臨床輸血與檢驗第二部分

臨床輸血與檢驗張循善2015.3現在是1頁\一共有50頁\編輯于星期三醫(yī)療機構輸血科（血庫）承擔工作和研究領域免疫血液學實驗室血液相容性試驗血型不合新生兒溶血病實驗室診斷輸血不良反應研究成分輸血與自身輸血血液治療血液成分單采和置換術（造血干細胞移植）細胞治療臨床輸血質量管理現在是2頁\一共有50頁\編輯于星期三免疫血液學血液相容性試驗ABO血型鑒定RhD鑒定紅細胞意外抗體篩查和鑒定交叉配血試驗現在是3頁\一共有50頁\編輯于星期三AABBRequirementsforPretransfusionTestingPositiveidentificationofrecipientandrecipientsampleABOgroupandRhtypingofrecipientanddonorblood.Redcellantibodydetectiontestsforclinicallysignificantantibodiesusingrecipientsserumorplasma.Comparisonofcurrentfindingsofrecipientssamplewithrecordofpreviouspatientresults.SelectionofcomponentsofABOgroupandRhtypeappropriatefortherecipient.Performanceofaserologicorcomputercrossmatch.Labelingofproductswiththerecipientsidentifyinginformation.現在是4頁\一共有50頁\編輯于星期三血型鑒定試驗ABO血型鑒定（試管法）原理紅細胞膜上只有B抗原只有A抗原A、B抗原均有A、B抗原均無A型B型AB型O型有A抗體有B抗體無A、B抗體有A、B抗體血清中現在是5頁\一共有50頁\編輯于星期三ABO血型鑒定正定型：被檢者紅細胞與ABO標準血清反定型：被檢者血清或血漿與ABO試劑紅細胞現在是6頁\一共有50頁\編輯于星期三正定型試驗方法（試管法）（1）取試管2支分別標上A、B字樣（2）向A管滴加抗A標準血清1滴，向B管滴加抗B標準血清1滴（3）向A、B管各滴加5％的待檢紅細胞懸液各1滴。（4)搖勻，后以1000rpm離心1min，或按說明書要求操作。（5）將試管輕輕搖動，使沉于管底的紅細胞浮起，以肉眼觀察有無凝集現象?，F在是7頁\一共有50頁\編輯于星期三ABO血型鑒定卡式法現在是8頁\一共有50頁\編輯于星期三反定型試驗方法（試管法）（1）取試管3支分別標上A、B、O字樣（2）向A、B、O三管各滴加待檢血清（漿）1滴（3）向A管滴加A型試劑紅細胞1滴，向B管滴加B型試劑紅細胞1滴,向O管滴加O型試劑紅細胞1滴。（4）搖勻，后以1000rpm離心1min，或按說明書要求操作。（5）將試管輕輕搖動，使沉于管底的紅細胞浮起，以肉眼觀察有無凝集（或溶血）現象?，F在是9頁\一共有50頁\編輯于星期三結果判定正定型現在是10頁\一共有50頁\編輯于星期三結果判定

反定型現在是11頁\一共有50頁\編輯于星期三ABO血型鑒定的臨床意義（1）輸血血型鑒定是實施輸血治療的首要步驟，應該在受血者與供血者血型相同，交叉配血完全相合的情況下才能輸血。正反定型一致，保證輸血安全，例如類B。（2）器官移植受者與供者最好選擇ABO血型相同進行移植，血型不符易引起排斥反應導致移植失?。?）新生兒溶血母子ABO血型不合可引起新生兒溶血病，主要是依據血型血清學檢查來診斷（4）其他ABO血型檢查還可用于親子鑒定，法醫(yī)學鑒定以及某些疾病相關的調查等現在是12頁\一共有50頁\編輯于星期三RhD血型鑒定（試管法）原理

從理論上講人類紅細胞上的Rh抗原主要有C、c、D、d、E、e六種抗原，但目前尚未發(fā)現抗d，因此也未肯定d抗原，故Rh抗原主要有五種。其中RhD抗原性最強，因此，臨床意義最大。一般情況，患者常規(guī)進行RhD血型鑒定?，F在是13頁\一共有50頁\編輯于星期三RhD遺傳現在是14頁\一共有50頁\編輯于星期三RhD血型鑒定（試管法）操作方法1.取試管3支，分別標記檢測管、陽性對照管、陰性對照管2.各管均加入抗D血清1滴3.檢測管加入受檢者紅細胞懸液1滴4.對照管分別加入RhD陽性紅細胞和RhD陰性紅細胞各1滴5.搖勻，以1000rpm離心1分鐘或按說明書操作，取出試管，判定結果現在是15頁\一共有50頁\編輯于星期三結果判定

