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顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第1頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五主要內(nèi)容顯微鏡的歷史光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)顯微鏡的分類及正確了解和使用顯微鏡顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第2頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史
顯微鏡是用來(lái)對(duì)微小物體進(jìn)行視覺(jué)或攝影放大的儀器。顯微鏡必須具備三種功能:產(chǎn)生標(biāo)本的放大圖像可分辨圖像的細(xì)微結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)可被人眼及攝影裝置分辨的細(xì)微結(jié)構(gòu)
圖1所示為英國(guó)顯微學(xué)家RobertHooke在1660年發(fā)明的一種復(fù)合型顯微鏡。這種類似工藝品顯微鏡在標(biāo)本的附近裝有物鏡,它的調(diào)焦方式采用轉(zhuǎn)動(dòng)顯微鏡的鏡筒來(lái)改變物鏡與標(biāo)本之間的距離來(lái)實(shí)現(xiàn).圖1中顯微鏡的采用油燈和裝滿水的球形瓶來(lái)照明。燈發(fā)出的光線為散射光,通過(guò)球形瓶后匯聚在標(biāo)本上。這類早期的顯微鏡存在色差(或球差),在白光照明的情況下其圖像存在藍(lán)色和紅色的光暈。第3頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史因?yàn)楹芏嗟氖褂谜呔怯醚壑苯訉?duì)顯微鏡進(jìn)行觀察,所以了解顯微鏡與眼晴之間的相互關(guān)系顯得很重要。人眼具有區(qū)別可見(jiàn)光譜范圍可從紫光到紅光,但人眼無(wú)法區(qū)別紫外光和紅外光。人眼也可感覺(jué)從黑色到白色之間的所有的亮度灰階。這樣,對(duì)于人眼可看到的圖像來(lái)說(shuō),它應(yīng)具有可見(jiàn)光譜范圍內(nèi)的顏色變化及光亮度變化。人眼視網(wǎng)膜上接受光顏色的傳感器為錐細(xì)胞,能區(qū)別光亮度而不能區(qū)別光顏色的為桿細(xì)胞。這些細(xì)胞位于人眼內(nèi)后面的視網(wǎng)膜上。眼的前面(見(jiàn)圖1)包括虹膜、彎曲的角膜分別用于接受光線和將其聚焦到視網(wǎng)膜上。
要使圖像看起來(lái)清晰,在視網(wǎng)膜上的圖像應(yīng)有一個(gè)恰當(dāng)?shù)囊暯恰T谙噜徱暰W(wǎng)膜細(xì)胞之間的光強(qiáng)度變化,使眼可區(qū)分其上面成像的細(xì)節(jié)。此外相鄰細(xì)節(jié)之間應(yīng)有足夠的對(duì)比度使圖像可分辨。因?yàn)槿搜壑型哥R改變形狀的能力有限,位于很近的目標(biāo)無(wú)法在視網(wǎng)膜上成像。在一般的情況下,人眼成像的距離為10英寸或25CM。第4頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史大約在500年之前,簡(jiǎn)單的玻璃放大鏡就已經(jīng)發(fā)明出來(lái)了。這種放大鏡為凸透鏡(中間比邊緣厚)。將放大鏡放于標(biāo)本與眼晴之間即可進(jìn)行調(diào)焦。這種“簡(jiǎn)單顯微鏡”可通知過(guò)增加視角將圖像放大并成于視網(wǎng)膜上。在1600年,通過(guò)AntonvonLeeuwenhoek的努力使該類“簡(jiǎn)單顯微鏡”或稱之為放大玻璃的性能達(dá)到了最完善的狀態(tài)。這種簡(jiǎn)單顯微鏡可用來(lái)觀單細(xì)胞的動(dòng)物(他稱這為微生物)及一些較大的細(xì)菌。這類產(chǎn)品見(jiàn)圖3。由一個(gè)十分靠近人眼的放大鏡將標(biāo)本成像成于標(biāo)本同一邊,該圖像看起來(lái)距人眼大約為10英寸遠(yuǎn)。該像為虛像,不能被膠片捕獲。第5頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史復(fù)式顯微鏡發(fā)展于17世紀(jì)和18世紀(jì),它的發(fā)展受到光學(xué)像差的困擾(色差和球差)。這種缺陷是由于采用多個(gè)透鏡而帶來(lái)的。此期間,這類顯微鏡成像質(zhì)量實(shí)際上要比單透鏡顯微鏡產(chǎn)品差,其成象往往很模糊,并存在由色差帶來(lái)的彩色暈圈。這樣不但使成象的質(zhì)量變壞而且降低了成像的分辨率。在17世紀(jì)中期,制造者發(fā)現(xiàn)了采用色散不同的兩種玻璃制作透鏡可降低或消除色差。這種發(fā)現(xiàn)最先在比顯微鏡鏡片大的望遠(yuǎn)鏡鏡片中。直到18世紀(jì)后這種校正色差的透鏡才在顯微鏡上廣泛應(yīng)用。大約在1600年左右,由于荷蘭Janssen兄弟及意大利伽利略的努力,復(fù)式顯微鏡被發(fā)明出來(lái)。這種顯微鏡最簡(jiǎn)單的形式由兩片凸透鏡組成,一片為物鏡靠近標(biāo)本,目鏡則靠近使用者的眼睛。復(fù)式顯微鏡分兩步放大。物鏡將一放大的圖象成于鏡體筒中,目鏡將物鏡投入的圖象再放大第6頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史18世紀(jì)和19世紀(jì),伴隨著復(fù)式顯微鏡機(jī)械和光學(xué)質(zhì)量的大大改進(jìn),先進(jìn)的機(jī)械工具使復(fù)雜的零件得以加工和制造。在18世紀(jì)中期,黃銅合金被用來(lái)制作高質(zhì)量的顯微鏡。此期間英國(guó)及德國(guó)的顯微鏡制造廠大量生產(chǎn)顯微鏡。他們的產(chǎn)品從設(shè)計(jì)及制作上均有很大的變化,但由于總的原理限制了產(chǎn)品的特性,使它保持在一個(gè)相對(duì)固定的狀態(tài)。圖5所示的顯微鏡是由HughPowellandPeterLealand在1850間制造的。三角型的底座給顯微鏡提供了穩(wěn)定的支撐。在這期間,多數(shù)人均認(rèn)同這種結(jié)構(gòu)。第7頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史在19世紀(jì)末期,由于在顯微鏡的制造上產(chǎn)生了較為激烈的競(jìng)爭(zhēng)及發(fā)展,制造成本成為一個(gè)重要的因素。黃銅作為一種顯微鏡的制造材料已顯得十分昂貴。用黃銅制作的顯微鏡主體及其它零件需要冗長(zhǎng)的加工及拋光工期。為了降低成本顯微鏡制商開(kāi)始在顯微鏡的主體、載物臺(tái)及其它外露的非運(yùn)動(dòng)部件上采用噴漆的工藝方式。在20世紀(jì)初許多顯微鏡制造商開(kāi)始采用鑄鐵來(lái)代替黃銅制作顯微鏡的主體及載物臺(tái)。他們也開(kāi)始在一些重要的黃銅零件上采用電鍍的方法來(lái)進(jìn)行表面處理,例如手輪、物鏡筒、目鏡及機(jī)械載物臺(tái)的部件(見(jiàn)圖6)。這類的顯微鏡基本上仍然采用一種共同的設(shè)計(jì)方式,均采用單筒目鏡,收集外部光源的載物臺(tái)下反射鏡。第8頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史右圖所示為OlympusProvisAX70研究顯微鏡。這種顯微鏡代表了目前最先進(jìn)的設(shè)計(jì)及工藝。它集合了多種照明(落射及透射),多種觀察方式(偏光,DIC,熒光及相襯)的能力。它的攝影裝置相當(dāng)完善,可執(zhí)行點(diǎn)測(cè)光,自動(dòng)曝光控制,柔性的連續(xù)變倍,使取景更容易。Y形的機(jī)架設(shè)計(jì)具備了很好的可操作性,穩(wěn)定性。光、機(jī)、電控制的完美結(jié)合,使得操作起來(lái)十分容易,是現(xiàn)代先進(jìn)顯微鏡的代表.
