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畜禽血常規(guī)檢驗演示文稿現(xiàn)在是1頁\一共有41頁\編輯于星期日內(nèi)容實驗目的與要求1血樣的采取與抗凝2血細胞計數(shù)檢查3現(xiàn)在是2頁\一共有41頁\編輯于星期日目的與要求掌握動物血樣的采取與抗凝方法。掌握血紅蛋白測定、紅細胞及白細胞計數(shù)的操作方法與注意事項。現(xiàn)在是3頁\一共有41頁\編輯于星期日一、血樣的采取與抗凝1、血樣的采取①采血前的準備:采血用應事先消毒滅菌、干燥處理。采血部位應剪毛按常規(guī)消毒。②少量用血,一般可在耳尖、冠頂及靜脈末梢等處進行采取。③多量用血,大動物可在頸靜脈處進行采?。回i可在前腔靜脈處采??;禽類在翅內(nèi)靜脈處采取,必要時可進行心臟穿刺采取。小動物一般采用心臟采血?,F(xiàn)在是4頁\一共有41頁\編輯于星期日各種動物的采血部位采血部位畜種采血部位畜種頸靜脈馬、牛、羊耳靜脈豬、羊、犬、貓、實驗動物前腔靜脈豬翼下肱靜脈家禽隱靜脈犬、貓、羊蹼間靜脈鴨、鵝前肢頭靜脈犬、貓、豬冠或肉髯雞心臟兔、家禽、豚鼠斷尾豬、實驗動物現(xiàn)在是5頁\一共有41頁\編輯于星期日現(xiàn)在是6頁\一共有41頁\編輯于星期日2、血樣的抗凝獸醫(yī)臨床常用的抗凝劑、使用方法及用圖,見下表??鼓齽┛鼓龣C制常用濃度使用方法用途肝素阻止凝血酶元轉(zhuǎn)化為凝血酶而阻止血凝0.5~1%溶液配制后應及時使用,每10ml血液加入0.1~0.2ml。適用于多數(shù)血液實驗診斷檢驗,不宜用于血涂片檢查。檸檬酸鈉(枸櫞酸鈉)與鈣離子形成非離子的可溶性化合物而阻止血凝3.8%溶液每10ml血液加入1ml。適用于紅細胞沉降率、輸血用抗凝,但不宜用于血液生化指標測定。EDTA-Na2螯合血中鈣離子而阻止血凝10%溶液每10ml血液加入0.1~0.2ml。適用與一般血液學檢查,不宜用于鈉、鈣的測定。草酸鹽合劑(草酸銨+草酸鉀)與鈣離子結(jié)合,形成不溶解的草酸鈣而阻止血凝1~2%的草酸鹽溶液取此液先作抗凝瓶。1ml此液可抗凝10ml血樣(制作抗凝瓶應小于80℃)。有毒不能用于輸血的抗凝,不宜用于白細胞分類計數(shù)與血小板計數(shù)。肝素現(xiàn)在是7頁\一共有41頁\編輯于星期日血液學檢查項目與采血后可保存的時間檢查項目保存時間(h)檢查項目保存時間(h)白細胞計數(shù)2~3血紅蛋白含量48紅細胞計數(shù)24紅細胞壓積容量24血小板計數(shù)1紅細胞沉降速率2~3網(wǎng)織紅細胞計數(shù)2~3白細胞分類計數(shù)1~2現(xiàn)在是8頁\一共有41頁\編輯于星期日二、紅細胞計數(shù)(RBC):顯微鏡計數(shù)法1、原理血液經(jīng)200倍稀釋后,充入血細胞計數(shù)板,用顯微鏡觀察,計數(shù)一定容積內(nèi)的紅細胞數(shù)并換算成每升血液中的紅細胞數(shù)。

