第四章-核酸化學(xué)

姓名______________學(xué)號(hào)________________成績(jī)_____________第四章核酸化學(xué)一、是非判斷題1．DNA是生物遺傳物質(zhì)，RNA則不是。2．基因表達(dá)的最終產(chǎn)物都是蛋白質(zhì)。3．脫氧核糖核苷中的糖環(huán)3’位沒有羥基。4．B-DNA代表細(xì)胞內(nèi)DNA的基本構(gòu)象，在某些情況下，還會(huì)呈現(xiàn)A型、Z型和三股螺旋的局部構(gòu)象。5．用堿水解核酸時(shí)，可以得到2’和3’-核苷酸的混合物。6．DNA的Tm值隨（A+T）/（G+C）比值的增加而減少。7.若雙鏈DNA中的一條鏈堿基順序?yàn)閜CpTpGpApC，則另一條鏈的堿基順序?yàn)閜GpApCpCpTpG。8.若種屬A的DNATm值低于種屬B，則種屬A的DNA比種屬B含有更多的A-T堿基對(duì)。9.原核生物和真核生物的染色體均為DNA與組蛋白的復(fù)合體。10.核酸的紫外吸收與其pH無(wú)關(guān)。11.生物體內(nèi)存在的游離核苷酸多為5’-核苷酸。12.Z型DNA與B型DNA可以互變。13.生物體內(nèi)天然存在的DNA分子多為負(fù)超螺旋。14.mRNA為生物體內(nèi)種類最多、含量最豐富的RNA。15.tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)中的額外環(huán)是tRNA分類的重要指標(biāo)。16.真核生物成熟mRNA的兩端均帶有游離的3’-OH。17.目前為止發(fā)現(xiàn)的修飾核苷酸大多存在于tRNA。18.對(duì)于提純的DNA樣品，測(cè)得OD260/OD280＜1.8，則說(shuō)明樣品中含有RNA。19.兩個(gè)核酸樣品A和B，如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280，則A的純度大于B的純度。20.核苷酸分子中的核糖為吡喃型結(jié)構(gòu)。21.真核生物mRNA均含有polyA結(jié)構(gòu)和帽子結(jié)構(gòu)，原核mRNA則無(wú)。22.RNA分子可以熱變性，并具有增色效應(yīng)。二、選擇題1．含有稀有堿基比例較多的核酸是：（）A．胞核DNA

B．線粒體DNA

C．tRNA

D．mRNA2．決定tRNA攜帶氨基酸特異性的關(guān)鍵部位是：（）A．–XCCA3`末端

B．TψC環(huán)；C．DHU環(huán)

D．額外環(huán)

