版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
本文格式為Word版,下載可任意編輯——維生素C不同的測(cè)定方法及各種方法優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比維生素C不同的測(cè)定方法及各種方法優(yōu)缺點(diǎn)比較
目前研究維生素C測(cè)定方法的有好多,如熒光法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、光度分析法、化學(xué)發(fā)光法、電化學(xué)分析法及色譜法等,各種方法對(duì)實(shí)際樣品的測(cè)定均有滿(mǎn)意的效果。
目前國(guó)內(nèi)維生素C含量測(cè)定仍以光度法為主流,但近年來(lái)色譜法,特別是HPLC法上升趨勢(shì)尤為明顯。
一、熒光法1.原理
樣品中還原型抗壞血酸經(jīng)活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸后,與鄰苯二胺(OPDA)反應(yīng)生成具有熒光的喹喔啉(quinoxaline),其熒光強(qiáng)度與脫氫抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比,以此測(cè)定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。
脫氫抗壞血酸與硼酸可形成復(fù)合物而不與OPDA反應(yīng),以此排除樣品中熒光雜質(zhì)所產(chǎn)生的干擾。本方法的最小檢出限為0.022g/ml。
2.適用范圍
本方法適用于蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測(cè)定
二、2,6-二氯靛酚滴定法(還原型VC,GB/T6195—1986)1、原理:
還原型抗壞血酸還原染料2,6-二氯靛酚,該染料在酸性中呈紅色,被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原2,6-二氯靛酚后,本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒(méi)有雜質(zhì)干擾時(shí),一定量的樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)2,6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。本法用于測(cè)定還原型抗壞血酸,總抗壞血酸的量常用2,4-二硝基苯肼法和熒光分光光度法測(cè)定。
2、優(yōu)點(diǎn)
簡(jiǎn)便、快速、比較確鑿等,適用于大量不同類(lèi)型樣品的分析。
3、缺點(diǎn)
2,6一二氯靛酚法雖然簡(jiǎn)便,但是藥品價(jià)格昂貴。而且不能直接測(cè)定樣品中的脫氫抗壞血酸及結(jié)合抗壞血酸的含量,易受其他還原物質(zhì)的干擾。假使樣品中含有色素類(lèi)物質(zhì),將給滴定終點(diǎn)的觀測(cè)造成困難。
三、分光光度法1、原理:
維生素C在空氣中特別在堿性介質(zhì)中極易被氧化成脫氫抗壞血酸,pH>5,脫氫抗壞血酸內(nèi)環(huán)開(kāi)裂,形成二酮古洛糖酸。脫氫抗壞血酸,二酮古洛糖酸均能和2,4-二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎,脎在500nm波長(zhǎng)有最大吸收。根據(jù)樣品溶
液吸光度,由工作曲線查出VC的濃度,即可求出VC的含量。
四、2,4-二硝基苯肼法1、原理
總抗壞血酸包括還原型、脫氫型和二酮古樂(lè)糖酸。樣品中還原型抗壞血酸經(jīng)活性炭氧化為脫氫抗壞血酸,再與2,4-二硝基苯肼作用生成紅色脎,脎的含量與總抗壞血酸含量成正比,進(jìn)行比色測(cè)定。
2、適用范圍
本方法適用于蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測(cè)定。
3、缺點(diǎn):
易受色素影響,當(dāng)待測(cè)液本身有顏色時(shí),吸光值會(huì)受到影響,從而影響到測(cè)定結(jié)果的確鑿性。且該法操作麻煩,試劑較多,耗時(shí)較長(zhǎng)。
五、磷鉬藍(lán)分光光度法測(cè)定維生素C1、測(cè)定原理
染料2,6-二氯靛酚的顏色反應(yīng)表現(xiàn)兩種特性,一是取決于其氧化還原狀態(tài),氧化態(tài)為深藍(lán)色,還原態(tài)變?yōu)闊o(wú)色;二是受其介質(zhì)的酸度影響,在堿性溶液中呈深藍(lán)色,在酸性介質(zhì)中呈淺紅色。