2、器材與試劑改良紐巴氏計數(shù)板、蓋玻片、沙利氏吸管、5ml吸管、試管、小玻棒、顯微鏡、計數(shù)器、0.85%氯化鈉稀釋液?,F(xiàn)在是9頁\一共有41頁\編輯于星期日3、方法①用5毫升吸管準確吸稀釋液2毫升于試管中,用沙利氏吸管吸取血樣10微升,用脫脂棉擦去沙利氏吸管外壁多余的血液后插入試管底部,輕輕壓出血液于稀釋液中,再用上清液吸、吹數(shù)次,以洗出沙利氏管內(nèi)黏附的血細胞,充分混勻后備用。②將稀釋后的血樣用小玻棒取一滴,置于計數(shù)板與蓋玻片交界的邊緣,讓其自然浸入,使稀釋血樣擴散入計數(shù)室內(nèi),靜置2~3分鐘,鏡檢。③計數(shù)時用低倍鏡,依次計數(shù)中央大方格內(nèi)的四角和正中5個中方格,共80個小方格的紅細胞數(shù)。為避免重復和遺漏,計數(shù)時應按一定順序進行。注意壓在雙線上的紅細胞,遵守“數(shù)左不數(shù)右,數(shù)上不數(shù)下”計數(shù)法則?,F(xiàn)在是10頁\一共有41頁\編輯于星期日4、計算方法每mm3血液內(nèi)紅細胞總數(shù)=5個中方格內(nèi)紅細胞數(shù)×5×10×200×106=5個中方格內(nèi)紅細胞數(shù)×1010

單位:個/升式中×5—5個中方格換算成1個大方格

×10—1個大方格容積為0.1微升,換算成1.0微升

×200—血液的稀釋倍數(shù)

×106—由微升換算成升注意防凝、防溶、取樣正確。現(xiàn)在是11頁\一共有41頁\編輯于星期日5、正常參考值健康動物除山羊的紅細胞數(shù)較多外,其他動物的紅細胞數(shù)約為6.0×1012~8.0×1012/L。6、臨床意義

①相對增多:脫水、急性胃腸炎、腸便秘、滲出性胸膜炎、滲出性腹膜炎、某些傳染??;

②絕對增多:紅細胞增多癥,見于代償性機能不全的心臟病及慢性肺部疾??;

③減少:各種貧血、出血性、溶血性、骨髓造血功能不全性貧血、營養(yǎng)不良性貧血、繼發(fā)性貧血?,F(xiàn)在是12頁\一共有41頁\編輯于星期日三、白細胞計數(shù)(WBC):顯微鏡計數(shù)法1、原理:用白細胞稀釋液破壞紅細胞后,混勻充入計數(shù)池中,在顯微鏡下計數(shù)一定容積中的白細胞數(shù),經(jīng)換算求得每升血液中的白細胞總數(shù)。2、試劑與設(shè)備:改良紐巴氏計數(shù)板、蓋玻片、沙利氏吸管、1ml吸管、試管、小玻棒、顯微鏡、計數(shù)器、白細胞稀釋液(2%冰醋酸溶液或1%鹽酸溶液)?,F(xiàn)在是13頁\一共有41頁\編輯于星期日3、方法:用1毫升移液管吸取白細胞稀釋液0.4毫升于小試管中,再用沙利氏吸管吸取血樣至20微升處,用脫脂棉擦去吸管周圍多余血液,然后將吸管插入小試管底部,緩慢放出血液后用上清液反復吹洗數(shù)次,以洗凈管內(nèi)所粘附的血液,充分混勻振蕩,備用。取樣與計數(shù)方法與紅細胞計數(shù)方法相同,計數(shù)在計數(shù)室四角的四個大方格內(nèi)的白細胞數(shù)?,F(xiàn)在是14頁\一共有41頁\編輯于星期日4、計算方法:每升血液內(nèi)白細胞總數(shù)=四個大方格白細胞數(shù)÷4×10×20×106