如陽性對照管凝集，陰性對照管不凝集，受檢管凝集，為RhD陽性；陽性對照管凝集，陰性對照管不凝集，受檢管不凝集，則為RhD陰性現在是16頁\一共有50頁\編輯于星期三

RhD血型鑒定的臨床意義

（1）輸血前檢查為了保證安全輸血，輸血前應做RhD血型鑒定。避免Rh陰性個體誤輸RhD陽性血液，防止發(fā)生同種免疫。（2）新生兒溶血病診斷由于IgG類的RhD抗體易通過胎盤，與相應抗原反應從而破壞胎兒紅細胞，引起嚴重的新生兒溶血病現在是17頁\一共有50頁\編輯于星期三Coomb’sTestUsehemagglutinationtodetect:1)Antibody–coatedRBC’s(“Direct”)2)Anti-RBCantibodyinserum(“Indirect”)現在是18頁\一共有50頁\編輯于星期三Directvs.IndirectCoomb’sTestagglutinationagglutination現在是19頁\一共有50頁\編輯于星期三TwoModesofAutoimmuneRBCDestruction*現在是20頁\一共有50頁\編輯于星期三交叉配血試驗鹽水介質配血法原理ABO、MN、P等血型系統(tǒng)產生的抗體為IgM抗體，可在鹽水介質中與紅細胞表面的相應抗原發(fā)生反應，產生肉眼可見的凝集現象。IgG抗A、抗B的濃度足夠大時，在鹽水介質里中與紅細胞也能發(fā)生凝集現象現在是21頁\一共有50頁\編輯于星期三試驗方法1.取小試管兩支分別標注主、次管2.主側管內加入受血者血清和供血者紅細胞懸液各1滴；次側管內加入供血者血清和受血者紅細胞懸液各1滴3.混勻，1000rpm離心1min4.輕輕搖勻后鏡檢現在是22頁\一共有50頁\編輯于星期三結果判定

主、次管均不凝集且無溶血為配血相合，有凝集或/和溶血為不合?，F在是23頁\一共有50頁\編輯于星期三凝聚胺配血法原理凝聚胺是一種多價陽離子聚合物，在溶液中有多個陽離子基團，能中和紅細胞表面的負電荷，縮短了紅細胞之間的距離，紅細胞之間排斥力的減弱，導致紅細胞非特異性聚凝，這種凝聚是可逆的。當紅細胞與血清在低離子介質中孵育，IgG抗體與紅細胞上相應抗原結合后，在凝聚胺的作用下發(fā)生凝集。凝聚和凝集外觀上是不能區(qū)分的，再加入枸櫞酸鈉重懸液，枸櫞酸根的負電荷與凝聚胺上的正電荷中和，凝聚現象消失，而抗原抗體反應產生的凝集不會消失。現在是24頁\一共有50頁\編輯于星期三試驗方法1.取3支潔凈小試管，分別標記主、次側管及對照管2.主側管：加入受血者血清（漿）2滴，供血者5%紅細胞懸液1滴，再加入低離子介質溶液0.5ml，室溫靜置1min3.次側管：加入供血者血清（漿）2滴，受血者5%紅細胞懸液1滴，再加入低離子介質溶液0.5ml，室溫靜置1min4.各加入2滴凝聚胺試劑，輕輕混勻，室溫靜置15s5.1000rpm，離心1min，取出試管，檢查上清液有無溶血反應，若無溶血反應，將上清液輕輕倒出，使管底保留大約0.1ml液體6.目測紅細胞是否形成凝塊，若無凝塊出現必須重做。有凝塊再輕搖試管，使紅細胞凝塊浮起7.各加入重懸液試劑2滴，并輕輕混勻。8.肉眼觀察無凝集后，必須使用顯微鏡觀察結果現在是25頁\一共有50頁\編輯于星期三結果判定1.若為凝聚胺引起的非免疫性凝聚應在1min內散開，表示兩血相容，可以使用2.若是抗原抗體引起的凝集則不會散開，表示兩血不相容，不宜使用現在是26頁\一共有50頁\編輯于星期三抗人球蛋白配血法試驗原理在適合的溫度、時間等條件下，IgG型血型抗體與紅細胞膜上相應抗原結合，使紅細胞致敏，但不能在鹽水介質中直接凝集帶有相應抗原的紅細胞。由于抗人球蛋白試劑是馬或兔抗人球蛋白抗體，加入此類試劑后，在離心力的作用下，這種抗體（二抗）與致敏在紅細胞膜上的IgG型血型抗體（一抗）發(fā)生抗原抗體結合反應，經抗人球蛋白抗體的“搭橋”作用，使原來已經致敏的紅細胞發(fā)生凝集。因此，為了檢測出此類抗體，需要使用抗人球蛋白介質進行交叉配血試驗?，F在是27頁\一共有50頁\編輯于星期三試驗方法取2支試管，分別標明主側和次側。主側管加入受血者血清2滴和獻血者紅細胞懸液1滴，次側管加入獻血者血清2滴和受血者紅細胞1滴。各試管經輕輕混勻后，置37℃水浴30min，分別取出后用生理鹽水洗滌紅細胞3次，傾去上清液。各試管內加最適稀釋度抗人球蛋白血清1滴，120g/rpm離心1min或1300g/rpm離心15S后，觀察結果?，F在是28頁\一共有50頁\編輯于星期三結果判定主、次管均不凝集且無溶血為配血相合，有凝集或/和溶血為不合。現在是29頁\一共有50頁\編輯于星期三意外抗體篩選的意義和方法意外抗體是指除ABO血型系統(tǒng)抗體以外的其他抗體，如抗－D、抗－E等。主要經輸血或妊娠等免疫刺激產生，人群檢出率為0.3％～2.0％，是引起遲發(fā)性免疫反應的主要原因。臨床有意義抗體：引起新生兒溶血病、溶血性輸血反應，或者使輸入的紅細胞存活期減少的、在37℃反應的同種異型抗體?，F在是30頁\一共有50頁\編輯于星期三試劑紅細胞抗原表達的要求：D,C,E,c,e,M,N,S,s,PI,Le,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb.現在是31頁\一共有50頁\編輯于星期三實驗方法鹽水直接凝集試驗：是最簡單的血型血清學方法，在室溫下立即離心?？蓹z出室溫或低于室溫反應的臨床意義不大的抗體如抗－M、抗－N、抗－P、抗－Lea等?？骨虻鞍自囼灒嚎蓹z出絕大部分臨床有意義的不完全抗體，抗球蛋白試劑要有多特異性抗球蛋白抗體，其中含有抗－IgG和抗－C3d。含抗補體的球蛋白也能夠檢出結合補體的無臨床意義的冷抗體，如抗－I、抗－HI等現在是32頁\一共有50頁\編輯于星期三抗體篩選的意義發(fā)現臨床有意義的抗體減少溶血性輸血反應的發(fā)生有利于免疫溶血性疾病的診斷有利于提前選擇和準備相合的血液確保臨床輸血安全、及時、有效現在是33頁\一共有50頁\編輯于星期三輸血不良反應分類

