溶出測定及其過程評價-總后姜雄平(上海廣州)

自我介紹姜雄平總后衛(wèi)生部藥品儀器檢驗所

副所長專業(yè)技術(shù)大校，主任藥師，碩士第八、九屆國家藥典委員會委員國家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)委員會委員全軍藥學(xué)專業(yè)委員會藥物分析分委會副主任委員《解放軍藥學(xué)學(xué)報》副主編《藥物分析》編委《中國藥事》編委從事藥品檢驗實驗室工作18年、藥品檢驗管理工作6年參編《生物芯片》第一、二版、《制劑工作手冊》近年發(fā)表論文10余篇2023年4月18日現(xiàn)在是1頁\一共有52頁\編輯于星期三溶出度測定及其過程評價—總后衛(wèi)生部藥品儀器檢驗所現(xiàn)在是2頁\一共有52頁\編輯于星期三摘要幻燈片主要內(nèi)容溶出過程測定指導(dǎo)原則與注意事項溶出過程評價溶出過程應(yīng)用2010版中國藥典溶出度判斷標(biāo)準(zhǔn)的變化2023年4月18日現(xiàn)在是3頁\一共有52頁\編輯于星期三1.溶出過程測定指導(dǎo)原則與注意事項1.1測定波長的選擇一般應(yīng)選擇被測成分的最大吸收波長應(yīng)考察賦形劑、包衣、膠囊殼等對測定產(chǎn)生干擾的情況和程度，如果干擾程度小于2%，則可以忽略。否則應(yīng)予以排除。排除方法可以考慮雙波長法、導(dǎo)數(shù)光譜等方法參比波長的選擇采用紫外分光光度法測定時，可以使用參比波長來提高信噪比，參比波長應(yīng)選擇被測成分沒有吸收的波長段起始點后10nm，一般選擇550nm

2023年4月18日現(xiàn)在是4頁\一共有52頁\編輯于星期三1.溶出過程測定指導(dǎo)原則與注意事項1.2吸光度范圍FODT-601吸光度線性范圍：0.05～1.3

建議：吸光度值應(yīng)在0.05～1.0高吸光度樣品最小光程探頭，吸光度超過1.0時，建議不用

FODT-601測定精準(zhǔn)度要求不高時

可選擇最小吸收峰的峰波長

吸收谷的谷波長

如果必須選擇吸收峰坡處波長，則應(yīng)在峰坡同側(cè)選擇參比波長，以免波長漂移引起誤差，且峰坡波長的吸光度應(yīng)不得大于1.0；測定波長與參比波長吸光度差應(yīng)在0.05～0.95之間2023年4月18日現(xiàn)在是5頁\一共有52頁\編輯于星期三1.溶出過程測定指導(dǎo)原則與注意事項1.3探頭標(biāo)定至少用5個不同濃度的對照品溶液，對每個探頭進行標(biāo)定標(biāo)定溶液的溫度應(yīng)與溶出測定溫度一致

可放在溶出度水浴中平衡溫度相關(guān)系數(shù)應(yīng)不小于0.999可以嘗試用已測定含量的樣品來作自身標(biāo)定，可以消除賦形劑干擾短光程探頭對某些藥品可能不符合朗比定律不適用于吸收系數(shù)法

2023年4月18日現(xiàn)在是6頁\一共有52頁\編輯于星期三1.溶出過程測定指導(dǎo)原則與注意事項1.4溶出曲線測定采樣間隔速釋制劑：一般選擇15秒鐘普通固體制劑：一般選擇30秒鐘緩控釋制劑：選擇1～2分鐘或更長1.5介質(zhì)脫氣介質(zhì)應(yīng)新鮮配制，臨用前脫氣鹽酸溶液應(yīng)先將水脫氣后再加鹽酸緩沖液應(yīng)先配制再脫氣建議采用減壓抽濾脫氣：先加熱至約41℃，再減壓抽濾，或采用氦氣脫氣脫氣不好，會在溶出曲線中出現(xiàn)剌峰，產(chǎn)生噪音2023年4月18日現(xiàn)在是7頁\一共有52頁\編輯于星期三1.溶出過程測定指導(dǎo)原則與注意事項1.6探頭的吸附探頭會對某些物質(zhì)有吸附作用，如甲氨喋呤，結(jié)果導(dǎo)致溶出曲線噪音加大如有吸附，則每測定一批樣品后，應(yīng)使用鏡頭紙醮無水乙醇擦拭探頭光學(xué)表面1.7探頭中氣泡的消除一旦發(fā)現(xiàn)探頭光程中有氣泡，建議使用彎頭長注射針注射器吸取介質(zhì)注射將氣泡趕走。這種情況通常在短光程探頭中發(fā)生為預(yù)防這種情況發(fā)生，可在測定前對無水乙醇清洗探頭，去掉探頭表面油污2023年4月18日現(xiàn)在是8頁\一共有52頁\編輯于星期三1.溶出過程測定指導(dǎo)原則與注意事項1.8剌峰的消除