單位:個/升5、注意事項:初學者容易把塵埃異物與白細胞混淆,可用高倍鏡觀察,白細胞有細胞核的結(jié)構(gòu),而塵埃異物的形狀不規(guī)則,無細胞結(jié)構(gòu)?,F(xiàn)在是15頁\一共有41頁\編輯于星期日5、正常參考值(附后表)6、臨床意義①增多:細菌性感染、炎癥、白血病、惡性腫瘤、中毒性疾病。②減少:病毒性傳染病、犬瘟熱、貓泛白血病減少癥、各種疾病晚期;再生障礙性貧血;藥物性降低:磺胺類、氯霉素、青霉素、鏈霉素、氨基比林、水楊酸鈉等;血液原蟲病、血液孢子病?,F(xiàn)在是16頁\一共有41頁\編輯于星期日各種健康動物血紅蛋白數(shù)、紅細胞數(shù)及白細胞數(shù)參考值動物Hb/(g·L-1)RBC/(1012·L-1)WBC/(109·L-1)水牛123.0±16.65.91±0.988.04±0.30黃牛95.5±10.07.24±1.578.43±2.08乳牛83.7±7.05.97±0.869.41±2.13綿羊92.6±5.18.42±1.208.45±1.90山羊118.0±10.315.23±1.0312.47±0.90豬112.3±13.75.51±0.3114.02±0.93犬133.6±13.56.57±0.3410.93±1.29雞84.9±30.43.04±0.28/資料見:安麗英編著.獸醫(yī)實驗診斷.中國農(nóng)業(yè)大學出版社.2000年:25.現(xiàn)在是17頁\一共有41頁\編輯于星期日現(xiàn)在是18頁\一共有41頁\編輯于星期日現(xiàn)在是19頁\一共有41頁\編輯于星期日全自動血液細胞分析儀檢驗動物種類多有12種動物檢測模式,如狗、貓、馬、牛、羊、猴、鼠,并有四種用戶自定義模式。適用范圍寵物醫(yī)院動物檢疫部門畜牧獸醫(yī)院動物園科研院校實驗中心現(xiàn)在是20頁\一共有41頁\編輯于星期日操作方便嵌入式標本處理和測量單元全新高精度血液處理技術(shù),抗凝全血9.6μl試劑自動加入,能直接感應試劑余量排堵方便20項檢測結(jié)果及WBC、RBC、PLT直方圖同屏顯示9.6μl抗凝血只需按“計數(shù)“健即被吸取分析結(jié)果可靠界面鼠標操作,參數(shù)支持人工調(diào)整提供配套的動物血檢測專用試劑有報告打印功能現(xiàn)在是21頁\一共有41頁\編輯于星期日主要技術(shù)參數(shù)工作原理:電阻抗法,氰化高鐵血紅蛋白法及無氰化物的SFT法檢測參數(shù):白細胞三分群,23項參數(shù)(含WBC、RBC、PLT彩色直方圖)標準用量:9.6μl(全血模式)20μl(預稀釋模式)檢測速度:≥40樣本/小時,可24小時開機有自動休眠及喚醒功能結(jié)果存儲:主機自動存儲12000份樣本的全部參數(shù)包括直方圖、歷史數(shù)據(jù)的管理查詢更便捷操作語言:全中文動物種類:狗、貓、馬、牛、羊、猴、鼠等八種和四種用戶自定義模式質(zhì)控方式:X-B、L-J、、SD、CV標準方式:自動校準和人工校準顯示屏:大屏幕彩色液晶顯示,640480分辨率信息:支持多種快速中文輸入接口:一個并行打印機接口,兩個USB接口,兩個PS/2接口,兩個RS232接口(支持聯(lián)網(wǎng))電源:AC220V50HZ現(xiàn)在是22頁\一共有41頁\編輯于星期日血常規(guī)化驗單“血常規(guī)”檢查主要有四項指標:白細胞數(shù)(WBC計數(shù))、紅細胞數(shù)(RBC計數(shù))、血紅蛋白(HB)和血小板數(shù)(PLT計數(shù))。

白細胞數(shù)(WBC),它的多少反映身體抵御、殺滅致病微生物能力的強弱。如果減少通常是由于病毒感染、再生障礙性貧血、傷寒或瘧疾、營養(yǎng)不良、極度衰竭,以及脾功能亢進和自身免疫性疾病等。增多主要是急性化膿感染、炎癥存在、嚴重的組織損傷及大量的血細胞破壞、急性大出血和溶血、白血病及某些腫瘤等。

RBC、HB分別是紅細胞和血紅蛋白,是反映貧血的兩個指標。當發(fā)生貧血、白血病、失血等時,會減少;當發(fā)生嘔吐、腹瀉、缺氧和心肺疾病時增多。

紅細胞(RBC)計數(shù),增多的病理性原因有嚴重的肺氣腫、肺原性心臟病、真性紅細胞增多癥、慢性一氧化碳(CO)中毒等。減少的病理性原因有缺鐵性貧血、溶血性貧血、營養(yǎng)不良性貧血、再生障礙性貧血、失血性貧血等。