19世紀(jì)以來(lái),顯微鏡發(fā)展迅速,性能不斷提高,種類不斷增加?,F(xiàn)代的顯微鏡在設(shè)計(jì)及性能上遠(yuǎn)遠(yuǎn)的超過(guò)了20世紀(jì)中期的顯微鏡,這首先是光學(xué)玻璃的性能在很大程度上已有了明顯的改進(jìn),使其可更好的校正光學(xué)象差,人工合成的鍍鏌技術(shù)也已十分先進(jìn)。同時(shí)制造商們也開(kāi)始在顯微鏡控制上采用集成電路技術(shù),使得操作和攝影也較早期容易得多了,使其自動(dòng)化程度更高,進(jìn)而不僅更能適應(yīng)復(fù)雜的工作任務(wù),同時(shí)也極大地降低了使用者的工作強(qiáng)度.第9頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史前面的章節(jié)涉及了顯微鏡的基本概念以及從17世紀(jì)到現(xiàn)代的簡(jiǎn)要發(fā)展史。事實(shí)上,對(duì)于顯微鏡來(lái)講,作為一種常見(jiàn)的科學(xué)儀器,顯微鏡廣泛應(yīng)用于多類科研、常規(guī)檢查及教育的各個(gè)領(lǐng)域,如對(duì)科學(xué)家來(lái)說(shuō),顯微鏡及顯微攝影術(shù)很早就是一個(gè)有用的科研工具了。同時(shí),在顯微鏡的發(fā)展過(guò)程中,也極大地推動(dòng)了細(xì)胞學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)、病理學(xué)、材料學(xué)以及最新的半導(dǎo)體產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。在生命之謎的研究上顯微鏡也起了很大的作用。第10頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史在現(xiàn)代,顯微鏡作為一種工具在各類學(xué)科的研究方面已得到了極大的發(fā)展。例如半導(dǎo)體工業(yè)就需要用顯微鏡來(lái)觀察新的高技術(shù)材料及集成電路的表面特征,顯微術(shù)也是法學(xué)上的的一個(gè)重要工具,經(jīng)常用來(lái)檢查毛發(fā)、纖維、織物、血漬子彈及其它有關(guān)的犯罪項(xiàng)目?,F(xiàn)代先進(jìn)的熒光染色技術(shù)及單克隆抗體技術(shù),熒光顯微術(shù)在生物醫(yī)學(xué)及細(xì)胞生物學(xué)上的應(yīng)用預(yù)期將發(fā)生爆炸性的增長(zhǎng)。生物醫(yī)學(xué)與材料學(xué)上,顯微鏡技術(shù)的不同點(diǎn)主要是光線投射到標(biāo)本上的方式不一樣。典型的生物醫(yī)學(xué)顯微術(shù)是將很薄的標(biāo)本經(jīng)制備后用光透過(guò)該標(biāo)本,用物鏡進(jìn)行調(diào)焦后投射到目鏡;而觀察材料或集成電路的表面時(shí),光線從物鏡出來(lái)再由標(biāo)本的表面反射到顯微鏡的物鏡。按照現(xiàn)代科學(xué)的命名方法,透射光顯微術(shù)和反射光顯微術(shù)應(yīng)該稱為diascopic和episcopic照明顯微術(shù)。下面展示的照片有透射光和反射光科學(xué)研究的圖片。第11頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史微觀世界的奧秘(生命科學(xué)類)第12頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史多姿多彩的顯微圖片(材料科學(xué)類)第13頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡簡(jiǎn)史主要廠家國(guó)際
OLYMPUS(日本)
ZEISS(德國(guó))
NIKON(日本)
LEICA(德國(guó))國(guó)內(nèi)江南(南京)麥克奧迪MOTIC(廈門)舜宇(浙江)永新(浙江)新天(貴州)重光(重慶)第14頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)原理顯微鏡的成像及影響成像的關(guān)鍵因素-像差顯微鏡的技術(shù)參數(shù)及工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡的結(jié)構(gòu)顯微鏡的光學(xué)部件常用的觀察方法基礎(chǔ)知識(shí)第15頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五透鏡成像原理凸透鏡成像的規(guī)律5種典型情況
1.當(dāng)u>2f時(shí),凸透鏡成倒立、縮小的實(shí)像
2.當(dāng)u=2f時(shí),凸透鏡成倒立等大的實(shí)象
3.當(dāng)f<u<2f時(shí),凸透鏡成倒立、放大的實(shí)像
4.當(dāng)u=f時(shí),凸透鏡不成像
5.當(dāng)u<f時(shí),凸透鏡成正立放大的虛像光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第16頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五注意點(diǎn)物距(u)像的情況倒立或正立放大或縮小像距v(CM)像的位置(同側(cè)或異側(cè))介于焦距和2倍焦距之間(f<u<2f)小于焦距(u<f)倒立放大V>2f異側(cè)(實(shí))同側(cè)(虛)正立放大透鏡成像原理光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第17頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡目鏡A”B”顯微鏡為復(fù)式放大結(jié)構(gòu)1、當(dāng)f<u<2f時(shí),在凸透鏡像方一側(cè)成倒立、放大的實(shí)像(物鏡放大)2、當(dāng)u<f時(shí),通過(guò)在凸透鏡像方一側(cè)可觀察到在物方一側(cè)有正立放大的虛像(目鏡放大)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)顯微鏡的成像原理第18頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五
顯微鏡的構(gòu)造光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第19頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的成像(幾何成像原理)物鏡目鏡A″B″●
物鏡對(duì)物放大●
目鏡對(duì)象放大光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第20頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的成像影響透鏡成像的關(guān)鍵因素-像差基礎(chǔ)知識(shí)像差分類:球差象散慧差畸變場(chǎng)曲色差光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第21頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五球差象散慧差場(chǎng)曲負(fù)畸變正畸變基礎(chǔ)知識(shí)像差分類
像差光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第22頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五球差離透鏡主軸遠(yuǎn)的光線因折射率大而交點(diǎn)離透鏡近;離透鏡主軸近的光線因折射率小而交點(diǎn)離透鏡遠(yuǎn)如果鏡頭有球差,就不可能結(jié)成清晰的影像光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)像差分類第23頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五彗差由于與主軸不平行的光線通過(guò)透鏡折射會(huì)聚所形成的由于透鏡邊緣一帶的光線與透鏡主軸一帶的光線所會(huì)聚的焦點(diǎn)位置和影像大小有差別影像的一端寬大虛散而較暗,另一端則窄小清晰而較亮,如同拖帶尾巴的慧星一樣光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)像差分類第24頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五像散由側(cè)面射來(lái)的光線,通過(guò)透鏡折射后,在底片邊緣部分不能同時(shí)呈現(xiàn)出橫豎線條都清晰的影像如果橫線清晰,則豎線必模糊;反之使豎線清晰則橫線必模糊,所以又稱縱橫像差光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)像差分類第25頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五場(chǎng)曲垂直于主軸的平面物體經(jīng)鏡頭成像時(shí),不能使中心部分和邊緣部分的影像都清晰,只能在一個(gè)球面上達(dá)到影像清晰的效果光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)像差分類第26頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五畸變透鏡對(duì)同一物體的不同部分有不同的放大率,因而使影像產(chǎn)生變形扭曲的現(xiàn)象,越是邊緣的部位就越明顯枕形畸變桶形畸變光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)像差分類第27頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五色差不同顏色的光線波長(zhǎng)不同,不同波長(zhǎng)的色光在通過(guò)透鏡時(shí)有不同的折射率,所以不能在一個(gè)平面上形成焦點(diǎn)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)像差分類第28頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五色差光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)像差分類第29頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五
顯微鏡的基本參數(shù)數(shù)值孔徑(NumericalAperture,N.A.):
N.A.=nsin分辨率(Resolvingpower):=0.61/N.A工作距離(WorkingDistance,W.D.)焦點(diǎn)深度(DepthofFocus)總放大率(Magnification):
視場(chǎng)數(shù)(FiledNember)及視場(chǎng)直徑(Filedofview)像場(chǎng)亮度(ImageBrightness)覆蓋差(Coverslip)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第30頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡數(shù)值孔徑(N.A)
TOP值:干系物鏡(0.95),水浸物鏡(1.2),油浸物鏡(1.4),特制物鏡(1.6)介質(zhì)折射率越大,NA值越高開(kāi)口角α越大,NA值越高n=物鏡與被檢物體之間介質(zhì)的折射率光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第31頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡數(shù)值孔徑(N.A)
數(shù)值孔徑與顯微鏡其他參數(shù)的關(guān)系物鏡的數(shù)值孔徑是顯微鏡中最重要的參數(shù).決定和影響著其他參數(shù).數(shù)值孔徑與分辨率成正比數(shù)值孔徑與放大倍率成正比數(shù)值孔徑與焦深成反比數(shù)值孔徑的平方與圖象亮度成正比數(shù)值孔徑和視場(chǎng)直徑成反向關(guān)系數(shù)值孔徑與工作距離成反向的關(guān)系.光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第32頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五分辨率
Resolvingpower基礎(chǔ)知識(shí)Resolution(r)=
0.61λ/NA
