生化核酸的結(jié)構(gòu)與功能

生化核酸的結(jié)構(gòu)與功能第1頁(yè)/共99頁(yè)核酸的分類及分布存在于細(xì)胞核和線粒體

分布于細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、線粒體(deoxyribonucleicacid,DNA)(ribonucleicacid,RNA)脫氧核糖核酸

核糖核酸攜帶遺傳信息，并通過(guò)復(fù)制傳遞給下一代。是DNA轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物，參與遺傳信息的復(fù)制與表達(dá)。某些病毒RNA也可作為遺傳信息的載體第2頁(yè)/共99頁(yè)本章主要內(nèi)容第一節(jié)核酸的化學(xué)組成及一級(jí)結(jié)構(gòu)第二節(jié)DNA的空間結(jié)構(gòu)與功能第三節(jié)RNA的結(jié)構(gòu)與功能第四節(jié)核酸的理化性質(zhì)第五節(jié)核酸酶第3頁(yè)/共99頁(yè)第一節(jié)核酸的化學(xué)組成及其一級(jí)結(jié)構(gòu)TheChemicalComponentandPrimaryStructureofNucleicAcid第4頁(yè)/共99頁(yè)核酸(DNA和RNA)核苷酸核苷和脫氧核苷磷酸戊糖堿基嘌呤嘧啶核糖脫氧核糖核酸組成第5頁(yè)/共99頁(yè)第6頁(yè)/共99頁(yè)第7頁(yè)/共99頁(yè)嘌呤(purine，Pu)腺嘌呤(adenine,A)鳥嘌呤(guanine,G)堿基第8頁(yè)/共99頁(yè)嘧啶(pyrimidine，Py)胞嘧啶(cytosine,C)尿嘧啶(uracil,U)胸腺嘧啶(thymine,T)第9頁(yè)/共99頁(yè)戊糖（構(gòu)成RNA）1′2′3′4′5′核糖(ribose)（構(gòu)成DNA）脫氧核糖(deoxyribose)第10頁(yè)/共99頁(yè)（1）核苷：AR,GR,UR,CR（2）脫氧核苷：dAR,dGR,dTR,dCR3.核苷(ribonucleoside)的形成堿基和核糖（脫氧核糖）通過(guò)糖苷鍵連接形成核苷（脫氧核苷）連接方式：核糖或脫氧核糖C-1’與嘌呤環(huán)N9或嘧啶環(huán)N1之間形成糖苷鍵。1′1第11頁(yè)/共99頁(yè)脫氧核苷嘌呤N-9

或嘧啶N-1與脫氧核糖C-1通過(guò)β-N-糖苷鍵相連形成脫氧核苷(deoxyribonucleoside)。1′1第12頁(yè)/共99頁(yè)核苷酸：AMP,GMP,UMP,CMP脫氧核苷酸：dAMP,dGMP,dTMP,dCMP

4.核苷酸(ribonucleotide)形成核苷（脫氧核苷）和磷酸以磷酸酯鍵連接形成核苷酸（脫氧核苷酸）。

第13頁(yè)/共99頁(yè)5.體內(nèi)重要的游離核苷酸及其衍生物含核苷酸的生物活性物質(zhì)：NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD

等都含有

AMP

多磷酸核苷酸：NMP，NDP，NTP

環(huán)化核苷酸:cAMP，cGMPAMPADPATPcAMPNADP+NAD+第14頁(yè)/共99頁(yè)多磷酸核苷酸

5-核苷酸又可按其在5位縮合的磷酸基的多少，分為一磷酸核苷（核苷酸）、二磷酸核苷和三磷酸核苷。

第15頁(yè)/共99頁(yè)二、DNA是脫氧核苷酸通過(guò)3’,5’-磷酸二酯鍵連接形成的大分子一個(gè)脫氧核苷酸3的羥基與另一個(gè)核苷酸5的α-磷酸基團(tuán)縮合形成磷酸二酯鍵(phosphodiesterbond)。多個(gè)脫氧核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵構(gòu)成了具有方向性的線性分子，稱為多聚脫氧核苷酸(polydeoxynucleotide)，即DNA鏈。第16頁(yè)/共99頁(yè)3',5'-磷酸二酯鍵的形成第17頁(yè)/共99頁(yè)5′-末端3′-末端CGA磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵第18頁(yè)/共99頁(yè)三、RNA也是具有3’,5’-磷酸二酯鍵的線性大分子RNA也是多個(gè)核苷酸分子通過(guò)酯化反應(yīng)形成的線性大分子，并且具有方向性；RNA的戊糖是核糖；RNA的嘧啶是胞嘧啶和尿嘧啶。不同點(diǎn)第19頁(yè)/共99頁(yè)1.定義核酸中核苷酸的排列順序。由于核苷酸間的差異主要是堿基不同，所以也稱為堿基序列。5′端3′端CGA四、核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)是核苷酸的排列順序第20頁(yè)/共99頁(yè)AGP5PTPGPCPTPOH32.書寫方法：5pApCpTpGpCpT-OH

35

ACTGCT

3第21頁(yè)/共99頁(yè)

小的核酸片段(<50bp)常被稱為寡核苷酸。自然界中的DNA和RNA的長(zhǎng)度可以高達(dá)幾十萬(wàn)個(gè)堿基。*單鏈DNA和RNA用堿基數(shù)目表示。*雙鏈DNA和RNA用堿基對(duì)數(shù)目表示（bp或Kbp）。3.核酸分子的大小表示方法第22頁(yè)/共99頁(yè)（一）掌握核酸的分類、生物學(xué)功能、分子組成、化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。（二）掌握核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的概念及連接鍵。（三）掌握DNA的堿基組成及Chargaff規(guī)則、DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)要點(diǎn)。（四）熟悉DNA的超螺旋結(jié)構(gòu)、核小體的組成。（五）掌握RNA的分類、mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、tRNA一級(jí)結(jié)構(gòu)及二級(jí)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)、rRNA的功能。（六）掌握DNA的變性、DNA的復(fù)性及分子雜交。（七）了解DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的多樣性；其他小分子RNA及RNA組學(xué)；核酸的一般理化性質(zhì)；核酸酶的概念、分類及作用第23頁(yè)/共99頁(yè)1.掌握核酸的分類、生物學(xué)功能、分子組成、化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。2.掌握核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的概念及連接鍵。目的要求本節(jié):第24頁(yè)/共99頁(yè)第二節(jié)DNA的空間結(jié)構(gòu)與功能DimensionalStructureandFunctionofDNA第25頁(yè)/共99頁(yè)DNA的空間結(jié)構(gòu)又分為二級(jí)結(jié)構(gòu)(secondarystructure)和高級(jí)結(jié)構(gòu)。DNA的空間結(jié)構(gòu)(spatialstructure)構(gòu)成DNA的所有原子在三維空間具有確定的相對(duì)位置關(guān)系。第26頁(yè)/共99頁(yè)一、DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)是雙螺旋結(jié)構(gòu)第27頁(yè)/共99頁(yè)（一）DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的研究背景目錄

首先Chargaff等人用層析和紫外吸收研究了DNA的堿基組成。提出了Chargaff規(guī)則：①[A]=[T]；[G]=[C]。②不同生物種屬的DNA堿基組成不同。③同一個(gè)體不同器官.不同組織的DNA堿基組成相同。并提出DNA分子中A-T,G-C相互配對(duì)。