建議按下法消除：將大于后一個數(shù)據(jù)點的值，用其前后點數(shù)據(jù)的均值替換

VisualBasic6.0程序：FORK=1TOPFORI=1TOMFORJ=1TONSELECTCASEJCASE1IFD(I,J)>(I,J+1)THEND(I,J)=D(I,J+1)CASENIFD(I,J)<D(I,J-1)THEND(I,J)=D(I,J-1)CASEELSEIFD(I,J)>D(I,J+1)THEND(I,J)=(D(I,J-1)+D(I,J+1))/2ENDSELECTNEXTJNEXTINEXTKP為消除剌峰的次數(shù)，M為片（粒）數(shù)，N為采樣點數(shù)，D(I,J)為溶出百分值。2023年4月18日現(xiàn)在是9頁\一共有52頁\編輯于星期三1.溶出過程測定指導(dǎo)原則與注意事項1.9數(shù)據(jù)平滑如果溶出曲線噪音較大，應(yīng)先對數(shù)據(jù)進行平滑處理，以免選擇的數(shù)據(jù)點誤差過大建議按下法消除：將每個數(shù)據(jù)點用其前后點數(shù)據(jù)的均值替換VisualBasic6.0程序：FORK=1TOQFORI=1TOMFORJ=2TON-1Dt(I,J)=(D(I,J-1)+D(I,J+1))/2NEXTJNEXTINEXTKQ為平滑的次數(shù)，M為片（粒）數(shù)，N為采樣點數(shù)，Dt(I,J)為平滑后溶出百分值2023年4月18日現(xiàn)在是10頁\一共有52頁\編輯于星期三1.溶出過程測定指導(dǎo)原則與注意事項1.10數(shù)據(jù)提取光纖原位實時測定數(shù)據(jù)采集是依次對6個探頭掃描，因此每個溶出杯測定時間不一致，在釋放速度較快時間段，對數(shù)據(jù)有較大的影響，為將來進行溶出曲線的比較，建議提取規(guī)定時間點數(shù)據(jù)時，按下法計算：式中：T為規(guī)定時間點，T1、T2為規(guī)定時間T前后數(shù)據(jù)點的時間；D為規(guī)定時間點的溶出值，D1、D2為T1、T2時間測得的溶出度DD2D1T1TT22023年4月18日現(xiàn)在是11頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.1溶出過程評價方法應(yīng)考慮的內(nèi)容應(yīng)使用每片（粒）各時間點的溶出值進行分析，不能只用均值來分析應(yīng)考慮每組制劑溶出曲線的均一性應(yīng)考慮取樣時間點設(shè)計的合理性方法計算簡單曲線比較？散點比較？不均一時間點2023年4月18日現(xiàn)在是12頁\一共有52頁\編輯于星期三2.1溶出過程評價方法應(yīng)考慮的內(nèi)容應(yīng)考慮溶出值與時間的相

關(guān)性，溶出速率與時間密

切相關(guān)0→上升→高峰→下降→0應(yīng)考慮判斷兩組溶出曲線

相似的置信度很遺憾：目前還沒有理想

的分析方法2.溶出過程評價90％50％拐點微分線：溶出速率曲線積分線：溶出曲線2023年4月18日現(xiàn)在是13頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.2評價和比較溶出度過程的方法