(λ=光源波長(zhǎng),一般選550nm)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第33頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五提高分辨率的有效辦法
基礎(chǔ)知識(shí)1.降低光源波長(zhǎng)2.增大介質(zhì)系數(shù)或提高物鏡NA值3.增大物鏡的口徑4.增加明暗反差Resolution(r)=
0.61λ/NA(λ=光源波長(zhǎng),一般選550nm)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第34頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五放大倍率(Magnification)通過(guò)目鏡總放大倍率=物鏡倍率X目鏡倍率(如有中間變倍,再乘中間倍率)照相時(shí)總放大倍率=物鏡倍率X照相目鏡倍率接視頻時(shí)總放大倍率=物鏡倍率X接口倍率X視頻放大倍數(shù)視頻放大倍數(shù)=顯示屏幕對(duì)角線尺寸/CCD靶面尺寸光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第35頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五有效(實(shí))放大和無(wú)效(虛)放大有效放大的倍率與NA值的關(guān)系在使用顯微鏡放大時(shí)盡量用高NA值的物鏡來(lái)放大
光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)放大倍率(Magnification)第36頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五工作距離(W.D)Workingdistance
標(biāo)準(zhǔn)情況下,工作距離與NA值和分辨率成反向關(guān)系基礎(chǔ)知識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第37頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡倍率W.D(mm)分辨率um蓋玻片主要應(yīng)用SLMPL20X21.00.580夾具內(nèi)部件等凹品SLMPL50X15.00.750夾具內(nèi)部件等凹品LCPLAPO20X8.80.840/0.7/1.1玻璃基片LCPLAPO50X3.10.560/0.7/1.1玻璃基片LCPLFL-LCD100X0.95/1.1/1.1431.2/.07/0.60.6-1.2LCDLMPLFL50X10.60.670封裝ICLMPLFL100X3.40.420封裝ICLMPLFL20X12.00.670封裝ICLMPLAPO150X1.00.370ICLMPLAPO250X0.800.370IC光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)工作距離(W.D)Workingdistance
第38頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五視場(chǎng)數(shù)(FN)和視場(chǎng)直徑(FV)Φ—視場(chǎng)直徑F.N.—視場(chǎng)數(shù)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第39頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五視場(chǎng)數(shù)與視場(chǎng)直徑視場(chǎng)直徑=視場(chǎng)數(shù)/物鏡放大倍數(shù)(mm)視場(chǎng)直徑指在顯微鏡目鏡下所看到的圓形視場(chǎng)的直徑,單位用毫米表示光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第40頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五目鏡的視場(chǎng)基礎(chǔ)知識(shí)F.N.22光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第41頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五視場(chǎng)直徑參數(shù)表視場(chǎng)直徑與視場(chǎng)數(shù)成正比,與物鏡倍率成反比目鏡型號(hào)WHN10XWH15XSWH10X視場(chǎng)數(shù)(FN)221426.55X物鏡下視場(chǎng)直徑4.4mm2.8mm5.3mm10X物鏡下視場(chǎng)直徑2.2mm1.4mm2.65mm20X物鏡下視場(chǎng)直徑1.1mm0.7mm1.325mm50X物鏡下視場(chǎng)直徑0.44mm0.28mm0.53mm100X物鏡下視場(chǎng)直徑0.22mm0.14mm0.265mm光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第42頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五焦深Depthoffocus焦深與總放大倍數(shù)以及物鏡的數(shù)值孔徑成反比焦深對(duì)條件的要求恰好與分辨率相反,分辨率高則焦深變小(相同口徑的物鏡)被檢物體周圍介質(zhì)的折射率加大,可增大焦深.光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第43頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五焦深Depthoffocus光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第44頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五覆蓋差Differenceofcoverglass由于蓋玻片的厚度不標(biāo)準(zhǔn),光線從蓋玻片進(jìn)入空氣產(chǎn)生折射后的光路發(fā)生了改變,從而產(chǎn)生了相差,這就是覆蓋差。顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)在設(shè)計(jì)時(shí)必須要將蓋玻片的厚度計(jì)算在內(nèi),不然會(huì)嚴(yán)重影響顯微鏡的成像質(zhì)量.標(biāo)準(zhǔn)的蓋玻片厚度:0.17mm,允許范圍:0.16-0.18mm,常用于切片檢查。物鏡上有“-”符號(hào)為不受覆蓋差影響,如低倍物鏡光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)有“0”為不能加蓋玻片,稱為無(wú)罩物鏡(Nocover)常用于金相物鏡和血液涂片檢查。有0-2.1標(biāo)記的表示可以通過(guò)調(diào)節(jié)適應(yīng)0-2.1厚度的覆蓋玻片,常用于倒置相差顯微鏡有0.7/1.2等不同標(biāo)記的CAP,適用于不同玻璃厚度的液晶檢查第45頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五鏡象亮度和視場(chǎng)亮度視場(chǎng)亮度和鏡象亮度是兩個(gè)不同的概念鏡象亮度是指顯微鏡下圖象的明暗程度在一定的放大倍數(shù)下,鏡象亮度與物鏡數(shù)值孔徑值的平方成正比鏡象亮度與放大倍數(shù)成反比視場(chǎng)亮度則是指顯微鏡下整個(gè)視場(chǎng)的亮度。不僅與物鏡目鏡有關(guān),還直接受聚光鏡、光闌和光源的影響。在條件不變的情況下,視場(chǎng)亮度越大,鏡象亮度也越大。光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第46頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)知識(shí)機(jī)械筒長(zhǎng)(Mechanialtubelength)光學(xué)筒長(zhǎng)(Opticaltubelength)同焦距離(ParfocalDistance)中間像位置(Intermediateimageposition)明視距離(Leastdistanceofdistinctvision)合軸(Opticalalignment)和齊焦(parfocal)有限遠(yuǎn)和無(wú)限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)(Finiteandinfinityopticalsystems)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第47頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)基礎(chǔ)知識(shí)機(jī)械筒長(zhǎng)(Mechanialtubelength)同焦距離(ParfocalDistance)標(biāo)準(zhǔn)焦面/中間像位置(Intermediateimageposition)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第48頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)光學(xué)筒長(zhǎng)(Opticaltubelength)明視距離(Leastdistanceofdistinctvision)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第49頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五合軸(Opticalalignment)和齊焦(parfocal)
基礎(chǔ)知識(shí)齊焦是指在鏡檢時(shí),當(dāng)用某一倍率的物鏡觀察圖象清晰后,在轉(zhuǎn)換另一倍率的物鏡時(shí),其成象亦應(yīng)基本清晰,即齊焦性.而合軸則是指在鏡檢中轉(zhuǎn)換物鏡時(shí),象的中心偏離也應(yīng)該在一定的范圍內(nèi),既合軸度。齊焦性能的優(yōu)劣和合軸程度的高低是衡量顯微鏡質(zhì)量的一個(gè)重要標(biāo)志,它是與物鏡的本身質(zhì)量和物鏡轉(zhuǎn)換器的精度有關(guān)。
顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第50頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)(有限遠(yuǎn)和無(wú)限遠(yuǎn))光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)顯微鏡制造的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)第51頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五萬(wàn)能無(wú)限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)(UIS)
2.可任意疊加中間附件而不受倍率及像差的影響(平行光)3.更高的通光率,分辨率及反差.光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)
1.物鏡完全克服像差,任意光路出口都是完整消色差后的光學(xué)影象第52頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的光學(xué)部件基礎(chǔ)知識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)物鏡:
顯微鏡最重要的光學(xué)部件,第一次放大,決定了顯微鏡的分辨率及檔次,優(yōu)質(zhì)的物鏡都是齊焦和合軸的。目鏡
(二次放大,不改變分辨率,配合物鏡決定目視觀察時(shí)視場(chǎng)的大小和眼點(diǎn)的高低,也就是觀察時(shí)舒適性)中間鏡頭
(照相目鏡,中間變倍系統(tǒng)、接口等,與光電轉(zhuǎn)換部件的靶面尺寸一起決定了數(shù)碼采集的視場(chǎng)和倍率)照明器和聚光鏡
(提供觀察的光源,不同檔次的顯微鏡和不同的觀察方式有所不同)
第53頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡基礎(chǔ)知識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)物鏡是顯微鏡最重要的光學(xué)部件,第一次放大,決定了顯微鏡的分辨率及檔次第54頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡的種類按觀察介質(zhì)不同分:干燥系物鏡水浸系物鏡油鏡系物鏡按放大率高低分:低倍物鏡,高倍物鏡