E．反密碼子環(huán)3．構(gòu)成多核苷酸鏈骨架的關(guān)鍵是：（）A．2′3′-磷酸二酯鍵

B．2′4′-磷酸二酯鍵

C．2′5′-磷酸二酯鍵

D．3′4′-磷酸二酯鍵

E．3′5′-磷酸二酯鍵4．

DNA變性后理化性質(zhì)有下述改變：（）A．對(duì)260nm紫外吸收減少

B．溶液粘度下降C．磷酸二酯鍵斷裂

D．核苷酸斷裂5.關(guān)于RNA分子，下列哪個(gè)為錯(cuò)誤的？（）A、都是單鏈線形分子；B、單鏈回折可形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)；C、在70℃以上時(shí)出現(xiàn)增色效應(yīng)；D、RNA的Tm值較DNA低6.關(guān)于核苷酸的敘述，下列哪個(gè)為錯(cuò)誤的？（）A、細(xì)胞中游離的核苷酸均為5’-核苷酸B、核苷酸中的糖苷鍵均為C-N糖苷鍵C、核苷酸中的糖苷鍵均為β-糖苷鍵D、核苷酸是含堿基的磷酸酯E、堿基與糖環(huán)平面垂直7.對(duì)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的描述，下列哪個(gè)為錯(cuò)誤的？（）A、兩條鏈反向平行旋轉(zhuǎn)B、嘌呤與嘧啶堿基互補(bǔ)配對(duì)C、維持雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要力是氫鍵D、DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)具有多態(tài)性E、堿基堆積形成分子中心的疏水區(qū)8.對(duì)DNA超螺旋的敘述，下列哪個(gè)為錯(cuò)誤的？（）A、在外加張力作用下，雙螺旋DNA形成超螺旋B、雙螺旋DNA處于擰緊狀態(tài)時(shí)形成正超螺旋C、細(xì)胞所有天然存在的DNA超螺旋均是正超螺旋D、超螺旋DNA結(jié)構(gòu)緊密有利于組裝成染色體E、負(fù)超螺旋比正超螺旋容易解鏈9.關(guān)于tRNA的生理功能和結(jié)構(gòu)，下列哪個(gè)為錯(cuò)誤的？（）A、轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸，參與蛋白質(zhì)的合成B、tRNATyr及tRNAPro可以作為RNA反轉(zhuǎn)錄的引物C、氨酰tRNA可調(diào)節(jié)某些氨基酸合成酶的活性D、5’端為pG….或pA….結(jié)構(gòu)E、tRNA三級(jí)結(jié)構(gòu)為倒L型10.關(guān)于核酸變性的描述，下列哪個(gè)為錯(cuò)誤的？（）A、紫外吸收值增加B、分子黏度變小C、共價(jià)鍵斷裂，分子變成無(wú)規(guī)則線團(tuán)D、比旋光減小E、浮力密度升高11.胰核糖核酸酶水解RNA，產(chǎn)物是（）A、3’-嘧啶核苷酸B、5’-嘧啶核苷酸C、3’-嘧啶核苷酸和以3’-嘧啶核苷酸結(jié)尾的寡聚核苷酸D、5’-嘧啶核苷酸和以5’-嘧啶核苷酸結(jié)尾的寡聚核苷酸E、3’-嘧啶核苷酸和5’-嘧啶核苷酸；12.胸腺嘧啶除了作為DNA的主要組分外，還經(jīng)常出現(xiàn)在下列哪種RNA分子中（）A、mRNA；B、tRNA；C、rRNA；D、hnRNA；E、snRNA13.RNA經(jīng)NaOH水解，其產(chǎn)物是（）A、5’-核苷酸B、2’-核苷酸C、3’-核苷酸D、2’-核苷酸和3’-核苷酸的混合物E、2’-核苷酸、3’-核苷酸的混合物和5’-核苷酸；14.對(duì)DNA片段作物理圖譜分析，需要用（）A、核酸外切酶；B、DNAaseI；C、DNA連接酶；D、DNA聚合酶I；E、限制性內(nèi)切酶三、填空題1.20世紀(jì)50年代，Chargaff等人發(fā)現(xiàn)各種生物體DNA堿基組成有的特異性，而沒有的特異性。2.DNA雙螺旋中只存在種不同堿基對(duì)，T總是與配對(duì)，C總是與配對(duì)。3.