模型信賴法Weibull模型——經(jīng)驗?zāi)Ｐ蚅ogistic模型Gompertz模型Sigmoid或Probit模型Higuchi模型Hixson-Crowell模型Kormeyer-Peppas模型……

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

0

2

4

6

8

10

12SlowMediumFast2023年4月18日現(xiàn)在是14頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.2評價和比較溶出度過程的方法

模型信賴法存在的問題眾多模型，該選擇何種模型來進行分析？選擇模型的各參數(shù)的物理意義是什么？受試制劑與參比制劑是否適用相同的模型？模型信賴法作為法定標(biāo)準(zhǔn)并不適用2023年4月18日現(xiàn)在是15頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.2評價和比較溶出度過程的方法非模型信賴法方差分析、協(xié)方差分析、裂區(qū)設(shè)計分析——未考慮溶出值與時間的相關(guān)性，將溶出值作為獨立的參量，不適用多變異法（HotellingpsT2）——考慮到了溶出度均值間變異和與時間的相關(guān)性，但當(dāng)超過2個時間點時，溶出值的置信區(qū)間不可實現(xiàn)嵌套模型+協(xié)方差分析——僅適用于時間對溶出速率影響顯著時數(shù)據(jù)點的分析相似因子法：f2因子相似等效限法Chow（周賢忠）&Ki方法：基于時間序列分析*Chow&Shao（邵軍）方法：基于多項式回歸目前廣為接受，USP采用f2法、JP采用f2法和相似等效限法2023年4月18日現(xiàn)在是16頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.3評價和比較溶出度過程的步驟測定溶出曲線檢驗單個制劑溶出曲線的均一性f2因子法：相對標(biāo)準(zhǔn)差法相似等效限法：不需要比較兩個制劑溶出曲線的一致性f2因子法相似等效限法勿需均一性判斷測定溶出曲線f2因子法：相對標(biāo)準(zhǔn)差法溶出均一性判斷是否均一溶出不一致

或不相似f2因子法相似等效限法溶出一致或相似結(jié)束否是是是否否2023年4月18日現(xiàn)在是17頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.4檢驗制劑一組溶出曲線的均一性相對標(biāo)準(zhǔn)差法（f2因子采用）85％以下點的溶出值RSD小于20％85％以上點的溶出值RSD小于10％符合上述兩條——溶出均一2023年4月18日現(xiàn)在是18頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.5相似因子法Rt—t時間參比制劑累積釋藥百分率Tt—t時間受試制劑累積釋藥百分率n

—取點數(shù)目Wt—權(quán)重系數(shù)（通常為1）2023年4月18日現(xiàn)在是19頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.5相似因子法f2：0～100f2：<50，溶出過程不相似或不等同，此時體內(nèi)生物等效性評價更重要f2：50～100,表明兩種制劑的溶出過程相似或等同2023年4月18日現(xiàn)在是20頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.5相似因子法優(yōu)點便于計算,可用于正交設(shè)計或均勻設(shè)計的數(shù)據(jù)分析可直接對溶出數(shù)據(jù)進行分析,無需模型擬合缺點缺乏統(tǒng)計學(xué)依據(jù)只使用各時間點均值，未考慮溶出值變異性未考慮溶出值與時間的相關(guān)性f2易受溶出度取樣時間和點數(shù)

的影響最后一點設(shè)計對f2值至關(guān)重要宜取快速釋放段，不宜取開始與

釋放平臺段單組的溶出數(shù)據(jù)不適用2023年4月18日現(xiàn)在是21頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.5相似因子法注意事項適用于兩組制劑（參比制劑與受試制劑）溶出數(shù)據(jù)間的比較,在同一條件下測定每組至少要做12劑量各組內(nèi)制劑溶出數(shù)據(jù)是均一的：各時間點溶出值RSD小于20％，最后一個時間點溶出值RSD小于10％含量的差異參比制劑與受試制劑含量應(yīng)相同，含量差異不得超過5％2023年4月18日現(xiàn)在是22頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.5相似因子法注意事項取樣點在3個以上，最好5～7個點，溶出值達85％之后只能一個點