光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第55頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡的種類按色差和場(chǎng)曲校正程度分:消色差物鏡(ACH)平場(chǎng)消色差物鏡(PLAN)平場(chǎng)半復(fù)消色差物鏡(PLFL)平場(chǎng)復(fù)消色差物鏡(PLAPO)基礎(chǔ)知識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第56頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡的種類不同數(shù)值孔徑(NA)的物鏡差別極大(以100X為例)消色差物鏡(ACH),NA0.755000元平場(chǎng)消色差物鏡(PLAN),NAO.8010000元平場(chǎng)半復(fù)消色差物鏡(PLFL)NAO.9020000元平場(chǎng)復(fù)消色差物鏡(PLAPO)
NAO.9540000元基礎(chǔ)知識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第57頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡的種類按用途既觀察方式來(lái)分:明場(chǎng)物鏡(B)明暗場(chǎng)物鏡(BD)明暗場(chǎng)、偏光(BDP)萬(wàn)能物鏡(U)相差(PH)或霍夫曼物鏡特種物鏡紅/紫外物鏡,帶光闌調(diào)整物鏡帶校正帽物鏡(LCD)等基礎(chǔ)知識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第58頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡的種類按工作距離分:普通工作距離物鏡長(zhǎng)工作距離物鏡超長(zhǎng)工作距離物鏡基礎(chǔ)知識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第59頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡的標(biāo)識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第60頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡的標(biāo)識(shí)物鏡上的標(biāo)識(shí)環(huán)以顏色來(lái)區(qū)分放大倍數(shù)
5X:紅
10X:黃
20X:綠
40X/50X:藍(lán)
100X:白光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第61頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡的標(biāo)識(shí)U—萬(wàn)能/超寬視野26.5M—材料(金相)/無(wú)罩物鏡(NC)BD—明視野法/暗視野法P(POL)—Polarizing偏光IR—用紅外光觀察L(SL)—長(zhǎng)(超長(zhǎng))工作距離Oil—油鏡PH-相差光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第62頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡的標(biāo)識(shí)舉例UMPlanFL-BDP
萬(wàn)能金相平場(chǎng)半復(fù)消色差物鏡(能作明視野/暗視野/偏光觀察并支持超寬視野)LMPlanApo
長(zhǎng)工作距離金相平場(chǎng)復(fù)消色差物鏡LCPlanFL-LCD
長(zhǎng)工作距離帶校正帽平場(chǎng)半復(fù)消色差物鏡(可用于觀察液晶LCD)LMPlan-IR
長(zhǎng)工作距離金相平場(chǎng)物鏡(能作紅外光觀察)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第63頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五目鏡
光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)二次放大,不改變分辨率,配合物鏡決定目視觀察時(shí)視場(chǎng)的大小和眼點(diǎn)的高低,也就是觀察時(shí)舒適性。第64頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五眼點(diǎn)和視場(chǎng)基礎(chǔ)知識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)眼點(diǎn)的高低和視場(chǎng)的大小決定了觀察的舒適程度第65頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五目鏡可安裝各種測(cè)微尺長(zhǎng)度/單位含量/晶粒度測(cè)量
光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)目鏡測(cè)微尺和目鏡測(cè)微計(jì)第66頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五目鏡與測(cè)微尺的配套目鏡型號(hào)視場(chǎng)數(shù)測(cè)微尺直徑(mm)機(jī)型NCWHK10X1819CK40WHB10X2020.4GX41WH10X2224BX2SWH10X26.528BX2光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第67頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五常見(jiàn)的中間接口倍率與CCD靶面尺寸常用CCD的靶面尺寸:1/3CCD靶面對(duì)角線尺寸=6MM1/2CCD靶面對(duì)角線尺寸=8MM1/1.8CCD靶面對(duì)角線尺寸=10.4MM2/3CCD靶面對(duì)角線尺寸=11MM
常用接口的倍率:U-TV1XC光學(xué)倍率=1倍U-TV0.5XC光學(xué)倍率=0.5倍U-TV0.35XC光學(xué)倍率=0.35倍U-TV0.25XC光學(xué)倍率=0.25倍OLYMPUS顯微鏡常用的光學(xué)視場(chǎng)數(shù):普通視場(chǎng)數(shù)(CK40M/PME3)=18/20(MM)寬視場(chǎng)數(shù)(BX/GX51)=22(MM)超寬視場(chǎng)數(shù)(AX70/BX61/GX71)=26.5(MM)
光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第68頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)光源聚光鏡照明方式光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)顯微鏡的光路顯微鏡的照明器第69頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)光源(燈泡和燈箱)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)燈箱燈泡第70頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)光源(燈泡和燈箱)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)早期的顯微鏡工作者利用油燈和自然界的太陽(yáng)光作為他們?cè)缙陲@微鏡的外部照明光源。他們常常利用非常巧妙的方法收集光線,例如用白色的木板來(lái)反射、利用多云的天氣使陽(yáng)光散射。但是這些方法缺乏可靠性,時(shí)常其照明的數(shù)值孔徑大于物鏡的數(shù)值孔徑,使圖像成生眩光。第71頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)光源(燈泡和燈箱)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)現(xiàn)代的顯微鏡一般都配有控制度很高的集成式光源。目前,顯微鏡的光源一般采用安裝在反射燈室內(nèi)的鹵鎢燈。其主要的幅射波長(zhǎng)中心大約在600nm到1200nm(見(jiàn)圖2)。典型的照明燈源及燈箱見(jiàn)圖1。燈箱中的燈泡為鹵鎢燈,直流12V供電,可提供100W的照明功率。燈泡的直流電源由安裝在顯微鏡內(nèi)的直流電源提供和控制。這類燈泡在工作時(shí)要發(fā)出大量的熱量,在燈箱中通常配置了一些隔熱的膜系,用來(lái)阻止熱量的傳遞。燈泡發(fā)出的光線直接進(jìn)入顯微鏡的底座并通過(guò)集光鏡然后通過(guò)一個(gè)燒結(jié)的玻璃散光片,到達(dá)并匯聚在聚光鏡的孔徑光欄處。早期產(chǎn)品燈泡的位置用幾個(gè)安放在燈箱旁邊的調(diào)整旋鈕來(lái)調(diào)整,或者直接采用特殊的可預(yù)調(diào)中心的燈泡?,F(xiàn)在的產(chǎn)品大多依靠精確的機(jī)械加工對(duì)燈泡進(jìn)行定位,無(wú)需調(diào)整.第72頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)光源的種類鎢絲燈鹵素?zé)艋」鉄?汞燈/氙燈)激光光源光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第73頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)鎢絲燈光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)鎢絲燈與室內(nèi)常用的白熾燈一樣,存在一些缺陷,例如隨使用的時(shí)間增加,發(fā)光強(qiáng)度要減??;伴隨著鎢的升華,將沉積在玻殼的內(nèi)壁使其變黑。這類燈泡的色溫平均值大約為2200K至3400K。如果在顯微攝影時(shí)使用這類燈泡,通常需要根據(jù)感光膠片的色溫值在光路中加入色溫補(bǔ)償濾光片。根據(jù)燈泡的封裝形狀、接口的結(jié)構(gòu)及燈絲的排列,鎢絲燈有很多種品種,根據(jù)接口的不同,常用的有插口和螺口,根據(jù)出光口的不同,常用的有頂部出光和側(cè)向出光.第74頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)鹵素?zé)艄鈱W(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)現(xiàn)代顯微鏡的光源主要是鹵素?zé)?。它由充滿惰性氣體的玻璃殼和里面由直流供電的鎢絲組成,與普通的白熾燈相比。在燈腔內(nèi)充加了鹵元素可有效地降低鎢絲的氧化而延長(zhǎng)燈泡的使用壽命,同時(shí),也可以使色溫較普通鎢絲燈高,所以,他的主要的優(yōu)點(diǎn)是發(fā)光明亮,尺寸小、較好的一致性,壽命長(zhǎng)及更高的經(jīng)濟(jì)性。鹵鎢燈在整個(gè)壽命期(1000-2500小時(shí))的發(fā)光十分穩(wěn)定。鹵鎢燈發(fā)出的光譜為連續(xù)光譜,其色溫2700-3350K(根據(jù)工作電壓),但在壽命的末期色溫有一些下降。第75頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)鹵素?zé)簦ɡ涔庠矗┕鈱W(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)冷光源一般由一種帶分色反光鏡的鹵鎢燈和光纖組成,反光鏡可讓燈泡發(fā)出的大部份紅外線透過(guò),并反射波長(zhǎng)較短的可見(jiàn)光和近紫外光。此類燈泡的工作電壓一般從6V至21V并置于可提供工作電壓的箱中,同時(shí)采用風(fēng)扇排除多余的熱量。這種照明器可以加裝其它的附件,如產(chǎn)生特殊照明效果的濾色片、產(chǎn)生偏振光的起偏器等。這種照明器常用作測(cè)量和體視顯微鏡照明。第76頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)鹵素?zé)簦ㄍ庵檬剑┕鈱W(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)在顯微鏡的使用中,如果顯微鏡上未配置內(nèi)照明器,可采用外部照明器來(lái)進(jìn)行顯微鏡的照明。圖6這一種典型的外照明光源。這種光源上一般可配散射濾光片使照度均勻,也可配有色濾色片作光色的平衡。有的型號(hào)上還可安裝偏振片,使偏光顯微鏡也可使用外部照明器。這種照明器有時(shí)也安裝有視場(chǎng)光欄,使用者可調(diào)節(jié)光欄來(lái)控制入射到顯微鏡中光束的直徑。