用藍(lán)色的堿性染料標(biāo)準(zhǔn)溶液,對(duì)含維生素C的酸性浸出液進(jìn)行氧化還原滴定,染料被還原為無(wú)色,當(dāng)?shù)竭_(dá)滴定終點(diǎn)時(shí),多余的染料在酸性介質(zhì)中則表現(xiàn)為淺紅色,由染料用量計(jì)算樣品中還原型抗壞血酸的含量。
2、優(yōu)點(diǎn)
該方法簡(jiǎn)單、快速、確鑿,且回收率特別高。
六、紫外快速測(cè)定法原理:
維生素C的2,6—二氯酚靛酚容量法,操作步驟較繁瑣,而且受其它還原性物質(zhì)、樣品色素顏色和測(cè)定時(shí)間的影響。紫外快速測(cè)定法,是根據(jù)維生素C具有對(duì)紫外產(chǎn)生吸收和對(duì)堿不穩(wěn)定的特性,于243nm處測(cè)定樣品液與堿處理樣品液兩者消光值之差,通過(guò)查標(biāo)準(zhǔn)曲線,即可計(jì)算樣品中維生素C的含量。
七、高效液相色譜法測(cè)定維生素C(HPLC法)
1、原理:
高效液相色譜法(HighperformanceLiquidChromatography,HPLC)是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻
力,需用高壓輸送滾動(dòng)相,故又稱(chēng)高壓液相色譜法(HighPressureLiquidChromatography,HPLC)。又因分析速度快而稱(chēng)為高速液相色譜法(HighSpeedLiquidChromatography,HSLP)。
色譜法的分開(kāi)原理是:溶于滾動(dòng)相(mobilephase)中的各組分經(jīng)過(guò)固定相時(shí),由于與固定相(stationaryphase)發(fā)生作用(吸附、分派、離子吸引、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中滯留時(shí)間不同,從而先后從固定相中流出。又稱(chēng)為色層法、層析法。
高效液相色譜法按分開(kāi)機(jī)制的不同分為液固吸附色譜法、液液分派色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對(duì)色譜法及分子排阻色譜法。
2、優(yōu)點(diǎn):
高效液相色譜法是目前發(fā)展較快的一種方法,具有靈敏度高、選擇性好、測(cè)定迅速、分析時(shí)間短、樣品處理簡(jiǎn)單和測(cè)定結(jié)果重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。是測(cè)定維生素C較好的方法。
八、碘量法
1、維生素C的原理
維生素C包括氧化型、還原型和二酮古樂(lè)糖酸三種。當(dāng)用碘滴定維生素C時(shí),所滴定的碘被維生素C還原為碘離子。隨著滴定過(guò)程中維生素C全被氧化,所滴入的碘將以碘分子形式出現(xiàn)。碘分子可以使含指示劑(淀粉)的溶液產(chǎn)生藍(lán)色,即為滴定終點(diǎn)。
九、電位滴定法
1.原理:根據(jù)滴定過(guò)程中電池電動(dòng)勢(shì)的變化來(lái)確定反應(yīng)終點(diǎn).
Pt為指示電極,甘汞作參比電極
E池=E+-E-+E液接電位=EI2/I-+k(常數(shù))
隨著滴定劑的參與,由于發(fā)生化學(xué)反應(yīng),待測(cè)離子濃度將不斷變化;從而指示電極電位發(fā)生相應(yīng)變化;導(dǎo)致電池電動(dòng)勢(shì)發(fā)生相應(yīng)變化;計(jì)量點(diǎn)附近離子濃度發(fā)生突變;引起電位的突變,因此由測(cè)量工作電池電動(dòng)勢(shì)的變化就能確定終點(diǎn)。計(jì)算式:(與碘量法一致)Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%
2、優(yōu)點(diǎn):
解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時(shí)無(wú)法指示終點(diǎn)的問(wèn)題
用線性電位滴定法分析抗壞血酸,抗壞血酸回收率為99.80%~101.5%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.61%;分析維生素C片中的抗壞血酸,相當(dāng)標(biāo)示量為98.90%~100.5%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于0.48%,說(shuō)明線性電位滴定法分析維生素C片中的抗壞血酸含量是可行的.