此后，F(xiàn)ranklin用X線衍射法獲得DNA分子三維空間照片，提出雙螺旋。

再后，Watson和Crik在總結(jié)前人試驗(yàn)認(rèn)識(shí)和數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上提出DNA了的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。又叫Watson和Crik結(jié)構(gòu)模型。第28頁(yè)/共99頁(yè)兩條多聚核苷酸鏈在空間的走向呈反向平行。圍繞著同一個(gè)螺旋軸形成右手螺旋的結(jié)構(gòu)。雙螺旋結(jié)構(gòu)的直徑為2.37nm，螺距為3.54nm。脫氧核糖和磷酸基團(tuán)組成的親水性骨架位于雙螺旋結(jié)構(gòu)的外側(cè)，疏水的堿基位于內(nèi)側(cè)。雙螺旋結(jié)構(gòu)的表面形成了一個(gè)大溝和一個(gè)小溝。（二）DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點(diǎn)1.DNA是反向平行、右手螺旋的雙鏈結(jié)構(gòu)第29頁(yè)/共99頁(yè)2.4nm3.54nm第30頁(yè)/共99頁(yè)親水性的骨架位于雙鏈的外側(cè)。疏水性的堿基位于雙鏈的內(nèi)側(cè)。骨架與堿基第31頁(yè)/共99頁(yè)2.DNA雙鏈之間形成了互補(bǔ)堿基對(duì)堿基配對(duì)關(guān)系稱為互補(bǔ)堿基對(duì)DNA的兩條鏈則互為互補(bǔ)鏈堿基對(duì)平面與螺旋軸垂直。（二）DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點(diǎn)維持兩條DNA鏈相互結(jié)合的力是鏈間堿基對(duì)形成的氫鍵。堿基結(jié)合具有嚴(yán)格的配對(duì)規(guī)律:A與T結(jié)合，G與C結(jié)合，這種配對(duì)關(guān)系，稱為堿基互補(bǔ)。A和T之間形成兩個(gè)氫鍵，G與C之間形成三個(gè)氫鍵。第32頁(yè)/共99頁(yè)堿基互補(bǔ)配對(duì):G=CA=T第33頁(yè)/共99頁(yè)相鄰兩個(gè)堿基對(duì)會(huì)有重疊，產(chǎn)生了疏水性的堿基堆積力。堿基堆積力和互補(bǔ)堿基對(duì)的氫鍵共同維系著DNA結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。3.疏水作用力和氫鍵共同維系著DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。（二）DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點(diǎn)氫鍵維持雙鏈橫向穩(wěn)定性，堿基堆積力維持雙鏈縱向穩(wěn)定性。第34頁(yè)/共99頁(yè)（三）DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的多樣性

以上由Watson和Crick提出的右手螺旋DNA，被稱為B-DNA，是生理?xiàng)l件下最穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)形式。后來(lái)發(fā)現(xiàn)DNA結(jié)構(gòu)不是一成不變的，在溶液的離子強(qiáng)度或相對(duì)濕度改變時(shí)，DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的螺距、直徑、旋轉(zhuǎn)角及溝的深淺等都會(huì)發(fā)生一些變化，定義為A-DNA。此外，Rich等人發(fā)現(xiàn)了左手螺旋DNA，被稱為Z-DNA。因此，右手雙螺旋結(jié)構(gòu)不是自然界DNA的唯一存在形式。不同構(gòu)象形式的DNA在功能上可能有所不同。第35頁(yè)/共99頁(yè)（三）DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的多樣性第36頁(yè)/共99頁(yè)（四）DNA的多鏈螺旋結(jié)構(gòu)在酸性的溶液中，胞嘧啶的N-3原子被質(zhì)子化，可與鳥嘌呤的N-7原子形成氫鍵；同時(shí)，胞嘧啶的N-4的氫原子也可與鳥嘌呤的O-6形成氫鍵，這種氫鍵被稱為Hoogsteen氫鍵。Hoogsteen氫鍵Hoogsteen氫鍵，不破壞Watson-Crick氫鍵，由此形成了C＋GC的三鏈結(jié)構(gòu)(triplex)。第37頁(yè)/共99頁(yè)二、DNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)是超螺旋結(jié)構(gòu)超螺旋結(jié)構(gòu)(superhelix或supercoil)DNA雙螺旋鏈再盤繞即形成超螺旋結(jié)構(gòu)。正超螺旋(positivesupercoil)盤繞方向與DNA雙螺旋方同相同。負(fù)超螺旋(negativesupercoil)盤繞方向與DNA雙螺旋方向相反。