第77頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)弧光燈(汞燈/氙燈)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)汞燈、氙燈均是顯微鏡特殊照明時(shí)所采用的光源。這類燈泡用外部電源供電。外部電源上有高壓激發(fā)和維持電路使燈泡正常工作。此類電源提供了足夠的起動(dòng)功率對(duì)燈泡進(jìn)行起動(dòng)(氣態(tài)蒸氣離子)并保持它在工作中不閃爍?;」鉄舻钠骄鶋勖鼮?00小時(shí)左右。大多數(shù)外部電源上設(shè)置有計(jì)時(shí)器,可使使用者了解具體的使用時(shí)間。第78頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)汞燈光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)汞燈的功率從50W到200W有數(shù)種規(guī)格,其結(jié)構(gòu)通常為在石英玻璃制成的玻殼中封裝有兩個(gè)電極,玻殼中充有汞。在光譜為近紫外至紅外波段內(nèi),這種弧光燈不能提供連續(xù)的發(fā)光強(qiáng)度(見(jiàn)圖8汞燈的發(fā)射光譜)。汞弧光燈發(fā)光的波長(zhǎng)主要集中在近紫外部區(qū)域,光強(qiáng)的峰值為313、334、365、406、435、546及578nm幾個(gè)點(diǎn)。在顯微術(shù)中,大多數(shù)情況下這種燈不宜使用,除了熒光顯微術(shù),汞弧光燈不宜用來(lái)作明場(chǎng)、暗場(chǎng)、DIC、或偏光攝影的光源,主要原因是汞燈的非連續(xù)光譜不能使標(biāo)本產(chǎn)生真實(shí)的色彩。第79頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)氙燈光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)與汞燈相比,氙燈的光譜的連續(xù)性要好得多(見(jiàn)圖9)。它不象汞燈那樣有極強(qiáng)的光譜峰值,在近紫外部份的發(fā)光并不強(qiáng),而在紅外部份的發(fā)光比較強(qiáng)。在使用這種燈時(shí)應(yīng)注意發(fā)熱的控制。短弧氙燈的電弧尺寸容易充滿物鏡的后焦平面,使光能的利用率得以提高,所以,它更適合作顯微鏡的光源。第80頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)激光光源光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)在最近幾年,激光的使用得到了發(fā)展,特別是氬離子激光。氬離子激光在488和514nm處有很強(qiáng)的發(fā)射功率。盡管它的成本較高,但在激光掃描共焦顯微術(shù)中十分有用。激光器有數(shù)種,它們提供各自的發(fā)射光譜。圖10所示為顯微鏡中(熒光、共焦和單色光明場(chǎng)攝影)常用的兩種激光器的發(fā)射光譜。第81頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)聚光鏡光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)透射顯微鏡聚光鏡裝在載物臺(tái)的下方。落射顯微鏡物鏡同時(shí)充當(dāng)聚光鏡的作用,聚光鏡可以將光線聚焦于被檢物體上,以得到最好的照明效果。
第82頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)
根據(jù)物鏡數(shù)值孔徑的大小和結(jié)構(gòu)不同,聚光鏡的大致有如下分類:1.阿貝聚光鏡(Abbecondenser)阿貝聚光鏡由兩片透鏡組成,有較好的聚光能力,但是在物鏡數(shù)值孔徑高于0.60時(shí),則色差,球差就顯示出來(lái)。因此,多用于普通顯微鏡上。2.消色差聚光鏡(Achromaticaplanaticcondenser)這種聚光鏡又名“消球差聚光鏡”和“齊明聚光鏡”,它由一系列透鏡組成,它對(duì)色差球差的校正程度很高,能得到理想的圖象,是明場(chǎng)鏡檢中質(zhì)量最高的一種聚光鏡,其NA值達(dá)1.4,因此,在高級(jí)研究顯微鏡常配有此種聚光鏡。它不適用于4X以下的低倍物鏡,否則照明光源不能充滿整個(gè)視場(chǎng)。3.搖出式聚光鏡(Swingoutcondenser)在使用低倍物鏡時(shí)(如4X),由于視場(chǎng)大,光源所形成的光錐不能充滿真整個(gè)視場(chǎng),造成視場(chǎng)邊緣部分黑暗,只中央部分被照亮。要使視場(chǎng)充滿照明,就需將聚光鏡的上透鏡從光路中搖出。4.其它聚光鏡聚光鏡除上述明場(chǎng)使用的類型外,還有作特殊用圖的聚光鏡。如暗視場(chǎng)聚光鏡,相襯聚光鏡,偏光聚光鏡,微分干涉聚光鏡及萬(wàn)能聚光鏡等.第83頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)聚光鏡光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第84頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)照明方式光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)顯微鏡經(jīng)常采用的有兩種照明方式,既:(1)臨界照明(Criticalillumination)(2)柯拉照明(koehlerillumination)
第85頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)臨界照明光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)光源經(jīng)過(guò)聚光鏡后,成像于物平面上。若忽略光能的損失,則光源像的亮度與光源本身相同,因此,這種方法相當(dāng)于在物平面上放置光源。顯然,在臨界照明中,如果光源表面亮度不均勻,或明顯地表現(xiàn)出細(xì)小的結(jié)構(gòu),如燈絲等,那么就要嚴(yán)重影響顯微鏡觀察效果,這是臨界照明的缺點(diǎn)。其補(bǔ)救的方法是在光源的前方放置乳白和吸熱濾色片,使照明變得較為均勻和避免光源的長(zhǎng)時(shí)間的照射而損傷被檢物體。用透射光照明時(shí),物鏡成像光束的孔徑角,被聚光鏡像方光束的孔徑角所決定,為使物鏡的數(shù)值孔徑得到充分利用,聚光鏡應(yīng)有與物鏡相同或稍大的數(shù)值孔徑。
第86頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的照明系統(tǒng)柯拉照明
光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)臨界照明中物面光照度不均勻的缺點(diǎn),在柯拉照明中可以消除。在光源與聚光鏡間加一輔助聚光鏡,如圖所示??梢?jiàn),由于不是直接把光源而是把被光源均勻照明了的輔助聚光鏡2(也稱為柯拉鏡)成像在標(biāo)本上,所以物鏡的視場(chǎng)(標(biāo)本)得到均勻的照明。
第87頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五光學(xué)顯微鏡常見(jiàn)的觀察方法明場(chǎng)暗場(chǎng)偏光微分干涉其他(熒光、相差、HOFFMAN、紅外、色襯等)基礎(chǔ)知識(shí)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第88頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五常見(jiàn)的觀察方式—明場(chǎng)明場(chǎng):(利用照明光線直接照射在被測(cè)試樣反射回來(lái)后觀察,適用于常規(guī)組織的檢測(cè),如珠光體/鐵素體/馬氏體等金相組織的觀察)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第89頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五常見(jiàn)的觀察方式—暗場(chǎng)暗場(chǎng):(利用丁道爾現(xiàn)象所產(chǎn)生的光的衍射/繞射,用斜射照明的方式觀察被測(cè)試樣,可以看到明場(chǎng)有時(shí)看不到的物質(zhì),故又稱為超顯微術(shù),適用于夾雜物或缺陷的檢查)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第90頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五常見(jiàn)的觀察方式—偏光偏光:(利用偏光鏡片的單向振動(dòng)特性,在垂直正交時(shí)可對(duì)具有雙折射性的物質(zhì)進(jìn)行定性檢查,適用與地質(zhì)巖相和晶體性?shī)A雜物的觀察,如氧化亞銅夾雜的檢查)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第91頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五常見(jiàn)的觀察方式—微分干涉微分干涉:(又稱DIC或諾馬爾斯基觀察法,利用直線偏振光通過(guò)諾馬斯基棱鏡后的干涉現(xiàn)象,使觀察到的物體表面呈現(xiàn)凹凸不平的立體效果)。光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第92頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五其他觀察方式熒光觀察相差霍夫曼(HOFFMAN)等光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第93頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五常用顯微鏡附件顯微操作儀冷熱臺(tái)自動(dòng)掃描臺(tái)共覽裝置描繪裝置圖象分析系統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)知識(shí)第94頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡分類按應(yīng)用范圍分:
1.工業(yè)檢測(cè)類顯微鏡
2.生命科學(xué)類顯微鏡
第95頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡分類按外型及物鏡的朝向來(lái)分:
1.正置顯微鏡
2.倒置顯微鏡
物鏡向上物鏡向下第96頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡分類按功能分類:
1.常規(guī)顯微鏡(材料的組織形貌觀察)2.偏光顯微鏡(晶體/礦石檢查)3.測(cè)量顯微鏡(工件量測(cè))4.立體顯微鏡(低倍宏觀檢查/操作)5.硅片/液晶類檢查顯微鏡(各種尺寸平面樣品的檢查)5.激光共焦掃描顯微鏡(高分辨率,三維重造Z軸的精確測(cè)量)第97頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五OLYMPUS產(chǎn)品分類材料工程領(lǐng)域:倒置金相顯微鏡:GX71----大型系統(tǒng)研究級(jí)
GX51----實(shí)驗(yàn)室及檢驗(yàn)級(jí)
CK40----日常檢驗(yàn),教學(xué)級(jí)正立金相顯微鏡:AX70M----大型系統(tǒng)研究級(jí)
BX61----萬(wàn)能全自動(dòng)級(jí)
BX51----研究,開(kāi)發(fā)檢驗(yàn)
BX41----日常檢驗(yàn),教學(xué)激光共焦掃描顯微鏡:OLS-----高分辨率,高精度測(cè)量,三維重造,焦深疊加立體顯微鏡:SZX12---系統(tǒng)研究級(jí)
SZX9/7—實(shí)驗(yàn)室及檢驗(yàn)級(jí)
SZX61/51-日常觀察測(cè)量顯微鏡:STM6----工件量測(cè)數(shù)碼采集系統(tǒng):DP70----頂級(jí)顯微數(shù)碼照相裝置(1250萬(wàn)像素)DP12----專業(yè)顯微數(shù)碼照相裝置(340萬(wàn)像素)DS5060—顯微數(shù)碼相機(jī)(510萬(wàn)像素)CDI-----數(shù)碼采集裝置(130/250萬(wàn)像素)
模擬CCD-CCD+采集卡(40萬(wàn)像素)
圖象處理系統(tǒng):OLYCIA---定量金相分析系統(tǒng)
OLYSIM---測(cè)量軟件專用附件:LINKAM---程序熱臺(tái),冷臺(tái),巖像,高分子電動(dòng)掃描臺(tái)-夾雜物的多視場(chǎng)測(cè)量及定量分析.