建議以參比制劑的溶出15%、30％、45％、60％、75％、85％、90％的時間點作為分析數(shù)據(jù)，（10％？）

一般15分鐘點必選參比制劑與受試制劑都在15分鐘內(nèi)溶出達到85％時，勿需進行溶出過程比較

——此時，體內(nèi)吸收與溶出速率無關(guān)

但：參比制劑與受試制劑之一15分鐘內(nèi)溶出未達到85％，則可進行比較2023年4月18日現(xiàn)在是23頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.5相似因子法f2因子EXCEL計算表2023年4月18日現(xiàn)在是24頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.5相似因子法舉例例1取樣時間

(min)%溶出量片A(參比)片B(受試)108794159699209999301009945101996010199需要計算f2?否,≥85%in15minf2(n=

？N/A?)溶出過程相似例2取樣時間

(min)%溶出量片A(參比)片B(受試)101716153128204844306660458786609088需要計算f2?是f2(n=5?)72(溶出過程相似)2023年4月18日現(xiàn)在是25頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.5相似因子法舉例例3取樣時間

(min)%溶出量片A(參比)片B(受試)102934153841204750306364458079609591需要計算f2?是f2(n=6?)74，溶出過程相似例4取樣時間

(min)%溶出量片A(參比)片B(受試)10875515967220998530100974510110260101103需要計算f2?是f2(n=3?)31(溶出過程不相似)2023年4月18日現(xiàn)在是26頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法基本思路t時間受試制劑1與參比制劑2溶出值比Rti，共有T(t)個時間點，做n(i)片（粒），y為溶出值計算各時間點95％的置信區(qū)間判斷：

如果該時間點的95％置信區(qū)間［L,U］落在相似等效限［δL,δU］的范圍內(nèi)，即認為該點兩個制劑溶出局部相似如果所有時間點的95％置信區(qū)間［L,U］均落在相似等效限［δL,δU］的范圍內(nèi)，即認為兩個制劑溶出總體過程相似2023年4月18日現(xiàn)在是27頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法R的相似等效限上限(δU)下限(δL)Q為各論中規(guī)定的溶出限度值（75％、80％等）δ為具有科學(xué)意義的參比制劑與受試制劑溶出曲線平均差，

一般δ=5%不同Q值的相似等效區(qū)間Q50%60%65%70%75%80%85%90%95%δL0.81820.84620.85710.86670.87500.88240.88890.89470.9000δU1.22221.18181.16671.15381.14291.13331.12501.11761.11112023年4月18日現(xiàn)在是28頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法Chow（周）&Ki方法局部比較：溶出比R的95％置信區(qū)間其中：溶出比

均值下限上限2023年4月18日現(xiàn)在是29頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法Chow（周）&Ki方法總體比較：溶出比R的95％置信區(qū)間下限上限2023年4月18日現(xiàn)在是30頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法Chow（周）&Shao（邵）方法用多項式描述溶出比：Rx為時間，β多項式系數(shù)2023年4月18日現(xiàn)在是31頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法Chow（周）&Shao（邵）方法用普通最小二乘回歸求得多項式系數(shù)β局部比較：溶出比R的95％置信區(qū)間其中2023年4月18日現(xiàn)在是32頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法Chow（周）&Shao（邵）方法總體比較：溶出比R的95％置信區(qū)間2023年4月18日現(xiàn)在是33頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法舉例Q=75％δL=87.5%δU=114.3%f2=64結(jié)論：相似

序號時間（小時）產(chǎn)品

12346810受試制劑134456166758591236516267838593337486069768491435516361798288536496268798189637526573829395739516169778593838496366798490935516167808896103749616879919111375163718389941237546470809093參比制劑1505668738086872434865717785923445463677481824485664708184935455663697681836465764677679857425662677381888445460657277839384654586670761046556365738085114755626776818512485562667378852023年4月18日現(xiàn)在是34頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法舉例結(jié)果與結(jié)論：有一個時間點超出δL=87.5%，δU=114.3%范圍，因此為“局部相似”方法時間（小時）Xt12346810