十、二甲苯-二氯靛酚比色法1、適用范圍
測(cè)定深色樣品中還原型抗壞血酸。
2、測(cè)定原理
用定量的2,6-二氯靛酚染料與試樣中的維生素C進(jìn)行氧化還原反應(yīng),多余的染料在酸性環(huán)境中呈紅色,用二甲苯萃取后比色,在一定范圍內(nèi),吸光度與染料濃度呈線性相關(guān),收剩余染料濃度用差減法計(jì)算維生素C含量。
十一、熒光分析法原理:
用酸洗活性炭將抗壞鐵酸氧化為順式脫氫抗壞鐵酸,然后與鄰苯二胺縮合成一種熒光性化合物。樣品中其它熒光雜質(zhì)的干擾可以通過(guò)向氧化后的樣品中參與硼酸,使脫氫抗壞鐵酸形成硼酸脫氫抗壞鐵酸的絡(luò)合物,它不與鄰二苯胺生成熒光化合物。這樣可以測(cè)定其它熒光雜質(zhì)的空白熒光強(qiáng)度而加以校正。
十二、庫(kù)侖滴定法1、原理
庫(kù)侖滴定法屬于恒電流庫(kù)侖分析。是在特定的電解液中,以電極反應(yīng)產(chǎn)物為滴定劑(電生滴定劑,相當(dāng)于化學(xué)滴定中的標(biāo)準(zhǔn)濃液)與待測(cè)物質(zhì)定量作用,借助指示劑或電位法確定滴定終點(diǎn)。
基本依據(jù)--法拉第電解定律:電解時(shí),電極上發(fā)身化學(xué)反應(yīng)的物質(zhì)質(zhì)量與通過(guò)電解池的電量Q成正比
即:
m=MQ/zF=MIt/zF
計(jì)算式:Wvc=MvcQ/zFm
樣式中:F法拉第常數(shù)(96487C)
Z電極反應(yīng)中轉(zhuǎn)移的電子數(shù)注意:使電解效率100%
2、優(yōu)點(diǎn):
1)無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)化的試劑溶液,免去了大量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的準(zhǔn)備工作(配制,標(biāo)定);2)只需要一個(gè)高質(zhì)量的供電器,計(jì)時(shí)器,小鉑絲電極,且易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化控制;3)若電流維持一個(gè)定值,可大大縮短了電解時(shí)間;
4)電量簡(jiǎn)單控制及確鑿測(cè)量;方法靈敏度,確鑿度較高;
5)滴定劑來(lái)自電解時(shí)的電極產(chǎn)物,可實(shí)現(xiàn)容量分析中不易實(shí)現(xiàn)的滴定過(guò)程,如Cu+,Br2,Cl2產(chǎn)生后馬上與待測(cè)物反應(yīng)。
3、缺點(diǎn)
要求電解過(guò)程沒(méi)有副反應(yīng)和漏電現(xiàn)象,即使電解電極上只進(jìn)行生成滴定劑的反應(yīng),且電流的效率是100%
十三、L-抗壞血酸(維生素C)測(cè)定試劑盒(酶學(xué)方法)1.適用范圍:
應(yīng)用于食品、飲料及生物制品檢測(cè)
2.比色方法
此方法用于檢測(cè)水果和蔬菜(如馬鈴薯),水果和蔬菜產(chǎn)品(如西紅柿醬、泡菜、果醬、果汁),嬰兒食品,啤酒,飲料,流食,粉狀和烘烤劑,肉產(chǎn)品,奶制品,葡萄酒,還有動(dòng)物飼料,醫(yī)藥品(如維生素配制、陣痛藥、退燒藥)和生物樣品中的L-抗壞血酸(維生素C),
3、原理
L-抗壞血酸(x-H2)+MTT+PMS—>dehydroascorbate(x)+MTT-formazan+H+X
L-抗壞血酸+?O2AAO——>dehydroascorbate+H2OX
十四、光電比濁法原理:
在酸性介質(zhì)中,抗壞鐵酸與亞硒酸(H2SeO3)能定量地進(jìn)行氧化還原反應(yīng)。1mol的抗鐵酸能將2mol的亞硒酸還原成硒。在一定條件下,生成的元素硒在溶液中形成穩(wěn)定的懸濁液。當(dāng)抗鐵酸的濃度在0-4mg/25-50ml的范圍內(nèi),該溶液生成的濁度與抗壞鐵酸的含量成正比。將試液置分光光度計(jì)上測(cè)其濁度可以定量地測(cè)定抗壞鐵酸。
十五、近紅外漫反射光譜分析法(NIRDRSA)1、原理:
自1965年首次應(yīng)用于繁雜農(nóng)業(yè)樣品分析后,因其具有樣品處理簡(jiǎn)單、分析速度快等優(yōu)點(diǎn),逐漸受到分析界的重視。此法已廣泛應(yīng)用于石油、紡織、農(nóng)業(yè)、食品、藥物分析等領(lǐng)域。在藥物分析中,NIRDRSA可以進(jìn)行定性鑒別、定量分析等工作。
近紅外譜區(qū)光的頻率與有機(jī)分子中C-H,O-H,N-H等振動(dòng)的合頻與各級(jí)倍頻的頻率一致,因此通過(guò)有機(jī)物的近紅外光譜可以取得分子中C-H,O-H,N-H的特征振動(dòng)信息。由于近紅外光譜的譜帶較寬,譜圖重疊嚴(yán)重,不能用特征峰等簡(jiǎn)單方法分析,需要運(yùn)用計(jì)算機(jī)技術(shù)與化學(xué)計(jì)量學(xué)方法。本試驗(yàn)應(yīng)用的是偏最小二乘法(PLS),首先利用定標(biāo)集建立預(yù)計(jì)模型,然后將預(yù)計(jì)集作為未知樣本,根據(jù)預(yù)計(jì)模型進(jìn)行預(yù)計(jì)。
對(duì)所選擇的譜區(qū)范圍,采用對(duì)反射吸光度的MSC(散射校正)預(yù)處理,對(duì)25個(gè)
樣品進(jìn)行交織驗(yàn)證,即選擇一個(gè)樣品,從校正集中除去該樣品對(duì)應(yīng)的光譜和濃度數(shù)據(jù),并設(shè)光譜主成分?jǐn)?shù)為1,循環(huán)迭代樣品數(shù)和主成分?jǐn)?shù),計(jì)算預(yù)計(jì)殘差平方和,確定所需主成分?jǐn)?shù)。若主成分選擇過(guò)小,會(huì)丟失樣品信息,過(guò)大會(huì)造成過(guò)度擬合。當(dāng)主因子為2時(shí),預(yù)計(jì)殘差平方和值最小,為2.029,應(yīng)選擇主因子數(shù)為2,建立最正確PLS校正數(shù)學(xué)模型。
2、優(yōu)點(diǎn):
維生素C是一種不穩(wěn)定的二烯醇化合物,其藥典含量測(cè)定方法為碘量法。我們采用近紅外漫反射光譜技術(shù)直接測(cè)定維生素C含量,樣品無(wú)需預(yù)處理,方法簡(jiǎn)便,結(jié)果可靠。
十六、原子吸收間接測(cè)定法1、原理:
這是最近報(bào)導(dǎo)的一種Vc測(cè)定法,其原理是在酸性介質(zhì)中還原型Vc可將Cu2+定量地還原為Cu+并與SCN—反應(yīng)生成CuSCN沉淀,在高速離心機(jī)下有效地分開(kāi)出沉淀,防備洗滌后再經(jīng)濃硝酸溶解,用原子吸收法測(cè)定銅含量,即可推知樣品中維生素C的含量。2、優(yōu)點(diǎn):
能不受果蔬自身顏色的干擾,有一定的發(fā)展前景。根據(jù)試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)此法結(jié)果偏低,還有待于進(jìn)一步優(yōu)化改善。3、缺點(diǎn):
該法試驗(yàn)儀器較昂貴,主要問(wèn)題是操作過(guò)程中反應(yīng)完全與否,沉淀物洗滌、離心反復(fù)屢屢,極簡(jiǎn)單帶來(lái)誤差
十七、金納米微粒分光光度法測(cè)定維生素C的方法1、原理:
本發(fā)明公開(kāi)了一種用金納米微粒分光光度法測(cè)定維生素C的方法。于5mL比色管中,依次參與0.1-2.0mL濃度為95.64μg/mL的HAuCl↓[4]溶液,0.02-0.50mL濃度為1%的檸檬酸三鈉溶液,再參與0.001-2.0mL濃度為0.38mg/mL的維生素C溶液,混勻,加二次蒸餾水定容至刻度,再充分混勻,在分光光度計(jì)上,于520nm處測(cè)定吸收值,同時(shí)作空白試驗(yàn)。
2、優(yōu)點(diǎn)
本發(fā)明測(cè)定方法簡(jiǎn)單、快捷,所用儀器價(jià)廉,試劑易得。
十八、L-半胱氨酸修飾電極測(cè)定維生素C的方法
本法研究了L-半胱氨酸修飾電極的制備方法和其電化學(xué)行為,并用于維生素C的測(cè)定,發(fā)現(xiàn)該電極對(duì)VC有明顯的電催化作用,在pH=10.0的NH4Cl-NH3·H2O緩沖溶液中,VC在L-半胱氨酸修飾電極上產(chǎn)生一靈敏的氧化峰,峰電流與VC
的濃度在1.0×10-3~1.0×10-6mol/L的范圍內(nèi)呈良好的線形關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為0.9962,其最低檢測(cè)限可達(dá)1.0×10-6mol/L,與紫外光譜法測(cè)定
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫(kù)網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 四川省樂(lè)山市峨眉山市2024年九年級(jí)數(shù)學(xué)調(diào)研考試試卷含答案
- 九江職業(yè)技術(shù)學(xué)院《府際關(guān)系》2023-2024學(xué)年第一學(xué)期期末試卷
- 江蘇航運(yùn)職業(yè)技術(shù)學(xué)院《傳統(tǒng)木刻套色版畫(huà)》2023-2024學(xué)年第一學(xué)期期末試卷
- 湖南科技職業(yè)學(xué)院《廣告美學(xué)》2023-2024學(xué)年第一學(xué)期期末試卷
- 【物理】第十二章簡(jiǎn)單機(jī)械 單元復(fù)習(xí)題 2024-2025學(xué)年人教版物理八年級(jí)下學(xué)期
- 【物理】《阿基米德原理》(教學(xué)設(shè)計(jì))-2024-2025學(xué)年人教版(2024)初中物理八年級(jí)下冊(cè)
- 高考物理模擬測(cè)試題(帶答案)
- 浙江中醫(yī)藥大學(xué)《光電信息科學(xué)與工程專(zhuān)業(yè)導(dǎo)論》2023-2024學(xué)年第一學(xué)期期末試卷
- 浙江橫店影視職業(yè)學(xué)院《數(shù)字邏輯》2023-2024學(xué)年第一學(xué)期期末試卷
- 中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)《藥理與毒理學(xué)》2023-2024學(xué)年第一學(xué)期期末試卷
- 冬春季呼吸道傳染病防控
- 【物 理】2024-2025學(xué)年八年級(jí)上冊(cè)物理寒假作業(yè)人教版
- 2024年計(jì)算機(jī)二級(jí)WPS考試題庫(kù)380題(含答案)
- 2023高考英語(yǔ)新高考1卷完形填空全考點(diǎn)解析附譯文全
- 工作票知識(shí)培訓(xùn)課件
- GB/T 42616-2023電梯物聯(lián)網(wǎng)監(jiān)測(cè)終端技術(shù)規(guī)范
- 河南省醫(yī)院信息大全
- 酒店賠償價(jià)目表
- 廣西貴港市2023年中考物理試題(原卷版)
- 外觀質(zhì)量評(píng)定報(bào)告
- 集團(tuán)總裁崗位說(shuō)明書(shū)
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論