第38頁(yè)/共99頁(yè)原核生物DNA多為環(huán)狀，以負(fù)超螺旋的形式存在，平均每200堿基就有一個(gè)超螺旋形成。第39頁(yè)/共99頁(yè)（二）真核生物DNA的高度有序和高度致密的結(jié)構(gòu)真核生物DNA以非常有序的形式存在于細(xì)胞核內(nèi)。在細(xì)胞周期的大部分時(shí)間里，DNA以松散的染色質(zhì)(chromatin)形式存在，在細(xì)胞分裂期，則形成高度致密的染色體(chromosome)。第40頁(yè)/共99頁(yè)DNA染色質(zhì)呈現(xiàn)出的串珠樣結(jié)構(gòu)。染色質(zhì)的基本單位是核小體(nucleosome)。DNA染色質(zhì)的電鏡圖像第41頁(yè)/共99頁(yè)核小體的組成DNA：約200bp組蛋白：H1H2A，H2BH3H4第42頁(yè)/共99頁(yè)DNA盤繞組蛋白八聚體1.75周，形成核小體重復(fù)單位第43頁(yè)/共99頁(yè)“Beads-on-a-string”conformation.每六個(gè)核小體盤繞一周形成單玫瑰花環(huán)第44頁(yè)/共99頁(yè)chromosomeChromatinfibernucleosomehistoneChromatinfilament第45頁(yè)/共99頁(yè)DNA經(jīng)過(guò)多次折疊，被壓縮了8000～10000倍，組裝在直徑只有為數(shù)微米的細(xì)胞核內(nèi)。第46頁(yè)/共99頁(yè)真核生物的染色體第47頁(yè)/共99頁(yè)DNA的基本功能是以基因的形式荷載遺傳信息，并作為基因復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的模板。它是生命遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)，也是個(gè)體生命活動(dòng)的信息基礎(chǔ)?；驈慕Y(jié)構(gòu)上定義，是指DNA分子中的特定區(qū)段，其中的核苷酸排列順序決定了基因的功能。三、DNA是遺傳信息的物質(zhì)基礎(chǔ)第48頁(yè)/共99頁(yè)第三節(jié)

RNA的結(jié)構(gòu)與功能StructureandFunctionofRNA第49頁(yè)/共99頁(yè)RNA與蛋白質(zhì)共同負(fù)責(zé)基因的表達(dá)和表達(dá)過(guò)程的調(diào)控。RNA通常以單鏈的形式存在，但有復(fù)雜的局部二級(jí)結(jié)構(gòu)或三級(jí)結(jié)構(gòu)。RNA比DNA小的多。RNA的種類、大小和結(jié)構(gòu)遠(yuǎn)比DNA表現(xiàn)出多樣性。第50頁(yè)/共99頁(yè)RNA的種類、分布、功能第51頁(yè)/共99頁(yè)信使RNA(messengerRNA,mRNA)是合成蛋白質(zhì)的模板。不均一核RNA(hnRNA)含有內(nèi)含子(intron)和外顯子(exon)。外顯子是氨基酸的編碼序列，而內(nèi)含子是非編碼序列。hnRNA經(jīng)過(guò)剪切后成為成熟的mRNA。一、mRNA是蛋白質(zhì)合成中的模板第52頁(yè)/共99頁(yè)hnRNA內(nèi)含子(intron)mRNAmRNA成熟過(guò)程

外顯子(exon)第53頁(yè)/共99頁(yè)從AUG開始，每三個(gè)核苷酸為一組編碼了一個(gè)氨基酸，稱為三聯(lián)體密碼(codon)。成熟的mRNA由氨基酸編碼區(qū)和非編碼區(qū)構(gòu)成。5-末端的帽子(cap)結(jié)構(gòu)和3-末端的多聚A尾(poly-Atail)結(jié)構(gòu)。成熟的真核生物mRNA第54頁(yè)/共99頁(yè)帽子結(jié)構(gòu):m7GpppNm（一）大部分真核細(xì)胞mRNA的5'末端都以7-甲基鳥嘌呤-三磷酸核苷為起始結(jié)構(gòu)mRNA的帽結(jié)構(gòu)可以與帽結(jié)合蛋白(capbindingprotein，CBP)結(jié)合。第55頁(yè)/共99頁(yè)加帽過(guò)程第56頁(yè)/共99頁(yè)真核生物的mRNA的3-末端轉(zhuǎn)錄后加上一段長(zhǎng)短不一的聚腺苷酸。（二）在真核生物mRNA的3'末端有多聚腺苷酸結(jié)構(gòu)第57頁(yè)/共99頁(yè)加尾過(guò)程第58頁(yè)/共99頁(yè)mRNA核內(nèi)向胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位mRNA的穩(wěn)定性維系翻譯起始的調(diào)控帽子結(jié)構(gòu)和多聚A尾的功能第59頁(yè)/共99頁(yè)（三）mRNA依照自身的堿基順序指導(dǎo)蛋白質(zhì)氨基酸順序的合成從mRNA分子5'末端起的第一個(gè)AUG開始，每3個(gè)核苷酸為一組稱為密碼子(codon)或三聯(lián)體密碼(tripletcode)。AUG被稱為起始密碼子；決定肽鏈終止的密碼子則稱為終止密碼子。位于起始密碼子和終止密碼子之間的核苷酸序列稱為開放閱讀框(openreadingframe,ORF)，決定了多肽鏈的氨基酸序列。第60頁(yè)/共99頁(yè)（四）mRNA的成熟過(guò)程是hnRNA的剪接過(guò)程卵清蛋白mRNA的成熟第61頁(yè)/共99頁(yè)*

tRNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)含10~20%稀有堿基，如DHU3′末端為—CCA-OH5′末端大多數(shù)為G

具有TC二、轉(zhuǎn)運(yùn)RNA*tRNA的功能活化、搬運(yùn)氨基酸到核糖體，參與蛋白質(zhì)的翻譯。第62頁(yè)/共99頁(yè)tRNA是分子最小，但含有稀有堿基最多的RNA，其稀有堿基的含量可多達(dá)20%。tRNA是保守性最強(qiáng)的RNA。tRNA是單鏈核酸，但其分子中的某些局部也可形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。

第63頁(yè)/共99頁(yè)N,N二甲基鳥嘌呤N6-異戊烯腺嘌呤雙氫尿嘧啶4-巰尿嘧啶1.稀有堿基第64頁(yè)/共99頁(yè)tRNA具有局部的莖環(huán)(stem-loop)結(jié)構(gòu)或發(fā)卡(hairpin)結(jié)構(gòu)。（二）tRNA具有莖環(huán)結(jié)構(gòu)tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)——三葉草形氨基酸臂DHU環(huán)反密碼環(huán)TψC環(huán)附加叉第65頁(yè)/共99頁(yè)tRNA的倒L三級(jí)結(jié)構(gòu)第66頁(yè)/共99頁(yè)tRNA的3-末端都是以CCA結(jié)尾。3-末端的A與氨基酸共價(jià)連結(jié)，tRNA成為了氨基酸的載體。不同的tRNA可以結(jié)合不同的氨基酸。（三）tRNA的3-末端連接氨基酸第67頁(yè)/共99頁(yè)tRNA的反密碼子環(huán)上有一個(gè)由三個(gè)核苷酸構(gòu)成的反密碼子(anticodon)。tRNA上的反密碼子依照堿基互補(bǔ)的原則識(shí)別mRNA上的密碼子。（四）tRNA的反密碼子識(shí)別mRNA的密碼子第68頁(yè)/共99頁(yè)核蛋白體RNA(ribosomalRNA，rRNA)是細(xì)胞內(nèi)含量最多的RNA(>80％)。rRNA與核蛋白體蛋白結(jié)合組成核蛋白體(ribosome)，為蛋白質(zhì)的合成提供場(chǎng)所。三、以rRNA為組分的核蛋白體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所第69頁(yè)/共99頁(yè)核蛋白體的組成原核生物（以大腸桿菌為例）真核生物（以小鼠肝為例）小亞基30S40SrRNA16S1542個(gè)核苷酸18S1874個(gè)核苷酸蛋白質(zhì)21種占總重量的40%33種占總重量的50%大亞基50S60SrRNA23S5S2940個(gè)核苷酸120個(gè)核苷酸28S5.85S5S4718個(gè)核苷酸160個(gè)核苷酸120個(gè)核苷酸蛋白質(zhì)31種占總重量的30%49種占總重量的35%第70頁(yè)/共99頁(yè)大腸桿菌的核蛋白體第71頁(yè)/共99頁(yè)18S

rRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)第72頁(yè)/共99頁(yè)蛋白質(zhì)合成時(shí)形成的復(fù)合體第73頁(yè)/共99頁(yè)RNA組學(xué)是研究細(xì)胞內(nèi)snmRNA的種類、結(jié)構(gòu)和功能。同一生物體內(nèi)不同種類的細(xì)胞、同一細(xì)胞在不同時(shí)空狀態(tài)下snmRNAs表達(dá)譜的變化，以及與功能之間的關(guān)系。四、snmRNA參與了基因表達(dá)的調(diào)控細(xì)胞的不同部位存在的許多其他種類的小分子RNA，統(tǒng)稱為非mRNA小RNA(smallnon-messengerRNAs,snmRNAs)。snmRNAs第74頁(yè)/共99頁(yè)核內(nèi)小RNA核仁小RNA胞質(zhì)小RNA催化性小RNA小片段干涉RNA

參與hnRNA的加工剪接snmRNAs的種類snmRNAs的功能第75頁(yè)/共99頁(yè)核酶某些小RNA分子具有催化特定RNA降解的活性，這種具有催化作用的小RNA亦被稱為核酶(ribozyme)或催化性RNA(catalyticRNA)。第76頁(yè)/共99頁(yè)siRNA是生物宿主對(duì)外源侵入的基因表達(dá)的雙鏈RNA進(jìn)行切割所產(chǎn)生的特定長(zhǎng)度和特定核酸序列的小片段RNA。siRNA可以與外源基因表達(dá)的mRNA相結(jié)合，并誘發(fā)這些mRNA的降解?；诖藱C(jī)理，人們發(fā)明了RNA干擾(RNAinterference，RNAi)技術(shù)。小片段干擾RNA第77頁(yè)/共99頁(yè)原核生物基因表達(dá)的特異性五、核酸在真核細(xì)胞和原核細(xì)胞中表現(xiàn)了不同的時(shí)空特性第78頁(yè)/共99頁(yè)真核生物基因表達(dá)的特異性第79頁(yè)/共99頁(yè)核酸的理化性質(zhì)ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid第四節(jié)第80頁(yè)/共99頁(yè)核酸的酸堿及溶解度性質(zhì)核酸為多元酸，具有較強(qiáng)的酸性。核酸的高分子性質(zhì)粘度：DNA>RNAdsDNA>ssDNA沉降行為:不同構(gòu)象的核酸分子的沉降的速率有很大差異，這是超速離心法提取和純化核酸的理論基礎(chǔ)。第81頁(yè)/共99頁(yè)核酸在波長(zhǎng)260nm

處有強(qiáng)烈的吸收，是由堿基的共軛雙鍵所決定的。這一特性常用作核酸的定性和定量分析。一、核酸分子具有強(qiáng)烈的紫外吸收第82頁(yè)/共99頁(yè)堿基的紫外吸收光譜第83頁(yè)/共99頁(yè)DNA或RNA的定量A260=1.0相當(dāng)于50μg/ml雙鏈DNA(dsDNA)40μg/ml單鏈DNA(ssDNAorRNA)20μg/ml寡核苷酸確定樣品中核酸的純度

純

DNA:A260/A280=1.8

純

RNA:A260/A280=2.0紫外吸收的應(yīng)用第84頁(yè)/共99頁(yè)二、DNA變性是雙鏈解離為單鏈的過(guò)程在某些理化因素作用下，DNA雙鏈解開成兩條單鏈的過(guò)程。定義DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂。第85頁(yè)/共99頁(yè)協(xié)同性的DNA解鏈高溫或極端的pHDNA的變性第86頁(yè)/共99頁(yè)部分變性DNA的電鏡圖像第87頁(yè)/共99頁(yè)增色效應(yīng)(hyperchromiceffect)：DNA變性時(shí)其溶液OD260增高的現(xiàn)象。DNA解鏈時(shí)的紫外吸收變化第88頁(yè)/共99頁(yè)DNA的解鏈曲線連續(xù)加熱DNA的過(guò)程中以溫度相對(duì)于A260值作圖，所得的曲線稱為解鏈曲線。解鏈過(guò)程中，紫外吸光度的