核酸分子中的糖苷鍵均為型糖苷鍵，糖環(huán)與堿基之間的連鍵為鍵，核苷與核苷之間通過(guò)鍵連接形成多聚體。4.核酸在260nm附近有強(qiáng)吸收，這是由于。5.給動(dòng)物喂食用3H標(biāo)記的，可使DNA帶有放射形，而RNA不帶放射形。6.雙鏈DNA中若含量多，則Tm值高；DNA樣品的均一性愈高，其熔解溫度愈；DNA所處介質(zhì)的離子強(qiáng)度越低，其熔解過(guò)程的的溫度范圍越，熔解溫度越，所以DNA應(yīng)保存在較濃度的鹽溶液中，通常為mol/L的NaCl溶液。7.雙鏈DNA熱變性后，或在pH2以下，或pH12以上時(shí)，其OD260，同樣條件下，單鏈DNA的OD260。8.變性DNA的復(fù)性與許多因素有關(guān)，包括、、、、等。9.雙鏈DNA螺旋距為3.4nm，每匝螺旋的堿基數(shù)為10，這是DNA的結(jié)構(gòu)；RNA分子的雙螺旋區(qū)以及RNA-DNA雜交雙鏈具有與型DNA相似的結(jié)構(gòu)，外型較為；d（CGCGCG）寡聚體的結(jié)構(gòu)時(shí)發(fā)現(xiàn)它為螺旋，稱為形DNA，外形較為。10.常用二苯胺法測(cè)定含量，用苔黑酚法測(cè)含量。11.維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要因素為，其次大量存在于DNA分子中的弱作用力如、和也起一定作用。12.測(cè)定DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的方法主要有Sanger提出的法和GilbertM提出的法。13.DNA測(cè)序的解決得益于兩種新技術(shù)的幫助：和。14.Oligo(dT)-纖維素可以用來(lái)分離純化真核生物的。15.真核生物mRNA帽子結(jié)構(gòu)的簡(jiǎn)寫形式為。16.tRNA分子各部分的功能：氨基酸壁是、DHU環(huán)是、反密碼環(huán)是、TΨC環(huán)是。17.提取RNA的關(guān)鍵步驟是。18.用瓊脂糖凝膠電泳分離超螺旋DNA、線性DNA及開環(huán)DNA，其遷移率速度最大的是，最小。名詞解釋⒈增色效應(yīng)；⒉分子雜交；⒊堿基互補(bǔ)；⒋DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)；⒌限制性內(nèi)切酶；⒍核酸變性和復(fù)性；⒎DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)；⒏DNA組成的Chargaff規(guī)則；⒐DNA超螺旋；⒑Sanger測(cè)序；⒒PCR；問(wèn)答題⒈根據(jù)給定的條件回答相應(yīng)的問(wèn)題：T7噬菌體DNA，其雙螺旋鏈的相對(duì)分子質(zhì)量為2.5×107，計(jì)算DNA鏈的長(zhǎng)度（核苷酸對(duì)的平均相對(duì)分子質(zhì)量為650）；相對(duì)分子質(zhì)量為130×106的病毒DNA分子，每微米的質(zhì)量是多少？編碼92個(gè)核苷酸的tRNA的基因有多少？編碼細(xì)胞色素C（104個(gè)氨基酸）的基因有多長(zhǎng)？（不考慮起始和終止序列）編碼相對(duì)分子質(zhì)量為9.6萬(wàn)的蛋白質(zhì)的mRNA，相對(duì)分子質(zhì)量為多少？λ噬菌體DNA長(zhǎng)17μm，一突變體DNA長(zhǎng)15μm，問(wèn)該突變體缺失了多少堿基對(duì)？⒉核酸的種類和生物功能是什么？⒊試述下列因素如何影響DNA的復(fù)性過(guò)程：⑴陽(yáng)離子存在；⑵低于Tm的溫度；⑶高濃度的DNA鏈。⒋PCR反應(yīng)的原理和內(nèi)容？⒌簡(jiǎn)述Sanger測(cè)序和自動(dòng)測(cè)序的原理？答案一、是非題1.錯(cuò)2.錯(cuò)3.錯(cuò)4.對(duì)5.對(duì)6.對(duì)7.錯(cuò)8.