高中生物必修實(shí)驗(yàn)知識(shí)點(diǎn)總結(jié)

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實(shí)驗(yàn)原理：DNA綠色，RNA紅色

分布：真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中，線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA；RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果:細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色.

實(shí)驗(yàn)二物質(zhì)鑒定

還原糖+斐林試劑磚紅色沉淀脂肪+蘇丹III橘黃色

脂肪+蘇丹IV紅色蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑紫色反應(yīng)

1、還原糖的檢測(cè)

（1）材料的選?。哼€原糖含量高，白色或近于白色，如蘋果，梨，白蘿卜。

（2）試劑：斐林試劑（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），現(xiàn)配現(xiàn)用。

（3）步驟：取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL（斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入）→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化（白色→淺藍(lán)色→磚紅色）

★模擬尿糖的檢測(cè)

1、取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

2、檢測(cè)方法：斐林試劑（水浴加熱）或班氏試劑或尿糖試紙

3、結(jié)果：（用斐林試劑檢測(cè)）試管內(nèi)發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析：因?yàn)樘悄虿』颊叩哪蛞褐泻羞€原糖，與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，而正常人尿液中無還原糖，所以沒有發(fā)生反應(yīng)。

2、脂肪的檢測(cè)

（1）材料的選取：含脂肪量越高的組織越好，如花生的子葉。

（2）步驟：制作切片（切片越薄越好）將最薄的花生切片放在載玻片中央

↓

染色（滴蘇丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）

↓

制作裝片（滴1～2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片）

↓

鏡檢鑒定（顯微鏡對(duì)光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒）

3、蛋白質(zhì)的檢測(cè)

（1）試劑：雙縮脲試劑（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液）

（2）步驟：試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻→觀察顏色變化(紫色)

考點(diǎn)提示：

（1）常見還原性糖與非還原性糖有哪些？

葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖；淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。

（2)還原性糖植物組織取材條件？

含糖量較高、顏色為白色或近于白色，如：蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。

（3)研磨中為何要加石英砂？不加石英砂對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響？

加石英砂是為了使研磨更充分。不加石英砂會(huì)使組織樣液中還原性糖減少，使鑒定時(shí)溶液顏色變化不明顯。

（4）斐林試劑甲、乙兩液的使用方法？混合的目的？為何要現(xiàn)混現(xiàn)用？

混合后使用；產(chǎn)生氫氧化銅；氫氧化銅不穩(wěn)定。

（5)還原性糖中加入斐林試劑后，溶液顏色變化的順序?yàn)椋簻\藍(lán)色棕色磚紅色

（6）花生種子切片為何要?。恐挥泻鼙〉那衅?，才能透光，而用于顯微鏡的觀察。

（7）轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時(shí)，若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因

（7）若觀察植物根毛細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng)，則對(duì)顯微鏡的視野亮度應(yīng)如何調(diào)節(jié)？

視野應(yīng)適當(dāng)調(diào)暗一些，可用反光鏡的平面鏡來采光或縮小光圈。

（8）在強(qiáng)光照射下，葉綠體的向光面有何變化？葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。

實(shí)驗(yàn)四觀察有絲分裂

1、材料：洋蔥根尖（蔥，蒜）

2、步驟：（一）洋蔥根尖的培養(yǎng)

（二）裝片的制作

制作流程：解離→漂洗→染色→制片

1.解離:藥液:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸,體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精(1:1混合液).

時(shí)間:3~5min.目的:使組織中的細(xì)胞相互分離開來.

2.漂洗:用清水漂洗約10min.目的:洗去藥液,防止解離過度,并有利于染色.

3.染色:用質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的龍膽紫溶液(或醋酸洋紅液)染色3~5min

目的:使染色體著色,利于觀察.

4.制片:將根尖放在載玻片上,加一滴清水,并用鑷子把根尖弄碎,蓋上蓋玻片,在蓋玻片上再加一片載玻片.然后用拇指輕輕地按壓載玻片.目的:使細(xì)胞分散開來,有利于觀察.