Rt均值Rt0.810.931.001.021.061.081.08Chow&KiL'(xt)Lt78.289.395.697.3101.9103.5103.6L't76.787.894.195.8100.4102102.1Chow&ShaoL(xt)8087.993.998.4104.2105.9102.4L'(xt)77.786.192.296.6102.1103.899.9Chow&KiU'(xt)Ut86.597.7103.9105.7110.2111.8111.9U't8899.2105.4107.2111.7113.3113.4Chow&ShaoU(xt)88.394.4100.1105.1111.6113.3111.3U'(xt)90.796.2101.8106.9113.7115.4113.82023年4月18日現(xiàn)在是35頁\一共有52頁\編輯于星期三2.溶出過程評價2.6相似等效限法優(yōu)點有統(tǒng)計學(xué)依據(jù)采用上下限的區(qū)間方法考慮了溶出度與時間的相互作用缺點依賴于Q，Q未知時無法判斷為點比較，不是整體比較。逐點按局部和總體比較，方法與計算復(fù)雜Chow&Ki方法時間是單調(diào)變量，不是隨機變量，用隨機設(shè)計存在誤判隨機設(shè)計不能評估總體的相似情況Chow&Shao方法溶出比值對時間的二項式回歸沒有物理意義2023年4月18日現(xiàn)在是36頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.1藥品質(zhì)量控制廣泛應(yīng)用溶出度釋放度應(yīng)用現(xiàn)狀單點控制適用范圍：一般制劑優(yōu)點：簡單、工作量小缺點：不能反映溶出過程，對溶出曲線有特殊要求的不適用多點控制適用范圍：緩控釋制劑、定位釋放制劑、對溶出曲線有特殊要求的制劑優(yōu)點：可以控制溶出過程缺點：方法煩瑣、工作量大2023年4月18日現(xiàn)在是37頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.2藥品再評價《國家食品藥品安全“十一五”規(guī)劃》“制定實施《藥品再評價管理辦法》，制訂配套的技術(shù)規(guī)范與指南，對已上市藥品分期分批開展再評價研究?！彼幤吩僭u價的定義根據(jù)上市藥品研究資料和不良反應(yīng)監(jiān)測，對上市藥品進行分析評價，并依據(jù)評價結(jié)論采取風(fēng)險控制措施的過程口服固體制劑再評價的關(guān)鍵溶出度成功案例：日本藥品品質(zhì)再評價工程摘自《藥品再評價管理辦法》（討論稿）2023年4月18日現(xiàn)在是38頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.2藥品再評價我國現(xiàn)狀藥品注冊對溶出度的技術(shù)要求低，幾乎沒有研發(fā)單位比較四種介質(zhì)溶出行為的無參比制劑，導(dǎo)致低水平的仿制，質(zhì)量差的藥品好仿！為做溶出度而做溶出度，不為療效只為合格溶出度標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)照顧大多數(shù)企業(yè)產(chǎn)品要合格，制定溶出條件“四不同”同一產(chǎn)品，不同質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，溶出度測定條件不同同一產(chǎn)品，不同企業(yè)，溶出過程不同同一企業(yè)，不同批號，溶出過程不同同一批號，不同片（粒），溶出過程不同2023年4月18日現(xiàn)在是39頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.3應(yīng)用實例頭孢氨芐片（4個不同企業(yè)）2023年4月18日現(xiàn)在是40頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.3應(yīng)用實例甲氨蝶呤片（同一廠家不同批號）2023年4月18日現(xiàn)在是41頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.3應(yīng)用實例甲硝唑片（不同企業(yè)）2023年4月18日現(xiàn)在是42頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.3應(yīng)用實例諾氟沙星膠囊（不同企業(yè)）2023年4月18日現(xiàn)在是43頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.3應(yīng)用實例異煙肼片（不同企業(yè)）2023年4月18日現(xiàn)在是44頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.3應(yīng)用實例鹽酸二甲雙胍片（不同企業(yè)）2023年4月18日現(xiàn)在是45頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.3應(yīng)用實例硝苯地平緩釋片（2個企業(yè)）2023年4月18日現(xiàn)在是46頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.3應(yīng)用實例尼莫地平片（不同企業(yè)）

2023年4月18日現(xiàn)在是47頁\一共有52頁\編輯于星期三3.溶出過程應(yīng)用3.4溶出度再研究的目的對我國當(dāng)前該品種藥品作出評價與原研廠產(chǎn)品是否有差異？企業(yè)