第98頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡配套時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)倒置/正置透射/反射觀察方法(明場(chǎng)/暗場(chǎng)/偏光/微分干涉或)物鏡檔次(非常重要!其實(shí)也就是分辨率的問(wèn)題,直接決定了觀察質(zhì)量,最需要注意的是物鏡的數(shù)值孔徑即NA值)需要接駁的圖象采集的種類(數(shù)碼/大版/135其實(shí)也就是光學(xué)接口的多寡(是否能同時(shí)接駁多種照相裝置而無(wú)需拆卸)目鏡(是否需要目鏡測(cè)微尺,視場(chǎng)數(shù)有多大,決定了觀察效果的舒適性)數(shù)碼采集系統(tǒng)的檔次(如像素值,實(shí)時(shí)顯示的分辨率和速度)圖象處理軟件(是否能滿足實(shí)際使用的要求即想用來(lái)解決什么問(wèn)題)根據(jù)實(shí)際需要選擇最合適的配置第99頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五如何正確了解和使用顯微鏡學(xué)習(xí)了解顯微鏡的要點(diǎn)規(guī)范正確的顯微鏡使用方法維護(hù)保養(yǎng)的重要性第100頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五各部名稱及注意點(diǎn):物鏡:NA值(和分辨率的關(guān)系),工作距離(長(zhǎng)/超長(zhǎng)),安裝直徑(明/暗場(chǎng)),支持視場(chǎng)數(shù)(20/22/26.5),特殊用途(消應(yīng)力/虹彩光欄/覆蓋差調(diào)整/調(diào)整帽/相差等).目鏡:視場(chǎng)數(shù)(18/20/22/26.5),外徑(23.2/30毫米),是否可以裝目鏡測(cè)微尺/怎么裝/裝多大的測(cè)微尺.中間接口:倍數(shù),接口類型觀察頭:直筒.傾斜筒(傾斜角度),視野數(shù)(18/20/22/26.5),單/雙或三目結(jié)構(gòu),平推式/轉(zhuǎn)軸式.主機(jī):光源功率(30/100W),調(diào)焦部分的結(jié)構(gòu)(載物臺(tái)/物鏡/鏡筒移動(dòng)調(diào)焦),是否內(nèi)置濾色片)物鏡轉(zhuǎn)盤:多少物鏡安裝孔,粗/細(xì),手/電動(dòng)轉(zhuǎn)換,是否有DIC安裝孔,是否可調(diào)中心,是固定還是可卸.載物臺(tái):面積尺寸,移動(dòng)范圍,左/右手調(diào)節(jié),是否可旋轉(zhuǎn),是否可定中心,承重能力(倒置/測(cè)量),精度(測(cè)量顯微鏡)聚光鏡:NA值,常規(guī)型(阿貝/齊明/搖擺式),專用型(長(zhǎng)工作距離/偏光/相差)調(diào)焦機(jī)構(gòu):粗微調(diào)是否同軸,粗微調(diào)行程,微調(diào)精度(BX41/2UM,BX51/1UM).如何正確了解和使用顯微鏡第101頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五系統(tǒng)配套圖如何正確了解和使用顯微鏡第102頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五規(guī)范正確的顯微鏡使用方法:顯微鏡觀察及照相的正確調(diào)整顯微鏡機(jī)械及電器部分使用的注意事項(xiàng)如何正確了解和使用顯微鏡第103頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡觀察的正確調(diào)整
正確調(diào)整光路的重要性燈絲的對(duì)中調(diào)整透射顯微鏡光路的調(diào)整方法反射顯微鏡光路的調(diào)整方法如何正確了解和使用顯微鏡第104頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五正確調(diào)整光路的重要性
在顯微鏡中,光學(xué)器件調(diào)校的正確與否,將直接影響有效的標(biāo)本照明。不正確的校正將嚴(yán)重地影響顯微鏡攝影照片的質(zhì)量,使其產(chǎn)生斑點(diǎn)、虛光、色斑、襯度不良及其它各式各樣的缺陷我們經(jīng)??吹?在提供給學(xué)術(shù)討論、展覽會(huì)和科技出版物的顯微攝影照片中,有80%到90%光路校正均不正確,其標(biāo)本的照明狀況很差。這是顯微觀察和顯微攝影中存在的一個(gè)十分嚴(yán)重的通病。在很多情況下,一臺(tái)設(shè)計(jì)精良的顯微鏡并不能獲得良好的成像質(zhì)量。其主要原因多半是光源未調(diào)校好,使標(biāo)本不能獲得充分的照明所至。顯微鏡標(biāo)本最佳的照明狀態(tài)應(yīng)該是明亮、無(wú)眩光、而且視場(chǎng)照度均勻如果未經(jīng)正確校正,一臺(tái)價(jià)值2萬(wàn)美圓的顯微鏡的成像水平可能與手持式放大鏡差不多,所拍照片可能還不及一臺(tái)校正到柯拉照明最佳狀態(tài)的,價(jià)值2千美圓的顯微鏡。一個(gè)熟練認(rèn)真的操作者不僅能熟練地進(jìn)行校正,并能針對(duì)標(biāo)本的差異和物鏡的不同進(jìn)行實(shí)踐。同時(shí),要使顯微鏡處于最佳的狀態(tài),在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀產(chǎn)品的使用說(shuō)明書(shū)或向有經(jīng)驗(yàn)的操作人員請(qǐng)教是非常重要的細(xì)節(jié).如何正確了解和使用顯微鏡第105頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五燈絲的對(duì)中調(diào)整
如何正確了解和使用顯微鏡無(wú)論顯微鏡采用的是柯拉照明或臨界照明或其它的照明方式,顯微鏡最基本的校正步驟為燈源的校正。許多現(xiàn)代顯微鏡采用預(yù)對(duì)中和預(yù)對(duì)焦燈泡,但老式的顯微鏡仍舊需要操作者進(jìn)行燈泡的調(diào)中和對(duì)焦。下面介紹燈絲的校正方法。打開(kāi)顯微鏡的燈源后將視場(chǎng)光欄和聚光鏡的孔徑光欄完全打開(kāi)。移出毛玻璃拔下目鏡或放置一張白紙?jiān)陲@微鏡底座光路出口處并觀察燈絲像用燈室上的調(diào)整螺釘移動(dòng)燈座上的燈絲,使其上下前后移動(dòng)并調(diào)至清晰對(duì)中為至.第106頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五透射顯微鏡光路的調(diào)整方法
將10X物鏡旋入光路。然后在載物臺(tái)上放置一片標(biāo)本,通過(guò)粗調(diào)慢慢地升起載物臺(tái)使標(biāo)本十分靠近物鏡(但不能碰到物鏡),從此點(diǎn)開(kāi)始慢慢地降下載物臺(tái)使標(biāo)本觀察清晰。在使用雙目觀察頭時(shí)要調(diào)整雙目?jī)社R筒的間距,使其與你的瞳孔距相重合。人眼瞳孔距的平均數(shù)為65mm。大雙目頭上刻有瞳孔距的刻度??蓪⒖潭仁局嫡{(diào)到該值而不用進(jìn)行上述的校正。在兩目鏡上分別進(jìn)行視度調(diào)節(jié),正確視度調(diào)節(jié)可以補(bǔ)償使用者左右眼的差異,使兩眼觀察到的視場(chǎng)完全清晰。這樣也可保證所有物鏡時(shí)的齊焦。目鏡的視度調(diào)節(jié)也可彌補(bǔ)一般的視覺(jué)問(wèn)題,例如遠(yuǎn)視或近視,使操作者在觀察時(shí)不用戴眼鏡。但是目鏡的調(diào)整不能補(bǔ)償散光,這類人員在觀察鏡下標(biāo)本是必需戴眼鏡的。如果是可調(diào)焦目鏡,需首先旋轉(zhuǎn)目鏡看清楚目鏡內(nèi)的刻度,然后調(diào)焦使標(biāo)本成像同時(shí)清晰。如何正確了解和使用顯微鏡第107頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五透射顯微鏡光路的調(diào)整方法
慢慢地將視場(chǎng)光欄關(guān)閉到最小,使視場(chǎng)中可看到模糊的光點(diǎn)。升降聚光鏡直到視場(chǎng)光欄的成像與原已調(diào)清晰的標(biāo)本同時(shí)清晰。調(diào)整聚光鏡調(diào)中螺釘使視場(chǎng)光欄像位于視場(chǎng)中心(即顯微鏡的光軸)。然后將視場(chǎng)光欄開(kāi)到剛好超過(guò)視場(chǎng)(目視觀察時(shí)),或剛好超過(guò)攝影目鏡中標(biāo)記拍攝面積的標(biāo)記(顯微攝影時(shí))。不應(yīng)將視場(chǎng)光欄無(wú)限制的打開(kāi),那樣可能導(dǎo)致過(guò)大的眩光或降低襯度。如何正確了解和使用顯微鏡第108頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五透射顯微鏡光路的調(diào)整方法
移出一個(gè)目鏡,從該目鏡筒向內(nèi)可看到物鏡的后焦面上的孔徑光欄的圖像。調(diào)節(jié)孔徑光欄的尺寸,通常是將孔徑光欄調(diào)至目鏡筒中能看到的物鏡出瞳的60%到90%。在這種情況下,使用10X或大多其他物鏡時(shí),已符合柯拉照明的條件,但對(duì)于高倍率的物鏡來(lái)說(shuō),必須對(duì)視場(chǎng)光欄和孔徑光欄進(jìn)行重新調(diào)整,高倍觀察時(shí)適當(dāng)?shù)貙⒁晥?chǎng)光欄和孔徑光攔(尤其重要)關(guān)小,可以獲得更好的反差和效果,顯微照相亦是如此。如何正確了解和使用顯微鏡第109頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五透射顯微鏡光路的調(diào)整方法
