)生在結(jié)構(gòu)基因上,往往導(dǎo)致酶的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)發(fā)生改變:基因突變引起酶產(chǎn)量提高的方式:
1.誘導(dǎo)型組成型
2.阻遏型去阻遏型目前四十九頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)3)通過體內(nèi)基因重組提高酶的產(chǎn)量體內(nèi)基因重組包括少數(shù)或者個別基因的重組,主要通過接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)化等方法進(jìn)行;也包括整個染色體的重組,主要的途徑是原生質(zhì)體融合4)通過體外基因重組提高酶的產(chǎn)量目前五十頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)第四節(jié)酶發(fā)酵動力學(xué)
研究發(fā)酵過程中細(xì)胞生長速度,產(chǎn)物生成速度及環(huán)境因素對這些速度的影響。酶發(fā)酵動力學(xué)研究意義:了解酶生物合成模式;發(fā)酵工藝條件優(yōu)化控制;提高酶產(chǎn)量。目前五十一頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)一、微生物生長曲線
(Microbialgrowthcurve)遲緩期對數(shù)生長期穩(wěn)定生長期衰亡期時間細(xì)胞數(shù)量的對數(shù)目前五十二頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)二、酶的生物合成模式(1)同步合成型(2)中期合成型(3)延續(xù)合成型(4)滯后合成型酶的生物合成模式可發(fā)分為4種類型:目前五十三頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)1、同步合成型酶的生物合成與細(xì)胞生長同步進(jìn)行,又稱生長偶聯(lián)型。特點(diǎn):(1)發(fā)酵開始,細(xì)胞生長,酶也開始合成,說明不受分解代謝物和終產(chǎn)物阻遏。(2)生長至穩(wěn)定期后,酶濃度不再增長。目前五十四頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)2、中期合成型酶的合成在細(xì)胞生長一段時間以后才開始,而進(jìn)入穩(wěn)定生長期后,酶的合成也終止。特點(diǎn):(1)該類酶的合成受分解代謝物阻遏。(2)該酶對應(yīng)的mRNA不穩(wěn)定。目前五十五頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)3、延續(xù)合成型酶的合成伴隨著細(xì)胞生長而開始,但在細(xì)胞進(jìn)入穩(wěn)定期后,酶還可以延續(xù)合成較長的一段時間。特點(diǎn):(1)該類酶不受分解代謝產(chǎn)物阻遏和終產(chǎn)物阻遏。(2)該酶對應(yīng)的mRNA是相當(dāng)穩(wěn)定的。目前五十六頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)4、滯后合成型只有當(dāng)細(xì)胞生長進(jìn)入穩(wěn)定期后,酶才開始合成。又稱非生長偶聯(lián)型。特點(diǎn):(1)該類酶受分解代謝物阻遏作用的影響,阻遏解除后,酶才大量合成。(2)該酶對應(yīng)的mRNA穩(wěn)定性高。目前五十七頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)
選擇:在酶的工業(yè)生產(chǎn)中,為了提高酶產(chǎn)率和縮短發(fā)酵周期,最理想的合成模式是延續(xù)合成型。
改造非理想模式:在細(xì)胞選育上下功夫,并適當(dāng)調(diào)節(jié)工藝條件:(1)同步合成型:適當(dāng)降低發(fā)酵溫度,盡量提高酶所對應(yīng)的mRNA的穩(wěn)定性。(2)中期合成型:要從解除阻遏和提高mRNA的穩(wěn)定性兩方面進(jìn)行努力。(3)滯后合成型在發(fā)酵過程中要盡量減少甚至解除分解代謝物阻遏,使酶的合成提早開始。選擇與改造目前五十八頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)三、細(xì)胞生長動力學(xué)細(xì)胞生長動力學(xué)主要研究細(xì)胞生長速度及外界因素對其影響的規(guī)律。在發(fā)酵過程優(yōu)化及發(fā)酵過程控制等方面具有重要的應(yīng)用價值。Monod認(rèn)為,在培養(yǎng)過程中,細(xì)胞生長速率與細(xì)胞濃度成正比:Rx=dXdt=μXRx—生長速率,單位時間內(nèi)細(xì)胞濃度的增加值,mg/mL·min,g/L·hX—細(xì)胞濃度,mg/mL,g/Lμ—比生長速率,生長速率與細(xì)胞濃度之比(單位細(xì)胞在單位時間內(nèi)濃度增加值),h-1目前五十九頁\總數(shù)六十四頁\編于十八點(diǎn)若培養(yǎng)基中只有一種限制性基質(zhì)時,μ為此限制性基質(zhì)濃度的函數(shù):微生物生長動力學(xué)模型(后人稱Monod方程):μ
=μmax·SKs+SS—限制性基質(zhì)濃度,mol/L,g/Lμmax—最大比生長速率,限制性基質(zhì)濃度過
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