南醫(yī)微生物實(shí)驗(yàn)肥達(dá)、腸道等課件

微生物與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)（五）主要內(nèi)容一、錄像：真菌二、操作：肥達(dá)試驗(yàn)三、示教：腸道桿菌

其他細(xì)菌真菌肥達(dá)試驗(yàn)原理：用已知的傷寒沙門菌菌體（O）抗原和鞭毛（H）抗原，以及引起副傷寒的甲型副傷寒沙門菌、乙型副傷寒沙門菌H抗原的診斷菌液與受檢血清做試管或微孔板凝集實(shí)驗(yàn)，測(cè)定受檢血清中有無(wú)相應(yīng)抗體及其效價(jià)的試驗(yàn)。0.5ml生理鹽水

1 2 3 4 5 60.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml血清1：401：801：1601：3201：640對(duì)照加菌液0.5ml/管（6→1），震蕩混勻，43℃水浴1.5h，觀察結(jié)果一、糖發(fā)酵試驗(yàn)由于細(xì)菌各自具有不同的酶系統(tǒng)，故對(duì)糖（醇）類的分解能力不盡相同。產(chǎn)酸產(chǎn)氣—指示劑變色，小倒管內(nèi)有氣泡；以＋表示

產(chǎn)酸—指示劑變色；以＋表示不能分解—指示劑不變色；以－表示指示劑為酸性復(fù)紅細(xì)菌生化反應(yīng)二、硫化氫試驗(yàn)硫化氫遇鉛鹽或鐵鹽形成黑色硫化鉛或硫化亞鐵沉淀物。四、尿素酶試驗(yàn)有些細(xì)菌具有尿素酶，能分解尿素形成大量的氨，使培養(yǎng)基PH上升，而變成堿性，使含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基呈紅色為陽(yáng)性；不變色為陰性。腸道桿菌（G—）腸道桿菌的鑒定標(biāo)本增菌培養(yǎng)接種SS平板雙糖鐵培養(yǎng)基初步鑒定其他生化反應(yīng)鑒定血清學(xué)鑒定有菌可疑的乳白色菌落雙糖鐵培養(yǎng)基

上層

（固體）下層（半固體）乳糖硫酸亞鐵酚紅葡萄糖生化反應(yīng)表白喉棒狀桿菌：G+

一端或兩端膨大，排列不規(guī)則，常呈柵欄狀或英文字母樣，如V、W、X等其他細(xì)菌革蘭染色鑒別選擇培養(yǎng)基含0.03%～0.04%亞碲酸鉀血平板亞碲酸鉀血瓊脂平板上形成黑色菌落Elek平板炭疽桿菌：G＋粗大桿菌，兩端平切、排列呈竹節(jié)狀；有莢膜，芽胞呈橢圓形，位于菌體中央結(jié)核桿菌：羅氏培養(yǎng)基厭氧芽胞梭菌破傷風(fēng)梭菌肉毒梭菌產(chǎn)氣莢膜梭菌破傷風(fēng)梭菌：庖肉培養(yǎng)基、毒素動(dòng)物試驗(yàn)產(chǎn)氣莢膜梭菌：血平板（靶樣溶血）、庖肉培養(yǎng)基高層瓊脂斷裂試驗(yàn)、洶涌發(fā)酵試驗(yàn)肉毒梭菌：庖肉培養(yǎng)基真菌（fungus）大分生孢子厚膜孢子真菌培養(yǎng)物新生隱球菌：表面粘稠白假絲酵母菌：濃厚的酵母氣味 第6管均勻混濁＋少量凝集＋＋細(xì)菌部分沉于管底，液體半澄清，凝集呈顆粒狀

＋＋＋大部分凝集，液體輕度混濁，凝集塊較大＋＋＋＋全部凝集，液體澄清，大片凝集塊以出現(xiàn)＋＋凝集的血清最高稀釋倍數(shù)為該血清抗體效價(jià)O達(dá)到1:80，H達(dá)到1:160H甲或H乙達(dá)到1:80或以上有診斷意義結(jié)果判斷

血清稀釋度菌液1：401：801：1601：32