血紅蛋白(HB),其病理性原因與“紅細胞數(shù)”相同,但在各種貧血時,由于紅細胞與血紅蛋白含量不同,二者的減少程度可以不一致。因此,同時測定紅細胞和血紅蛋白,對貧血類型的鑒別有重要意義。

血小板數(shù)(PLT),它在止血、凝血過程中起著十分重要的作用。正常畜禽每天血小板數(shù)有一定的波動,午后較早晨高,高原地區(qū)較平原地區(qū)高,妊娠中晚期升高,分娩后1-2天降低;劇烈活動和飼喂后升高,休息后又恢復到原來水平。如果低于正常值,就要引起重視,因減少常見于急性白血病、難治性貧血、脾功能亢進、彌漫性血管內(nèi)凝血等;如果大于正常值,也不能馬虎,因在慢性粒細胞白血病、溶血性貧血及急性化膿性感染時,是增多的。現(xiàn)在是23頁\一共有41頁\編輯于星期日當血常規(guī)化驗檢查的這些指標偏離(指標或高、或低)正常值范圍時,說明受檢者的身體存在某一方面的病變。如果HGB值低于正常值,就說明有貧血存在,應該進一步檢查是什么性質(zhì)的貧血。如果HGB值高于正常值,可能是因為患有血紅蛋白增高癥或者血液被濃縮的緣故。白細胞代表的機體的防御系統(tǒng)功能,其總數(shù)增高時,多表明有炎癥、感染存在。此時患病動物多有發(fā)熱癥狀,如果WBC值過高,并伴有嚴重的貧血,需進一步做骨髓穿刺檢查,排除白血病的可能。WBC值低于正常值,可由接受放射線、病毒感染藥物及化學物質(zhì)中毒等引起。PLT減少時,可能會有出血,如血小板減少性紫癜等;增高時,說明血液呈高凝狀態(tài),易發(fā)生血栓。其他檢查項目發(fā)生異常時,同樣提示機體出現(xiàn)了某一病變?,F(xiàn)在是24頁\一共有41頁\編輯于星期日血細胞直方圖一、WBC直方圖:是反映WBC體積大小的頻率分布圖。正常人WBC直方圖可見兩個明顯分離的峰,左峰為小細胞群(以淋巴細胞為主),右峰為大細胞群(以中性粒細胞為主),兩峰之間為中間細胞群(包括嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞)。小細胞群峰又高又陡,大細胞群較高較寬,中間細胞群一般為有一定寬度的平坦區(qū)。小細胞群峰越高,淋巴細胞比率越大;大細胞群峰越高,中性粒細胞比率越大;而嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞增多或出現(xiàn)病理性細胞時,中間細胞群峰值增高。例如白血病時外周血中出現(xiàn)大量幼稚細胞,多分布于中間細胞群及其附近,使峰尖增高,不同白血病類型出現(xiàn)特異性直方圖。二、RBC直方圖:是反映RBC體積大小或任何相當于RBC體積大小范圍內(nèi)粒子的分布圖。正常RBC直方圖為偏態(tài)分布曲線圖,峰值表示一定數(shù)量的RBC體積的平均值,與RBC平均體積基本一致,正常人峰值一般在82-94fl之間。直方圖峰值變低,基底部增寬,說明RBC體積大小不一,與紅細胞分布增大一致。直方圖左移,提示RBC體積較小,如缺鐵性貧血病人的RBC直方圖明顯左移,基底部顯著增寬。直方圖右移,提示RBC體積較大,見于巨幼紅細胞性貧血和新生兒。RBC直方圖有時出現(xiàn)雙峰,是貧血治療有效的證據(jù),多見于缺鐵性貧血、巨幼紅細胞性貧血病人治療后。三、PLT直方圖:是反映PLT體積大小分布頻率的分布圖,正常PLT直方圖呈左偏態(tài)分布,峰值一般在6-10fl之間,直方圖左移,提示PLT體積偏小,直方圖右移,提示PLT體積偏大。直方圖尾部抬高或在20-30fl處出現(xiàn)另一個波峰,提示血液中可能存在較多的小紅細胞、紅細胞碎片、巨大血小板、血小板凝集及纖維蛋白等。缺鐵性貧血病人的PLT直方圖尾部明顯抬高、PLT減少及其治療過程中的直方圖多呈波浪狀?,F(xiàn)在是25頁\一共有41頁\編輯于星期日DiagramThemeGallery

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