錯(cuò)9.錯(cuò)10.錯(cuò)11.對(duì)12.對(duì)13.對(duì)14.錯(cuò)15.對(duì)16.對(duì)17.錯(cuò)18.錯(cuò)19.錯(cuò)20.錯(cuò)21.錯(cuò)22.對(duì)二、選擇題1.C2.E3.E4.B5.A6.B7.C8.C9.D10.C11.C12.B13.D14.E三、填空題⒈種、組織；⒉2、A、G；⒊β、C-N糖苷、3-5磷酸二酯鍵；⒋堿基環(huán)共軛鍵；⒌T；6.G+C、窄、寬、低、高、1；7.增加、不變；8.樣品均一度、濃度、片段大小、離子強(qiáng)度；9.B、A、粗短、左手、Z、細(xì)長(zhǎng)；10.DNA、RNA；11.堿基堆積力、氫鍵、離子鍵、范德華力；12.酶、化學(xué)；13.高分辨率的聚丙烯酰胺凝膠電泳、限制性內(nèi)切酶；14.mRNA；m7G5ppp5Nm-；16.攜帶氨基酸、識(shí)別氨酰tRNA合成酶、識(shí)別密碼子、核糖體；17.防止RNAase活性；18.超螺旋DNA、開環(huán)DNA四、名詞解釋1．單鏈核苷酸ε(P)值大于雙鏈核苷酸；因此核酸變性時(shí),ε(P)值增高，稱增色效應(yīng)。2．不同來(lái)源的分子，經(jīng)熱變性后，在冷卻復(fù)性過(guò)程中，異源核酸分子間通過(guò)堿基配對(duì)形成雜交分子。3．兩條核苷酸鏈上的堿基分別通過(guò)氫鍵，其中一條鏈上的嘌呤堿必須與另一條鏈上的嘧啶堿配對(duì)，AT形成兩個(gè)氫鍵;GC形成三個(gè)氫鍵。4．A、T、G、C通過(guò)3`，5`-磷酸二酯鍵連接，C1--堿基，C2--脫氧。5．具有嚴(yán)格堿基序列專一性的內(nèi)切酶，能降解外源而對(duì)自身序列無(wú)作用。6．變性：雙螺旋區(qū)氫鍵的斷裂，變成單鍵，不涉及共價(jià)鍵，磷酸二酯鍵斷裂降解。復(fù)性：兩條分開的鏈重新閉合為雙螺旋稱復(fù)性，復(fù)性可部分恢復(fù)理化性質(zhì)。7．兩條反平行多核苷酸鏈繞中心軸纏繞形成的右手螺旋。8．Chargaff等科學(xué)家用紙層析及紫外分光光度技術(shù)分析了各種生物的DNA的堿基組成。結(jié)果顯示：A=T；G=C；A+C=G+T；A+G=C+T，結(jié)果說(shuō)明：A與T；G與C配對(duì)。9．在閉合狀態(tài)下增加或減少螺旋所產(chǎn)生的張力使分子發(fā)生的扭曲稱為超螺旋。10．不是逐個(gè)測(cè)定DNA核苷酸序列，而是把DNA變成一端固定，在不同堿基的核苷酸處打斷的四套末端標(biāo)記的DNA片段。每套DNA片段打斷的位置位于一種特異堿基。11．在適量模板，引物，4種dNTP,TaqDNA聚合酶,Mg2+的存在條件下，經(jīng)過(guò)變性、退火、延伸三步為一循環(huán)的DNA擴(kuò)增過(guò)程。五、問(wèn)答題1．（1）（2.5×107/650）×0.34=13μm(2)650/0.34=1.9×106/μm(3)92×0.34=31.28nm(4)104×3×0.34=106nm(5)(96000/110)×3×320=837818(6)(17-15)×1000/0.34=5880bp2．略3．(1)陽(yáng)離子可以中和DNA中帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)，減弱DNA鏈間的靜電作用，促進(jìn)兩條互補(bǔ)的多核苷酸鏈的相互靠近，從而促進(jìn)DNA的復(fù)性。溫度升高開始DNA變性，因此溫度降低到熔點(diǎn)以下可以促進(jìn)DNA的復(fù)性。DNA鏈的濃度增加可以加快互補(bǔ)鏈隨機(jī)碰撞的速度，從而促進(jìn)DNA的復(fù)性。4．原理變性：通過(guò)加熱使雙鏈DNA變成單鏈DNA退火：溫度突然降低引物與模板鏈局部形成雜交鏈⑶延伸：在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行DNA鏈延伸