（三）觀察

1、先在低倍鏡下找到根尖分生區(qū)細(xì)胞：細(xì)胞呈正方形，排列緊密,有的細(xì)胞正在分裂。

2、換高倍鏡下觀察：分裂中期→分裂前、后、末期→分裂間期。（注意各時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體形態(tài)和分布的特點(diǎn)）。其中，處于分裂間期的細(xì)胞數(shù)目最多。

考點(diǎn)提示：

（1)培養(yǎng)根尖時(shí)，為何要經(jīng)常換水？增加水中的氧氣，防止根進(jìn)行無氧呼吸造成根的腐爛。

（2）培養(yǎng)根尖時(shí)，應(yīng)選用老洋蔥還是新洋蔥？為什么？應(yīng)選用舊洋蔥，因?yàn)樾卵笫[尚在休眠，不易生根。

（3）為何每條根只能用根尖？取根尖的最佳時(shí)間是何時(shí)？為何？

因?yàn)楦夥稚鷧^(qū)的細(xì)胞能進(jìn)行有絲分裂；上午10時(shí)到下午2時(shí)；因?yàn)榇藭r(shí)細(xì)胞分裂活躍。

（4）解離和壓片的目的分別是什么？壓片時(shí)為何要再加一塊載玻片？解離是為了使細(xì)胞相互分離開來，壓片是為了使細(xì)胞相互分散開來；再加一塊載玻片是為了受力均勻，防止蓋玻片被壓破。

（5）若所觀察的組織細(xì)胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？壓片時(shí)用力過大。

（6)解離過程中鹽酸的作用是什么？丙酮可代替嗎？分解和溶解細(xì)胞間質(zhì)；不能，而硝酸可代替。

（7)為何要漂洗？洗去鹽酸便于染色。

（8)細(xì)胞中染色最深的結(jié)構(gòu)是什么？染色最深的結(jié)構(gòu)是染色質(zhì)或染色體。

（9）若所觀察的細(xì)胞各部分全是紫色，其原因是什么？

染液濃度過大或染色時(shí)間過長(zhǎng)。

（10）為何要找分生區(qū)？分生區(qū)的特點(diǎn)是什么？能用高倍物鏡找分生區(qū)嗎？為什么？

因?yàn)樵诟庵挥蟹稚鷧^(qū)的細(xì)胞能夠進(jìn)行細(xì)胞分裂；分生區(qū)的特點(diǎn)是：細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞處于分裂狀態(tài)；不能用高倍鏡找分生區(qū)，因?yàn)楦弑剁R所觀察的實(shí)際范圍很小，難以發(fā)現(xiàn)分生區(qū)。

（11）分生區(qū)細(xì)胞中，什么時(shí)期的細(xì)胞最多？為什么？間期；因?yàn)樵诩?xì)胞周期中，間期時(shí)間最長(zhǎng)。

（12）所觀察的細(xì)胞能從中期變化到后期嗎？為什么？

不能，因?yàn)樗^察的細(xì)胞都是停留在某一時(shí)期的死細(xì)胞。

（13）觀察洋蔥表皮細(xì)胞能否看到染色體？為什么？不能，因?yàn)檠笫[表皮細(xì)胞一般不分裂。

（14）若觀察時(shí)不能看到染色體，其原因是什么？

沒有找到分生區(qū)細(xì)胞；沒有找到處于分裂期的細(xì)胞；染液過??；染色時(shí)間過短。實(shí)驗(yàn)五比較酶和Fe3+的催化效率

考點(diǎn)提示：

（1）為何要選新鮮的肝臟？因?yàn)樵诓恍迈r的肝臟中，過氧化氫酶的活性會(huì)由于細(xì)菌的破壞而降低。

（2）該實(shí)驗(yàn)中所用試管應(yīng)選較粗的還是較細(xì)的？為什么？應(yīng)選用較粗的，因?yàn)樵谳^細(xì)的試管中容易形成大量的氣泡，而影響衛(wèi)生香的復(fù)燃。

（3）為何要選動(dòng)物的肝臟組織來做實(shí)驗(yàn)，其他動(dòng)植物的組織的研磨液能替代嗎？因?yàn)楦闻K組織中過氧化氫酶含量較豐富；其它動(dòng)植物組織也含有少量的過氧化氫酶，所以能夠替代。

