胃癌免疫組化標記物介紹課件

胃癌免疫組化標記物介紹腫瘤生物標志物能解答的問題Isitlikelytodevelopthiscancer？Whattypeofcancerisit？Isthistheoptimaldrugformycancer？What‘stheoptimaldoseformybody？Willthecancerreturn？PrognosticDiagnosticPredictivePharmacodynamicsRecurrence乳腺癌個體化治療中的常見生物標志物檢測1.NEnglJMed.2004Dec30;351(27):2817-26;2.NatMed.2011Mar;17(3):304-12;NatureMedicinePages:304–312Yearpublished:(2011)DOI:NatureMedicinePages:304–312Yearpublished:(2011)DOI:DNARNAProteinHER2ISHBRCA1/BRCAR2Mutations21-geneSignature(OncotypeDx)1ERPgRHER2Ki-67Ahypotheticalsituationispresentedinwhichcancertherapyisadaptedtocountertheemergenceofdrugresistance.2神經內分泌腫瘤神經內分泌瘤(NET)NETG1(類癌)……8240/3NETG2…………8249/3神經內分泌癌(NEC)…………………8246/3大細胞NEC………8013/3小細胞NEC………8041/3混合性腺神經內分泌癌………………8244/3EC細胞，5-羥色胺生成性神經內分泌瘤……………8241/3胃泌素生成性神經內分泌瘤(胃泌素瘤)…………8153/3分類目錄中惡性上皮性腫瘤(癌)項下有如下變動：分為腺癌、腺鱗癌、癌伴淋巴細胞間質(髓樣癌)、肝樣腺癌、鱗狀細胞癌和未分化癌6大亞型。腺癌不再強調分為腸型和彌漫型，僅在其它分型小節(jié)中提及Lauren分型，而把乳頭狀腺癌、管狀腺癌、黏液腺癌、低黏附性癌(包括印戒細胞癌和其它類型)和混合性腺癌列為腺癌下的5個變型。2000年版分類中的印戒細胞癌，新版分類中改為低黏附性癌，即指呈孤立分布或小簇狀分布的低分化癌，包括原來的印戒細胞癌、類似于組織細胞或淋巴細胞的癌、具有嗜酸性細胞質的癌以及具有不規(guī)則奇異性核的癌，上述幾種成分可相互混合，也可幾乎不出現印戒樣細胞，同時又新增了絨癌、癌肉瘤、壁細胞癌、惡性橫紋肌樣腫瘤、黏液表皮樣癌、潘氏細胞癌、內胚竇瘤、胚胎性癌以及嗜酸細胞腺癌等一些罕見的組織學類型內容胃癌診斷相關標記物靶向治療及化療療效預測相關標記物胃癌預后及精細化病理報告相關標記物一.胃癌診斷相關標記物10

1、少見類型胃癌鑒別診斷

及其相關標記物上皮細胞EBER+1.1胃癌伴淋巴樣間質

gastriccarcinomaswithlymphoidstroma，GCLs比例：8%。別名：淋巴上皮瘤樣癌，髓樣癌。>80%與EBV感染有關，男性患者*、近端胃或殘胃多見。其余與MSI有關（遠端胃癌、老年患者多見）。腫瘤細胞示推擠性邊緣，多呈不規(guī)則片狀分布，合胞體狀和多角形細胞伴大量淋巴細胞浸潤，有時可見淋巴濾泡，偶見肉芽腫和破骨樣巨細胞。淋巴細胞以CD8+的T細胞為主，進展期可出現較多B淋巴細胞和漿細胞*。該亞型胃癌預后比普通腺癌較好*，復發(fā)率低，淋巴結轉移率低，5年存活率77%。*JSurgOncol.

2013Apr;107(5):523-8.**PatholInt.

2010Aug;60(8):551-8.建議鑒別診斷標記物：

EBERCKpan，CEA，EMA，CD3,CD4,CD8,CD2018IHC:Heppar-1IHC：AFPIHC：CK19，CDX-2，GPC3，GS1.2肝樣腺癌

hepatoidadenocarcinoma(HAC)

比例：1.3%-15%，中國6.63%（317/4779）*。形態(tài)學：腫瘤由兩種成分（肝樣分化區(qū)＋普通腺癌區(qū)）組成，之間可見移行，肝樣分化區(qū)癌細大、多角形，胞質豐富嗜酸，核大而不規(guī)則，居中，核仁明顯，間質富于血竇，類似HCC肝樣分化區(qū)癌細胞胞質內或胞外可見膽汁或PAS/PAS-D染色陽性嗜伊紅玻璃樣小球目前多數觀點認為，并非所有HAC中的AFP均為陽性，診斷HAC必須見到類似HCC組織學特征的肝樣分化區(qū)。對于那些AFP陽性、組織學無肝樣分化區(qū)的胃癌歸為產生AFP的胃癌主要與HCC鑒別。WorldJSurgOncol.