柯拉照明的條件不適應(yīng)倍率較小的物鏡(5X或更?。?,使用較小倍率物鏡時(shí)應(yīng)用10X物鏡對(duì)其校正。搖出式聚光鏡(SC)有一個(gè)可擺出式前片聚光鏡片。當(dāng)使用5X或更低倍數(shù)的物鏡時(shí),要將此前片聚光鏡搖出光路,另外,有一些聚光鏡的前片可以旋出或者采用一個(gè)聚光鏡轉(zhuǎn)臺(tái),使聚光鏡可使用在高倍物鏡和低倍物鏡上。如何正確了解和使用顯微鏡第110頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五反射顯微鏡光路的調(diào)整方法
反射光路視場(chǎng)和孔徑光闌的調(diào)整與與透射光路基本類似在反射光路中,由于物鏡同時(shí)充當(dāng)了聚光鏡的作用,部件較少,雖然設(shè)計(jì)更為復(fù)雜,但光路調(diào)整變得更為容易。反射光路中孔徑光欄位于靠近光源的位置,這種情況下光源可均勻地照射在已調(diào)焦的標(biāo)本上視場(chǎng)上。反射光系統(tǒng)中,當(dāng)物鏡更換時(shí),物鏡和聚光鏡的數(shù)值孔徑會(huì)同時(shí)變更。反射光顯微鏡術(shù)中的這種情況,降低了建立柯拉照明條件的復(fù)雜性。與透射光照明一樣,反射式照明器中孔徑光欄的調(diào)整也是十分重要的。尤其是在高倍檢查時(shí),適度調(diào)整孔徑光欄的尺寸,可控制標(biāo)本的襯度、減少雜散光及光暈,獲得最佳的成像質(zhì)量。如何正確了解和使用顯微鏡第111頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡調(diào)整的其他注意事項(xiàng)
對(duì)于初學(xué)者來(lái)講,只要進(jìn)行認(rèn)真的訓(xùn)練,要把透射或反射光顯微鏡調(diào)整到滿足柯拉照明的狀態(tài)還是比較容易的。其實(shí)只要打開(kāi)顯微鏡的電源,細(xì)仔檢查顯微鏡的光學(xué)元器件,確保已正確的校正;確保光源已對(duì)好中心;聚光鏡和視場(chǎng)光欄正確的調(diào)整到柯拉照明的狀態(tài)。在顯微鏡的使用中,在電源的開(kāi)關(guān)時(shí)還需要注意盡量由最低電壓值開(kāi)始。這種做法可以有效地是顯微鏡和燈泡免受電流、電壓的沖擊,降低故障率。如何正確了解和使用顯微鏡第112頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡調(diào)整的其他注意事項(xiàng)
在顯微鏡的使用中,在電源的開(kāi)關(guān)時(shí)還需要注意盡量由最低電壓值開(kāi)始。這種做法可以有效地是顯微鏡和燈泡免受電流、電壓的沖擊,降低故障率。大多數(shù)顯微鏡還具有載物臺(tái)松緊度調(diào)節(jié)功能,使用者可根據(jù)自己實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整如何正確了解和使用顯微鏡對(duì)于初學(xué)者來(lái)講,只要進(jìn)行認(rèn)真的訓(xùn)練,要把透射或反射光顯微鏡調(diào)整到滿足柯拉照明的狀態(tài)還是比較容易的。其實(shí)只要打開(kāi)顯微鏡的電源,細(xì)仔檢查顯微鏡的光學(xué)元器件,確保已正確的校正;確保光源已對(duì)好中心;聚光鏡和視場(chǎng)光欄正確的調(diào)整到柯拉照明的狀態(tài)。第113頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡調(diào)整的其他注意事項(xiàng)
限位環(huán)可保證樣品不與物鏡表面接觸,從而保護(hù)樣品和物鏡。當(dāng)樣品對(duì)焦清晰后(高倍時(shí)),按箭頭方向扳動(dòng)限位環(huán)并鎖定,此時(shí)載物臺(tái)將不能再通過(guò)粗調(diào)焦旋鈕向上移動(dòng)(微調(diào)不受此限制)在顯微鏡使用過(guò)程中,可以根據(jù)自己的感覺(jué)是否舒適來(lái)調(diào)整粗調(diào)焦的松緊度。注意:如張力過(guò)少,載物臺(tái)會(huì)自動(dòng)向下滑動(dòng),從而不能準(zhǔn)確對(duì)焦.如何正確了解和使用顯微鏡第114頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)安裝和維修用基本工具工具的使用方法判斷故障的方法工程師在安裝和維護(hù)保養(yǎng)工作中的注意事項(xiàng)第115頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五安裝和維修用基本工具鑷子和吹氣球清潔紙、清潔液及清潔液瓶公制六角改錐(1.5—5mm一套)十字和一字改錐(大、中、小各一把)
以上為安裝必備的工具萬(wàn)用表斜口鉗、尖嘴鉗、魚(yú)口鉗、6寸、10寸活扳手各一套鐘表十字和一字改錐各一套公制六角改錐0.89和1.27mm各一把什錦銼刀一套烙鐵、焊錫絲、松香一套顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第116頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五工具的使用方法鑷子和吹氣球清潔紙、清潔液及清潔液瓶公制六角改錐(1.5—5mm一套)十字和一字改錐(大、中、小各一把)
以上為安裝必備的工具萬(wàn)用表斜口鉗、尖嘴鉗、魚(yú)口鉗、6寸、10寸活扳手各一套鐘表十字和一字改錐各一套公制六角改錐0.89和1.27mm各一把什錦銼刀一套烙鐵、焊錫絲、松香一套顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第117頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五工具的使用方法
如何用鑷子、吹氣球、鏡頭紙、清潔液來(lái)擦洗光學(xué)部件。在擦洗受污染的光學(xué)部件之前,首先用吹氣球吹去所擦拭的光學(xué)部件的表面灰塵顆粒以免在擦拭過(guò)程中損傷鏌層。用鑷子裹上鏡頭紙蘸上清潔液后擦拭受污染的部位直至光學(xué)部件清潔透亮。
清潔液的配置無(wú)水酒精(3):無(wú)水乙醚(7)顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)裹紙方法第118頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五擦拭方向和部位目鏡表面物鏡表面聚光鏡表面底座光源出口目鏡筒內(nèi)側(cè)擦拭方向擦拭部位顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第119頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五擦拭方法顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第120頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五工具的使用方法
如何正確地使用改錐、烙鐵及萬(wàn)用表改錐使用的原則第一是選用合適的改錐,其次用力時(shí)三分?jǐn)Q、七分頂,再者是拆裝機(jī)器時(shí)裝卸螺釘?shù)捻樞蛞⒁鈱?duì)角線法則,不正確的使用方法非常容易導(dǎo)致螺釘損壞,給維修工作帶來(lái)不必要的麻煩烙鐵的使用方法一是要注意經(jīng)常修整烙鐵頭,二是在焊接過(guò)程中一定要注意元器件的刮腿、搪錫及焊接點(diǎn)的光滑無(wú)毛刺、飽滿適度,這樣的工藝要求可以在很大程度上避免虛、假焊的產(chǎn)生。萬(wàn)用表在電器維修中是使用得最為廣泛和必須的儀表,結(jié)合經(jīng)驗(yàn),可以判斷大多數(shù)電器故障,在使用中,主要需要注意的是使用擋位是否正確,在不用時(shí)數(shù)字表需將電源關(guān)閉,指針表需將檔位撥至交流電壓的高檔。
顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第121頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五常見(jiàn)判斷故障的方法光路臟或長(zhǎng)霉
該故障可導(dǎo)致顯微鏡觀察效果下降,具體判斷方法可通過(guò)拔下目鏡的向鏡筒里觀察,如光路有長(zhǎng)霉或大塊的污物,可被清晰的觀察到,同時(shí)也可以通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)各個(gè)光學(xué)部件來(lái)準(zhǔn)確判斷污物和霉斑的位置,如光路只是由于時(shí)間的關(guān)系積塵太多,也可以看到光路不夠透亮。顯微鏡觀察亮度下降原因多半在于燈泡使用壽命到期或光路中濾色片使用不當(dāng)。方法為更換燈泡和檢查光路中的濾色片的使用,另外,如顯微鏡使用時(shí)間過(guò)長(zhǎng),則有可能是可調(diào)電位器老化引起的,可用萬(wàn)用表來(lái)判斷故障。調(diào)焦不靈首先檢查顯微鏡的限位和松緊機(jī)構(gòu),如無(wú)問(wèn)題,則需拆開(kāi)粗微調(diào)機(jī)構(gòu)檢查,原因多半由齒輪損壞引起。左右不同心
