實驗二植物染色體制片及有絲分裂觀察

實驗二植物染色體制片及有絲分裂觀察第1頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)并掌握植物染色體玻片標(biāo)本的制作方法;

觀察植物細胞有絲分裂過程及各個時期的染色體行為；第2頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六預(yù)習(xí)要求實驗?zāi)康念A(yù)習(xí)要求學(xué)習(xí)并掌握植物染色體玻片標(biāo)本的制作方法;

觀察植物細胞有絲分裂過程及各個時期的染色體行為流程:材料要求,取材方法,實驗流程和各操作步驟實施原因發(fā)根→預(yù)處理→固定→解離→低滲→軟化→染色→壓片→鏡檢間期，前期，中期，后期，末期第3頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六實驗原理

植物的生長旺盛的分生組織（如根尖、莖尖、幼葉等）都在進行著有絲分裂。取這些組織為材料，經(jīng)過固定后迅速殺死細胞，并使細胞內(nèi)的物質(zhì)和生活狀態(tài)得以保持，再經(jīng)過解離、染色、壓片等過程，在顯微鏡下就可以看到大量處于有絲分裂各個時期的細胞，并進行染色體行為的觀察。有絲分裂中期的染色體具有典型的形態(tài)特征，并容易計數(shù)。為了獲得更多的中期染色體裝片，可以采用常用的藥物處理方法，阻止紡錘體的形成，使細胞分裂停止在中期，便于進行觀察。第4頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六實驗材料洋蔥、大蒜的鱗莖，玉米、蠶豆的種子等。本實驗選用大蒜。實驗用品用具：顯微鏡、剪刀、鑷子、解剖針、載玻片、蓋玻片、水浴鍋、酒精燈、鉛筆、吸水紙等。藥品：蒸餾水、卡諾氏固定液、45%醋酸、秋水仙素、改良苯酚品紅染液等。第5頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六實驗步驟：1根尖培養(yǎng)：將大蒜瓣放在盛有清水的培養(yǎng)皿（燒杯）中，讓根部接觸水，在20-25℃光照下培養(yǎng)，待根尖長到1-2cm時，剪下備用。剪取根尖的時間以上午9時左右為好。2

預(yù)處理：將剪取的新鮮材料于0.02%秋水仙素溶液中室溫下處理3-4h。為什么要限制取材時間？預(yù)處理的目的？還有其他方法嗎？第6頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六實驗步驟：

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固定：將經(jīng)過預(yù)處理和未經(jīng)預(yù)處理的材料沖洗后轉(zhuǎn)移至卡諾氏固定液中，室溫下處理24h。水洗放入70%乙醇中保存。

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解離：將沖洗后的根尖放入0.1mol/L的HCl中，60℃下處理8-10min（可視具體情況而定）。固定的作用？固定劑的組成？對固定劑配制的要求？解離的目的？如何判斷解離的效果？其他的解離方法？第7頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六

5軟化：將解離好的根尖沖洗后，放入45%醋酸中軟化10min左右。請問解離與軟化的目的是什么？

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染色：切取1-2mm的分生區(qū)，用改良苯酚品紅染液染色10-20min。為保證染色的充分要注意哪些問題？第8頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六

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壓片：蓋上蓋玻片，在酒精燈上烤片。然后固定蓋玻片，用鉛筆垂直、用力敲擊蓋片幾下，將材料壓成一層細胞。

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鏡檢：先在低倍鏡下找到細胞，再換成高倍鏡仔細觀察有絲分裂過程中染色體的行為。壓片時應(yīng)注意的問題有哪些？請注意比較經(jīng)過預(yù)處理和未經(jīng)預(yù)處理的材料有何不同？第9頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六實驗報告要求：

1說明實驗過程中每步的作用是什么?

2繪圖表示各時期染色體的行為。

3比較經(jīng)過預(yù)處理和未經(jīng)預(yù)處理的兩個裝片的不同，為什么會不同？第10頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六第11頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六間期前期第12頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六中期第13頁，共15頁，2023年，2月20日，星期六后期末期