即發(fā)反應遲發(fā)反應

免疫性反應發(fā)熱反應

溶血反應

過敏反應TA-GVHD

溶血反應

輸血后紫癜

輸血相關的急性肺損傷血細胞或血漿蛋白同種免疫非免疫性反應細菌污染反應

含鐵血黃素沉著癥循環(huán)超負荷血栓性靜脈炎

空氣栓塞

經輸血傳播的傳染病

出血傾向

枸櫞酸中毒

非免疫性溶血反應

電解質紊亂現在是34頁\一共有50頁\編輯于星期三現在是35頁\一共有50頁\編輯于星期三成分輸血意義提高輸血療效減少和預防輸血不良反應和并發(fā)癥有利于血液各種成分的保存節(jié)約血液資源現在是36頁\一共有50頁\編輯于星期三自身輸血定義

自身輸血（亦稱自體輸血）是指采集某一個體的血液或/和血液成分并予以保存，或當其處于出血狀態(tài)收集其所出血液并作相應處理，需要時將其本人的血液或/和血液成分實施自我回輸的一種輸血治療方法。現在是37頁\一共有50頁\編輯于星期三自身輸血分類預存式自身輸血稀釋式自身輸血回收式自身輸血現在是38頁\一共有50頁\編輯于星期三自體輸血的優(yōu)點1.杜絕輸血傳播疾病的危險如：病毒性肝炎、艾滋病、巨細胞病毒等。

2.避免紅細胞、白細胞、血小板以及蛋白質等抗原、抗體產生的同種異體免疫反應。3.節(jié)省政府開支及患者費用，節(jié)約同種血源。解決特殊血型供血。

4.無輸血反應及輸血意外。

5.血液新鮮，細胞活力好，功能強。

6.避免了輸血導致的免疫功能抑制，術后感染大幅減少。

7.大出血搶救成功率高，血液供應及時。

8.解決宗教信仰人員的用血問題?，F在是39頁\一共有50頁\編輯于星期三預存式自身輸血

指在某一個體計劃或可能需要施行輸血治療前，有計劃地采集其全血或/和血液成分并作相應保存，在