2013Oct1;11:246.建議鑒別診斷免疫標記物IHC:P63您的診斷？1.3腺鱗癌

Adenosquamouscarcinoma占所有胃癌的比例：0.5%。每種成分要求比例>25%；該類型癌常與深部浸潤、淋巴結轉移和患者較差預后有關。建議免疫標記物：CK5/6（或加做34βE12、P63、P40）和CK8/18，CK7等。IHC:SynIHC：CgAIHC：CD56IHC:Ki-67您的診斷？1.5神經內分泌癌（大或小細胞）

LARGE/SMALLCELLCARCINOMA少見。診斷時常為進展期，預后非常差，常在1年內死亡。形態(tài)學非常類似肺大或小細胞神經內分泌癌。建議免疫標記物：Syn，CgA，CD56，Ki-67，TTF-1，Ckpan，LCA。1.6癌肉瘤

carcinosarcoma少見，預后差。多表現為大息肉樣腫物。比例不一的腺癌樣和肉瘤樣成份，肉瘤樣成份如骨肉瘤、軟骨肉瘤、橫紋肌肉瘤和平滑肌肉瘤等。有時也可見腺鱗癌和神經內分泌腫瘤成份。建議免疫標記物：Ckpan（上皮），CK8/18（上皮），CDX-2（上皮），Vimentin（間葉+），S100（軟骨樣分化），Des（肌源性分化），SMA（平滑肌分化），Myogenin和MyoD1（橫紋肌分化）等。2轉移癌不常見，病變多表現為大潰瘍（39%，類似原發(fā)癌）、黏膜下腫塊（51%）或無癥狀，胃鏡下多為孤立性病變，常累及近端胃和胃體。最常見起始部位肺（CK7+,CK20-,TTF-1+/-,NapsinA+/-）乳腺（GCDFP-15+、MammaglobinMammaglobin+，ER+,PR+,CK7+,DAS-1+,CDX2-,MUC2-,MUC5AC-,MUC6-）轉移性黑色素瘤（CK-,S-100+,HMB45+,MelanA+）二.胃癌治療相關免疫標記物421.靶向治療相關：HER2，c-met,EGFR(HER1)2.化療療效相關：1.1HER2與胃癌

HER2蛋白是一種跨膜酪氨酸激酶受體，屬于EGFR家族尚未發(fā)現與HER2直接結合的配體，HER2通過與其他EGRF受體結合成異二聚體發(fā)揮作用HER2表達與部分重要的臨床病理特征相關腫瘤侵犯深度、受累淋巴結、腸型胃癌和腫瘤分期HER2是靶向治療的預測因素，即HER2陽性的患者才適應靶向治療IHC檢測HER2陽性率為6.8%~34.0%；FISH陽性率為7.1%~42.6%；而顯色原位雜交（CISH）陽性率為12.2%~24.0%各地區(qū)HER2陽性率比較LourdesGomez,etal,2012ASCO,GeneralPosterSession,#4089HER-EAGLEStudyinChina,November2013|Volume8|Issue11|e80290Bangetal;Abstract4556,ASCO2009標本類型與HER2陽性率腫瘤部位與HER2陽性率Lauren分型與HER2陽性率%腸型胃癌的HER2陽性率較彌漫型和混合型高ToGA試驗證實人源化抗人類表皮生長因子受體2(humanepidermalgrowthfactor

receptor-2,HER2)單克隆抗體曲妥珠單抗能夠有效延長HER2陽性胃癌、胃食管連接部腺癌患者的生存期，并將曲妥珠單抗聯合化療作為胃癌、胃食管連接部腺癌的標準化治療方案。因此，

精準的篩選HER2陽性的胃癌患者至關重要。（ToGA試驗是一項國際多中心隨機對照Ⅲ期臨床研究）《比較曲妥珠單抗聯合化療與單純化療在HER2陽性晚期胃癌或胃食管結合部癌患者中的應用（ToGA）：一項Ⅲ期、開放式、隨機對照研究》Lancet2010;367:687-97(影響因子：38.28）ToGA試驗是第一個使晚期胃癌患者生活質量提高，且生存期超過1年的臨床試驗，體現了個體化治療的優(yōu)勢，在胃癌靶向治療中具有里程碑意義何時進行胃癌的HER2檢測？所有的胃或胃食管結合部癌患者初次診斷都應明確腫瘤的HER2狀態(tài)HER2陽性定義：HER2陽性腫瘤是IHC3+或IHC2+/FISH+(HER2:CEP17比≥2)根據腫瘤染色面積與細胞膜染色強度，IHC的評分體系為0-3+分IHC0IHC1+IHC2+IHC3+腫瘤細胞腫瘤細胞正常細胞染色體的著絲粒探針HER2基因通過IHC評估的HER2蛋白通過FISH檢測的HER2基因擴增HercepTest?PI.3rded.HER2蛋白表達和基因擴增不一致5354診斷印戒細胞癌（Lauren分型：彌漫型；WHO2010：poorlycohesivetype,)Her2Status:contradictoryIHCfocal3+(ca.1%)negativeSISHRatio10.5(ca.200Cells)positive原因有以下幾點:(1)組織固定處理、抗體批次不同及觀察者之間的判讀差異(2)胃癌HER2表達的高度異質性（5%-30%），選擇組織切片不同、觀察的腫瘤區(qū)域不同(3)17號染色體多倍體(4)HER2點突變，這種病例少見0FISH/SISH*+–Eligiblefortrastuzumab+1+3IHCPatienttumoursample+2*cutoffforFISH,SISH=HER2:CEP17ratio≥2retest推薦的胃癌HER2檢測流程571.2cMET過表達與胃癌MET：原癌基因，位于7q31編碼一種跨膜酪氨酸激酶受體，與肝細胞生長因子(HGF)具有高親和力MET自磷酸化可激活多個信號轉導級聯，導致癌細胞增殖、血管新生、侵襲和轉移胃癌中MET過表達率：18%-68%METMET陽性腫瘤常伴有漿膜侵犯和其他不利的特征cMET過表達與晚期疾病和預后不良顯著相關PietrantonioF,etal.AnticancerRes2013;33:1257-66.MET擴增與胃癌術后生存不佳相關482例行根治性手術的胃癌患者的組織標本MET擴增*的患者比例：21.2%術后生存不佳與MET擴增相關*拷貝數>4.0LeeJ,etal.OncolRep2011;25:1517-24.OS