容易引起在觀察過(guò)程中出現(xiàn)頭暈、惡心的情況,可通過(guò)校正用標(biāo)準(zhǔn)物鏡和目鏡來(lái)檢查或通過(guò)用左右眼分別觀察視野邊緣來(lái)判斷。無(wú)電源首先檢查外電源是否正常,然后檢查保險(xiǎn)是否完好,所有開(kāi)關(guān)及連線是否正常,排除這些故障后再打開(kāi)機(jī)身做電器檢查。顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第122頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五物鏡頂鏡污染判斷方法顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)常見(jiàn)判斷故障的方法左右不同心的判斷方法第123頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五工程師在安裝和維護(hù)保養(yǎng)工作中的注意事項(xiàng)儀器安裝注意事項(xiàng)儀器維修注意事項(xiàng)儀器使用注意事項(xiàng)顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第124頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五儀器安裝注意事項(xiàng)在接到安裝要求后盡快聯(lián)系用戶,確認(rèn)安裝時(shí)間、地點(diǎn)及貨物情況,同時(shí)仔細(xì)查閱貨物配置,檢查是否有配置遺漏并作相關(guān)準(zhǔn)備。安裝前,應(yīng)確認(rèn)對(duì)所安裝的機(jī)器部件足夠熟悉,以避免漏裝或由于錯(cuò)誤安裝順序造成的不必要麻煩,如遇有不熟悉的情況,要提前做充分的準(zhǔn)備(仔細(xì)閱讀安裝手冊(cè)和請(qǐng)教其他有經(jīng)驗(yàn)的工程師)。在到達(dá)用戶之前,要向用戶確認(rèn)安裝條件是否能滿足儀器安裝要求,以免發(fā)生到達(dá)現(xiàn)場(chǎng)后不能工作的情況,可提前向用戶告之安裝環(huán)境要求(見(jiàn)附錄)。在到達(dá)用戶處后,首先確認(rèn)貨物包裝箱未被打開(kāi)并注意觀察包裝是否有破損(如貨物帶有防撞擊和防顛覆標(biāo)志,應(yīng)仔細(xì)閱讀標(biāo)志說(shuō)明并注意觀察標(biāo)志是否變紅),如貨物外包裝破損,應(yīng)拍照備案并小心開(kāi)啟包裝,如發(fā)現(xiàn)問(wèn)題,根據(jù)具體情況做相應(yīng)處理,問(wèn)題嚴(yán)重應(yīng)及時(shí)停止安裝并報(bào)商檢,如貨物帶有防撞擊和防顛覆標(biāo)志且標(biāo)志已變紅,應(yīng)立即停止安裝拍照備案并報(bào)商檢。安裝開(kāi)始前應(yīng)根據(jù)貨物清單詳細(xì)清點(diǎn)物品,確認(rèn)正確后,方可進(jìn)行安裝,貨物清單盡量以用戶處為準(zhǔn)。安裝開(kāi)始后應(yīng)首先保證安裝位置的穩(wěn)固和清潔以及足夠的安全的電源插孔以保證儀器的使用環(huán)境,如有需要,要主動(dòng)協(xié)助用戶做好安裝位置的清潔工作。顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第125頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五儀器安裝注意事項(xiàng)安裝開(kāi)始后,要注意一些安裝細(xì)節(jié),比如應(yīng)將安裝過(guò)的空箱子放在一起,而未安裝的放在一起,以避免漏裝,同時(shí),拆開(kāi)的塑料袋及紙盒一定要裝回原處以保持整潔,此外,要注意各種部件一定要按要求安裝到位(如晶粒度尺,測(cè)微尺等的安裝方向),同時(shí)在安裝過(guò)程中要注意輕拿輕放同時(shí)不能用手觸摸光學(xué)部分以保證各個(gè)光學(xué)部件的清潔和性能。安裝物鏡時(shí),正置顯微鏡先將物鏡接到換鏡轉(zhuǎn)盤再裝到顯微鏡,而倒置顯微鏡可以先裝換鏡轉(zhuǎn)盤,再安裝物鏡,安裝時(shí)如無(wú)特殊要求,一般按放大倍率順序安裝,此外,一定確保安裝物鏡牢固到位,以免出現(xiàn)不齊焦和不合軸的情況通電前一定要確認(rèn)用戶提供的電壓與顯微鏡要求電壓一致(100V/220V)方可通電,重要,一定注意!在調(diào)試時(shí),可能在目鏡中看到比較清晰的污物,那產(chǎn)生的原因可能是所加的標(biāo)尺或晶粒度尺等外加活動(dòng)附件臟了,可以動(dòng)一動(dòng)檢查一下所在位置,一般用吹氣球吹一下基本問(wèn)題就可解決,如還不能解決,再用清潔液檫拭。在安裝和培訓(xùn)過(guò)程時(shí),要注意向用戶介紹顯微鏡構(gòu)成,需著重介紹我們顯微鏡的優(yōu)點(diǎn),比如我們的鹵素?zé)襞荩褂脡勖L(zhǎng),以前的我們的用戶有的幾十年沒(méi)換過(guò)燈泡,以及模塊化設(shè)計(jì),人機(jī)工程學(xué)設(shè)計(jì)等等,以使用戶更為了解我們的產(chǎn)品。要充分利用安裝調(diào)試的機(jī)會(huì),與用戶作細(xì)致的交流,詳細(xì)了解相關(guān)市場(chǎng)信息和專業(yè)知識(shí),使自己和公司都能逐步積累并從中受益。為使用戶能用好儀器并在以后的工作中發(fā)揮更大的作用,我們可以給用戶留下一個(gè)簡(jiǎn)單實(shí)用的簡(jiǎn)易使用指南(參考附件的使用注意事項(xiàng),但各地要根據(jù)儀器的實(shí)際情況作修改)。安裝作業(yè)完成后,要有詳細(xì)完整的報(bào)告。顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第126頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五儀器安裝注意事項(xiàng)附錄操作環(huán)境要求:海拔:最高2000米;環(huán)境溫度:5℃到40℃;最大相對(duì)濕度:溫度達(dá)到31℃時(shí)為80%,溫度達(dá)到34℃時(shí)線性降低為70%,溫度達(dá)到37℃時(shí)為60%,溫度達(dá)到40℃時(shí)為50%(潮濕地區(qū)建議室內(nèi)使用抽濕機(jī),重要光學(xué)部件如物鏡長(zhǎng)期不用應(yīng)放進(jìn)干燥皿里并及時(shí)更換干燥劑);供電電壓波動(dòng):不超過(guò)正常電壓的±10%(電壓不穩(wěn)地區(qū)建議加穩(wěn)壓器);污染級(jí)別:2(按照IEC664)顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第127頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五儀器安裝注意事項(xiàng)附錄配套設(shè)施要求:需一專用房間或顯微鏡室放置顯微鏡,房間應(yīng)避免設(shè)在多塵、陽(yáng)光直射、容易受到振動(dòng)、高溫高濕及通風(fēng)口的地方,如當(dāng)?shù)貧夂蜉^為潮濕,應(yīng)安裝抽濕機(jī)。需一堅(jiān)固、平坦桌面或工作臺(tái),尺寸視選配不同顯微鏡及附件而略有差別,未加配電腦、監(jiān)視器、電動(dòng)載物臺(tái)或照相控制裝置的,一般選用2M×1.2M即可,而其他視選加附件不同,適當(dāng)選擇桌子尺寸。需提供顯微鏡要求的額定電壓,如不能直接提供需要提供變壓器,以滿足顯微鏡電壓要求,在電壓不穩(wěn)地區(qū)需提供穩(wěn)壓器,另根據(jù)所選不同電器部件數(shù)目提供滿足相應(yīng)需求的接線板,同時(shí)接線板的質(zhì)量一定要好以避免接觸不良對(duì)儀器造成的損傷。最好加配干燥皿(放置附件)及防塵罩。顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第128頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五儀器維修注意事項(xiàng)技術(shù)人員在接到報(bào)修要求后應(yīng)及時(shí)、快捷地與用戶取得聯(lián)系并仔細(xì)、耐心地向用戶了解故障情況,準(zhǔn)確地判斷出用戶所反映的問(wèn)題是由使用不當(dāng)還是儀器故障引起的(重要?。┎⒆罱K向用戶提供合理的解決方案,及時(shí)解決用戶的實(shí)際問(wèn)題原則上除保修期內(nèi)以及定期巡回的情況外,所有的服務(wù)應(yīng)為收費(fèi)服務(wù)(質(zhì)保期內(nèi)人為損壞和巡修時(shí)大修/零件損壞除外),收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)照既定標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行,但如遇特殊情況,在地區(qū)主管同意下,可以特事特辦。對(duì)使用者提出的問(wèn)題,擔(dān)當(dāng)工程師在接到信息后正常工作日要有4小時(shí)以內(nèi)反應(yīng)的電話支持。正常工作日晚上電話支持反應(yīng)時(shí)間為12小時(shí)。雙休日及節(jié)假日電話支持反應(yīng)時(shí)間為24小時(shí)。如用戶有維修要求,擔(dān)當(dāng)工程師需盡快做出報(bào)價(jià)給用戶(回到辦公室一天內(nèi)),如用戶接收受報(bào)價(jià),盡量在一周到達(dá)現(xiàn)場(chǎng)。維修工作開(kāi)始前,應(yīng)確認(rèn)對(duì)所要維修的儀器足夠熟悉并針對(duì)故障現(xiàn)象做充分的分析和準(zhǔn)備(修理手冊(cè)和我們能提供的可能損壞的零件),要盡量以最少的時(shí)間和次數(shù)解決問(wèn)題以避免不必要麻煩,如遇有不熟悉的情況,更要提前做充分的準(zhǔn)備(仔細(xì)閱讀手冊(cè)和請(qǐng)教其他有經(jīng)驗(yàn)的工程師)。顯微鏡的安裝和維護(hù)保養(yǎng)第129頁(yè),共144頁(yè),2023年,2月20日,星期五儀器維修注意事項(xiàng)在到達(dá)用戶處后,首先要根據(jù)現(xiàn)場(chǎng)情況確認(rèn)故障,故障的判斷和排除一定要遵循先簡(jiǎn)后繁的原則,解決問(wèn)題的思路清晰開(kāi)闊,膽大心細(xì),要善于用自己掌握的理論去分析問(wèn)題和解決問(wèn)題,切忌亂拆亂動(dòng),造成故障擴(kuò)大化,小則影響個(gè)案的解決和不必要的損壞,大則使整個(gè)公司的服務(wù)形象
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