（4）相同質(zhì)量的塊狀肝臟和肝臟研磨液，哪一個(gè)催化效果好？為什么？研磨液效果好；因?yàn)樗黾舆^氧化氫酶與過氧化氫的接觸面積。

（5）滴入肝臟研磨液和氯化鐵溶液時(shí)，可否共用下個(gè)吸管？為什么？不可共用，防止過氧化氫酶與氯化鐵混合，而影響實(shí)驗(yàn)效果。

實(shí)驗(yàn)六色素的提取和分離

1、原理：葉綠體中的色素能溶解在有機(jī)溶劑丙酮或無水乙醇——提取色素

各色素在層析液中的溶解度不同,隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同——分離色素

2、步驟：

（1）提取色素研磨

（2）制備濾紙條

（3）畫濾液細(xì)線：均勻，直，細(xì)，重復(fù)若干次

（4）分離色素：不能讓濾液細(xì)線觸及層析液

（5）觀察和記錄:結(jié)果濾紙條上從上到下依次為:橙黃色(胡蘿卜素)、黃色(葉黃素)、藍(lán)綠色(葉綠素a)、黃綠色(葉綠素b).

考點(diǎn)提示：

（1）對(duì)葉片的要求？為何要去掉葉柄和粗的時(shí)脈？綠色、最好是深綠色。因?yàn)槿~柄和葉脈中所含色素很少。

（2）二氧化硅的作用？不加二氧化硅對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響？

為了使研磨充分。不加二氧化硅，會(huì)使濾液和色素帶的顏色變淺。

（3）丙酮的作用？它可用什么來替代？用水能替代嗎？

溶解色素。它可用酒精等有機(jī)溶劑來代替，但不能用水來代替，因?yàn)樯夭蝗苡谒?/p>

（4）碳酸鈣的作用？不加碳酸鈣對(duì)實(shí)驗(yàn)有何影響？

保護(hù)色素，防止在研磨時(shí)葉綠體中的色素受到破壞。不加碳酸鈣，濾液會(huì)變成黃綠色或褐色。

（5）研磨為何要迅速？要充分？過濾時(shí)為何用布不用濾紙？研磨迅速，是為了防止丙酮大量揮發(fā)；只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中來。色素不能通過濾紙，但能通過尼龍布。

（6）濾紙條為何要剪去兩角？防止兩側(cè)層析液擴(kuò)散過快。

（7）為何不能用鋼筆或圓珠筆畫線？因?yàn)殇摴P水或圓珠筆油中含有其它色素，會(huì)影響色素的分離結(jié)果。

（8）濾液細(xì)線為何要直？為何要重畫幾次？防止色素帶的重疊；增加色素量，使色素帶的顏色更深一些。

（9）濾液細(xì)線為何不能觸到層析液？防止色素溶解到層析液中。

（10）濾紙條上色素為何會(huì)分離？

由于不同的色素在層析液中的溶解度不同，因而它們隨層析液在濾紙條上的擴(kuò)散速度就不同。

（11）色素帶最寬的是什么色素？它在層析液中的溶解度比什么色素大一些？

最寬的色素帶是葉綠素a，它的溶解度比葉綠素b大一些。

（12）濾紙條上相互間距最大的是哪兩種色素？胡蘿卜素和葉黃素。

（13)色素帶最窄的是第幾條色素帶？為何？

第一條色素帶，因?yàn)楹}卜素在葉綠體的四種色素中含量最少。實(shí)驗(yàn)七觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原

1、條件：細(xì)胞內(nèi)外溶液濃度差，活細(xì)胞，大液泡

2、材料：紫色洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞（具紫色大液泡），質(zhì)量濃度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。

3、步驟：制作洋蔥鱗片葉外表皮細(xì)胞臨時(shí)裝片→觀察→蓋玻片一側(cè)滴蔗糖溶液,另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(液泡由大到小,顏色由淺變深,原生質(zhì)層與細(xì)胞壁分離)→蓋玻片一側(cè)滴清水,另一側(cè)用吸水紙吸引→觀察(質(zhì)壁分離復(fù)原)

4、結(jié)論:細(xì)胞外溶液濃度＞細(xì)胞內(nèi)溶液濃度，細(xì)胞失水質(zhì)壁分離

細(xì)胞外溶液濃度＜細(xì)胞內(nèi)溶液濃度，細(xì)胞吸水質(zhì)壁分離復(fù)原

知識(shí)概要：制片觀察加液觀察加水觀察

考點(diǎn)提示：

（1）洋蔥為何要選紫色的？若紫色過淡怎么辦？

紫色的洋蔥有紫色的大液泡，便于觀察液泡的大小變化；縮小光圈，使視野變暗些。

（2）洋蔥表皮應(yīng)撕還是削？為何？表皮應(yīng)撕不能削，因?yàn)橄鞯谋砥ね瘛?/p>

（3）植物細(xì)胞為何會(huì)出現(xiàn)質(zhì)壁分離？動(dòng)物細(xì)胞會(huì)嗎？當(dāng)細(xì)胞失去水分時(shí)，其原生質(zhì)層的伸縮性大于細(xì)胞壁的伸縮性；動(dòng)物細(xì)胞不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁。

