實驗指導(dǎo)書(范文)

實驗指導(dǎo)書(范文)實驗名稱：酶的活性測定實驗?zāi)康模?.了解酶的性質(zhì)；2.掌握測定酶活性的原理及方法；3.熟悉用酶法檢測某些物質(zhì)的含量。實驗器材：計量筒、量筒、容量瓶、滴定管、滴定管架、試劑瓶、吸管、電磁攪拌器、水浴、比色皿、紫外可見分光光度計等。實驗試劑：碳酸氫鈉、酚酞指示劑、酒精、稀硫酸、氯化鈣、蛋白質(zhì)酶、甲酚酸鉀、K2HPO4、NaH2PO4、雙氧水、PMSF等。實驗步驟：1.制備反應(yīng)體系。依據(jù)所測酶的特性及反應(yīng)條件，將反應(yīng)體系制備好，如若需要溫度、PH控制，需做好預(yù)先調(diào)節(jié)控制好溫度、pH值。2.酶的活性測定。將實驗室酶樣品、測量體系反應(yīng)液等放入恒溫水浴中反應(yīng)，反應(yīng)時間到后取數(shù)。然后對反應(yīng)結(jié)果進行分析，并按照分析結(jié)果計算出酶的活性。3.數(shù)據(jù)處理。將測得的數(shù)據(jù)進行整合、分析和處理，得到各試樣反應(yīng)速率常數(shù)、酶活力等數(shù)據(jù)。實驗操作：1.制備反應(yīng)體系：以過氧化氫酶為例，按以下方法制備反應(yīng)體系：(1)在無灰膠式量筒中加入1.0ml測量液，再加入10ul稀硫酸和10ul過氧化氫酶，快速混合均勻；(2)將無灰膠式量筒置于恒溫水浴中(37℃)反應(yīng)五分鐘；(3)反應(yīng)結(jié)束，加入過氧化氫催化劑，打止反應(yīng)并立即測定樣品的吸光度；2.酶的活性測定：按照上述方法制備不同濃度的過氧化氫酶反應(yīng)體系，進行反應(yīng)并記錄結(jié)果；3.數(shù)據(jù)處理：根據(jù)反應(yīng)結(jié)果計算出酶的折合品，從而得出酶的活性。注意事項：1.實驗過程應(yīng)注意安全；2.實驗基本操作要求精度和規(guī)范；3.實驗時應(yīng)注意控制實驗環(huán)境和儀器的干凈衛(wèi)生程度。實驗結(jié)果分析：1.酶的活性測定過程中，酶催化分子與基質(zhì)分子之間的反應(yīng)速率與濃度成正比，酶活性越大，反應(yīng)速率越快。2.酶的光學(xué)密度隨著時間的增加而增加，但增加速度隨時間的增加而減緩，直到反應(yīng)結(jié)束，光學(xué)密度停止增加。3.通過將不同反應(yīng)體系的活性值進行比較，我們可以確定酶的最佳反應(yīng)條件，并可以對酶活性進行量化計算?？偨Y(jié)：本次實驗通過測定不同反應(yīng)體系下酶的活性，根據(jù)測定結(jié)果對酶的特性進行了深入探討。實驗結(jié)果表明，酶的活性與反應(yīng)條件密切相關(guān)，不同反應(yīng)條件會對酶的催化效率和反應(yīng)速率產(chǎn)生重要影響。在今后的酶工程及藥