植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)-赤霉素對(duì)α-淀粉酶的誘導(dǎo)形成

赤霉素誘導(dǎo)α-淀粉酶的合成王衍安精選ppt主要內(nèi)容基本知識(shí)α-淀粉酶、赤霉素實(shí)驗(yàn)?zāi)康尿?yàn)證赤霉素誘導(dǎo)α-淀粉酶形成的生理作用，掌握對(duì)該酶活性定量測(cè)定的原理與方法?；炯寄?、理解赤霉素對(duì)α-淀粉酶的誘導(dǎo)的原理2、赤霉素的生物學(xué)測(cè)定方法3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制并分析結(jié)果精選ppt實(shí)驗(yàn)原理：種子萌發(fā)過(guò)程中消耗貯藏物質(zhì)，需要在一系列酶的催化作用下才能進(jìn)行。這些酶有的已經(jīng)存在于干燥種子中，有的需要在種子吸水后重新合成。精選ppt實(shí)驗(yàn)原理：種子萌發(fā)過(guò)程中淀粉的分解主要是在淀粉酶的催化下完成的。淀粉酶在植物中存在多種形式：α-淀粉酶β-淀粉酶β-淀粉酶已經(jīng)存在于干燥種子中，而

α-淀粉酶不存在干燥種子中，需要在種子吸水后重新合成。精選ppt實(shí)驗(yàn)原理：淀粉性種子在萌動(dòng)過(guò)程胚釋放GAα-淀粉酶基因表達(dá)α-淀粉酶催化淀粉水解為糖糊粉層細(xì)胞胚乳精選ppt在萌發(fā)的禾谷類種子中，GAS刺激許多酶的產(chǎn)生，最顯著的是α-淀粉酶誘導(dǎo)α-淀粉酶的形成

胚芽鞘

盾片

GA

根

水解時(shí)

果皮和種皮

糊粉層

胚乳

大麥種子萌發(fā)時(shí)赤霉素誘導(dǎo)水解酶生成和作用示意圖

精選ppt赤霉素誘導(dǎo)糊粉層細(xì)胞淀粉酶的合成和分泌精選ppt實(shí)驗(yàn)原理：外加的赤霉素可以代替胚的釋放作用，從而誘導(dǎo)α-淀粉酶的合成。

這個(gè)反應(yīng)是極其專一的，被用來(lái)作為赤霉素的生物鑒定法去胚的吸脹大麥種子外加赤霉素，誘導(dǎo)α-淀粉酶形成，催化淀粉水解為糖。精選ppt實(shí)驗(yàn)原理測(cè)定依據(jù)：碘試法

碘（I2–KI）遇淀粉或糊精會(huì)出現(xiàn)不同的顏色通過(guò)碘試法比色測(cè)定淀粉在酶催化反應(yīng)過(guò)程中的消耗量，可以定性和定量地分析α-淀粉酶的力。淀粉的聚合度和生成碘包合物的顏色

聚合度3.87.412.918.320.229.334.7以上顏色無(wú)色淡紅紅棕紅紫色藍(lán)紫色藍(lán)色精選ppt實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

用不同濃度赤霉素處理淀粉類種子，通過(guò)碘試法定量測(cè)定α-淀粉酶的活力。實(shí)驗(yàn)材料：大麥種子實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)：

無(wú)胚、有胚、無(wú)胚＋GA處理GA3＝2×10–8mol/L精選ppt實(shí)驗(yàn)步驟（一）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取不同濃度的淀粉（0、10、20、30、40、50μg/ml）各2.0ml，分別加入I2-KI溶液2.0ml，蒸餾水5.0ml，充分搖勻，于波長(zhǎng)580nm下測(cè)定吸光度值，以淀粉濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

C(μg/ml)=151.97D580+0.058R2=0.9995精選ppt（二）操作步驟1.選種與處理:選取大小一致、健康的大麥種子80粒，用刀片將每粒種子橫切成兩半，無(wú)胚的半粒和有胚的半粒。XY精選ppt有胚無(wú)胚有胚精選ppt有胚無(wú)胚精選ppt處理赤霉素溶液醋酸緩沖液（ml）試驗(yàn)材料用量重復(fù)編號(hào)濃度（mol.L-1）用量（ml）P01110個(gè)有胚半粒P1～4O01110個(gè)無(wú)胚半粒O5～8G2×10-81110個(gè)無(wú)胚半粒G9～12

2.取12只離心試管，編號(hào)按照下表加入各種溶液和材料精選ppt（二）材料的處理與測(cè)定1.選種與處理選取大小一致、健康的大麥種子60粒，用刀片將每粒種子橫切成兩半，使成無(wú)胚的半粒和有胚的半粒，分別置于新配制的1％次氯酸鈉溶液中，消毒15min，取出用無(wú)菌水沖洗數(shù)次，備用。2.淀粉酶的誘導(dǎo)取具塞試管12只，按表1加入各種溶液和材料，于30℃下振蕩培養(yǎng)24h。精選ppt處理重復(fù)0.1％淀粉磷酸液（ml）培養(yǎng)液（ml）30℃保溫時(shí)間（min）I2-KI溶液（ml）蒸餾水（ml）P1~41.9有胚0.1搖勻1025O5~81.9無(wú)胚0.1搖勻1025G9~121.9無(wú)胚GA-80.1搖勻10253.淀粉酶活性分析：

0.1％淀粉磷酸液放置在冰箱中，使用后放回原處精選ppt實(shí)驗(yàn)步驟選種、切種淀粉酶的誘導(dǎo)（30℃下培養(yǎng)24h）酶提液0.1ml30℃保溫10minI2-KI溶液2.0mL蒸餾水5.0mL淀粉液1.9ml計(jì)算比色（580nm)精選ppt

波長(zhǎng)580nm下測(cè)定吸光度空白？赤霉素對(duì)α－淀粉酶的誘導(dǎo)形成數(shù)據(jù)記載表無(wú)胚有胚無(wú)胚＋GA重復(fù)1重復(fù)2重復(fù)3重復(fù)4平均值淀粉含量精選ppt

4.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算淀粉的含量C(μg/ml)=151.97D580+0.058R2=0.9995精選ppt結(jié)果計(jì)算

1.處理O為淀粉的原始量（X）2.處理P、G分別為反應(yīng)后淀粉的剩余量（Y）3.淀粉水解量淀粉水解量（%）=X-Y×100X精選ppt實(shí)驗(yàn)步驟：1.先使用其他班級(jí)已經(jīng)進(jìn)行淀粉酶誘導(dǎo)溶液，測(cè)定α－淀粉酶活性；2.切種子處理3.處理標(biāo)號(hào)必需準(zhǔn)確，嚴(yán)格按照處理順序排放精選ppt思考題：1.本實(shí)驗(yàn)為何要將大麥種子分成有胚和無(wú)胚的半粒?2.為何處理O和處理P中都沒(méi)有加入赤霉素溶液，但反應(yīng)完后兩者溶液的吸光值卻不同?3.