040801201600.00.81.0P=.0134時間(月)040801201600.00.81.0P=.0409時間(月)MET基因(-)/c-MET活化(-)MET基因(+)/c-MET活化(+)MET擴增(-)MET擴增(+)50.0%59.1%OS

53.8%75.9%MET擴增和cMET蛋白活化可預測：

胃癌患者生存不佳多變量分析顯示，MET擴增和cMET蛋白活化可預測胃癌患者生存不佳LeeJ,etal.OncolRep2011;25:1517-24.C-met61MET/HGF抑制劑臨床研究進展二.胃癌治療相關免疫標記物631.靶向治療相關：

2.化療療效相關：TS，TP，ERCC1，β-tubulinIII目前胃癌常用化療藥物氟脲嘧啶類：5-FU,capecitabine,S-1紫杉醇類：紫杉醇、多西紫杉醇鉑類：DDP、OXA（oxaliplatin）拓撲異構酶I抑制劑：Irinotecan(CPT-11)蒽環(huán)類：EPI氟脲嘧啶類與TS胸苷酸合成酶(thymidylatesynthase,TS)TS是5-FU發(fā)揮細胞毒作用的主要靶酶,5-FU的代謝產物dUMP與TS結合形成復合物,干擾dUMP與TS結合,由此抑制胸腺嘧啶合成,造成細胞周期阻滯,并誘導細胞凋亡.胸苷酸合成酶（TS）表達與Lauren分型有一定相關性。

IchikawaW等報道TS在腸型胃癌表達高于彌漫型胃癌，而TS高表達與以5-FU為主化療敏感性下降有關，TS低表達患者的5年生存率和對含5-FU化療方案的效果要優(yōu)于TS高表達者.IchikawaWetal.IntJCancer.200667TS鉑類與ERCC1ERCC1（核苷酸切除修復交叉互補基因1）是第一個被發(fā)現的人類DNA損傷修復基因，位于19號染色體長臂，其編碼產物是高度保守的單鏈DNA核酸內切酶，參與DNA鏈的切割和損傷識別。已證實ERCC1參與鉑類化療耐藥發(fā)生，其表達水平與多種腫瘤鉑類化療療效和生存期呈負相關，即表達水平低的患者對鉑類藥物敏感，反之表達水平高的患者表現耐藥。一項2期臨床試驗結果表明免疫組化聯合檢測ERCC1預測鉑類耐藥的準確度達82.5%Hirakawaetal.CancerChemotherPharmacol.201370ERCC1紫杉類與β-微管蛋白III紫杉醇類藥物能促進微管的聚合，抑制微管解聚，使細胞的有絲分裂停止，導致細胞凋亡Panda等對表達不同β微管蛋白亞型的細胞進行研究，發(fā)現β-tubulinIII高表達的細胞，其微管蛋白的動力學活性最高，以至于在紫杉醇作用的情況下，微管蛋白仍有足夠的動力完成細胞的有絲分裂，從而在β-tubulinIII高表達的細胞中表現出對紫杉醇的耐受。Pandaetal.JMedChem.2011Urano等研究表明，β-tubulinIII在36.4%

的胃癌患者中表達陽性，并且β-tubulinIII表達水平與紫杉醇療效及患者預后呈負相關。TP高表達和β-tubulinIII低表達的胃癌患者對卡培他濱聯合紫杉醇療效明顯提高，可以達到80%以上，OS也明顯延長。Uranoetal.IntJOncol.2006LuM,GaoJ,WangXC,ShenL.ChinJCancerRes.201173β-tubulin三.預后相關標記物及其他741.精細化病理報告所需診斷標記物明確浸潤深度或懷疑切端/吻合圈+：CKpan疑有脈管癌栓：CD31和D2-40疑有神經侵犯：S100、CD56、NF等疑有淋巴結微轉移：CKpan注：尤其是當組織學類型為低黏附性癌時。2、預后相關細胞周期調節(jié)相關蛋白：P53/P21/P27細胞增殖：Ki-67，PCNA細胞黏附分子：E-cadherin,CD44其它細胞周期調節(jié)：P