（4）質(zhì)壁分離時(shí)，液泡大小和顏色的變化？復(fù)原時(shí)呢？

細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離時(shí)，液泡變小，紫色加深；當(dāng)細(xì)胞質(zhì)壁分離復(fù)原時(shí)，液泡變大，紫色變淺。

（5）若發(fā)生質(zhì)壁分離后的細(xì)胞，不能發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原，其原因是什么？

細(xì)胞已經(jīng)死亡（可能是外界溶液濃度過大，細(xì)胞失水過多或質(zhì)壁分離時(shí)間過長(zhǎng)）

（6）高倍鏡使用前，裝片如何移動(dòng)？

若要把視野中上方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續(xù)向上移動(dòng)。若要把視野中左方的物像移到視野的正中心，則要將裝片繼續(xù)向左方移動(dòng)，因?yàn)轱@微鏡視野中看到的是倒像。

（7）換高倍物鏡后，怎樣使物像清晰？視野明暗度會(huì)怎樣變化？如何調(diào)亮？換高倍物鏡后，應(yīng)調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋使物像變得清晰；視野會(huì)變暗，可調(diào)大光圈或改用反光鏡的凹面鏡來使視野變亮。

（8）所用目鏡、物鏡的長(zhǎng)度與放大倍數(shù)的關(guān)系？目鏡越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越小；物鏡越長(zhǎng)，放大倍數(shù)越大。

（9）物像清晰后，物鏡與載玻片之間的距離和放大倍數(shù)的關(guān)系？

物鏡與載玻片之間的距離越小，放大倍數(shù)越大。

（10)總放大倍數(shù)的計(jì)算方法？放大倍數(shù)具體指面積的放大倍數(shù)還是長(zhǎng)度的放大倍數(shù)？

總放大倍數(shù)等于目鏡放大倍數(shù)與物鏡放大倍數(shù)的乘積；放大倍數(shù)是指細(xì)小物體長(zhǎng)度或?qū)挾鹊姆糯蟊稊?shù)。

（11）放大倍數(shù)與視野中細(xì)胞大小、多少、視野明暗的關(guān)系？

放大倍數(shù)越大，視野中細(xì)胞越大、數(shù)目越少、視野越暗。

（12）更換目鏡，若異物消失，則異物在目鏡上；更換物鏡，若異物消失，則異物在物鏡上、移動(dòng)載玻片，若異物移動(dòng)，則異物在載玻片上。

（13）怎樣利用質(zhì)壁分離現(xiàn)象來測(cè)定植物細(xì)胞液的濃度？①配制一系列濃度從小到大的蔗糖溶液②分別用以上不同濃度的溶液制成某植物細(xì)胞的臨時(shí)裝片③用顯微鏡觀察某植物細(xì)胞是否發(fā)生質(zhì)壁分離。某植物細(xì)胞液的濃度就介于不能引起質(zhì)壁分離的濃度和能引起質(zhì)壁分離的濃度之間。

實(shí)驗(yàn)八DNA的粗提取與鑒定

考點(diǎn)提示：

（1)雞血能用豬血代替嗎？為什么？不能，因?yàn)椴溉閯?dòng)物的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核，不能提取DNA。

（2）雞血中為何要加檸檬酸鈉？為何要棄去雞血細(xì)胞的上清液？

防止血液凝固；因?yàn)樯锨逡菏茄獫{，不含細(xì)胞和DNA。

（3）脹破細(xì)胞的方法？能用生理鹽水嗎？

向血細(xì)胞中加入蒸餾水，使細(xì)胞大量吸水而脹破；不能用生理鹽水，因?yàn)檠?xì)胞在蒸餾水中不能吸收水分。

（4）該實(shí)驗(yàn)中最好應(yīng)用玻璃燒杯還是塑料燒杯？為什么？最好用塑料燒杯，因?yàn)椴Ａ菀孜紻NA。

（5）前后三次過濾時(shí)，所用紗布的層數(shù)分別是多少？為什么