制備色譜應(yīng)用-s1課件

人們只有將新的天然產(chǎn)物純化之后才能進(jìn)一步利用譜學(xué)技術(shù)鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，測定其理化性質(zhì)和生物活性，同時提供其作為制藥原料、標(biāo)準(zhǔn)品或供做合成工作的起始原料。從一個粗提物中獲得純的化合物通常需經(jīng)過許多純化步驟，這些步驟煩瑣、耗時。且花費(fèi)較大。有時，所需化合物得率很低或性質(zhì)不穩(wěn)，因而,需要有盡可能多的分離方法以供選擇。盡管有時也可能犯這樣或那樣的錯誤，但今天人們已有可能通過對各種方法進(jìn)行審慎地選擇來設(shè)計一條恰當(dāng)?shù)目焖俜蛛x路線。

第一章樣品的制備與純化

樣品的制備對于復(fù)雜的分離與純化非常重要。恰當(dāng)?shù)臉悠奉A(yù)處理可免去后續(xù)操作過程中的許多麻煩，使分離純化變得更為容易。無論樣品是來源于混有蛋白質(zhì)的生物體、生產(chǎn)中混有殘存催化劑的工業(yè)制品，或混有干擾雜質(zhì)的植物體，通過簡單的預(yù)處理就可以除去其中大部分不需要的物質(zhì)。樣品的預(yù)處理特別適用于需要使用昂貴的制備型高壓液相色譜柱時。盡管制備樣品的目的不盡相同，但其中許多操作與分析型高壓液相色譜中所采用的一樣。當(dāng)處理生物樣品時問題可能更加復(fù)雜，因?yàn)闃悠凡粌H可能含有復(fù)雜的大分子，而且還可能混有前面純化過程中殘留的緩沖液、鹽及洗滌劑。因此，必須在預(yù)處理中去除上述污染物以免污染高壓液相色譜柱。在設(shè)計純化方案時，通常先使用高效與低分辨率的預(yù)處理方法，其中包括一些經(jīng)典的方法，如選擇性溶劑提取、過濾、沉淀、透析、離心及簡單的常壓柱色譜分離等。而一些較新的方法，如超臨界流體萃取、固相萃取等則更具有快速、高效的優(yōu)點(diǎn)。生物分子(尤其是生物聚合體)與常見的次生代謝產(chǎn)物性質(zhì)明顯不同，需要使用特殊的預(yù)處理方法。除常用的離心、沉淀(如用硫酸銨沉淀蛋白質(zhì))、離子交換及凝膠過濾等方法(Wehr，1990)外，可用透析、超濾等專用方法。1．中藥化學(xué)成分概述

成分分類生物堿有機(jī)胺類吡咯類吡啶類莨菪烷類喹啉類異喹啉類菲啶類丫啶酮類吲哚類咪唑類喹唑酮類嘌呤類甾體類帖類大環(huán)類其他類

苷類黃酮苷蒽醌苷皂苷強(qiáng)心苷香豆精苷揮發(fā)油有機(jī)酸蛋白質(zhì)氨基酸樹脂糖類鞣質(zhì)一張圓濾紙可同時點(diǎn)上8～10個樣品。樣品滴好后，將一小條濾紙芯插入濾紙的中心小孔。移到盛有展開溶劑的直徑為12厘米的培養(yǎng)皿中，濾紙芯浸在溶劑中，濾紙上再蓋以同樣直徑的培養(yǎng)皿，以進(jìn)行層析(如圖2所示)。溶劑的前沿達(dá)到濾紙邊緣后，取出濾紙，待溶劑揮發(fā)后，根據(jù)情況，噴上顯色劑。如果要測定不同樣品中同類成分的分布情況，則可在一張圓形濾紙上分別滴加各種中藥(最多可滴加10種)的乙醇提取液，用溶劑展開后噴同一種顯色劑。當(dāng)欲觀察一種樣品中幾種成分的分布情況，則可滴加10個同一種中藥的乙醇提取液，經(jīng)溶劑展開后，將濾紙剪為10份，分別噴以不同顯色劑。三、展開溶劑以甲醇或95％乙醇為展開溶劑?？刹捎弥卣麴s的工業(yè)規(guī)格的溶劑。四、顯色劑優(yōu)點(diǎn)是節(jié)省原料、試劑和時間，還可以防止試管反應(yīng)中由中藥顏色造成的假陽性。二．試管預(yù)試法1．樣品制備（1）酸性乙醇提取液稱取通過20目的中藥粉末10g，加70ml0.5%的鹽酸乙醇溶液，在水浴上回流加熱10min，趁熱濾過，得酸性乙醇提取液。此濾液用以檢查酚性成分、有機(jī)酸和生物堿。（2）水提取液稱取通過20目的中藥粉末10g，加水100ml，在室溫浸泡過夜，濾取10ml濾液，供檢查氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)等。剩余的藥渣及浸液在60℃水浴中加熱10min，立即過濾，此濾液供檢查糖、多糖、皂苷、苷類和鞣質(zhì)等。（3）甲醇提取液稱取通過20目的中藥粉末10g，加入70ml甲醇，在水浴上回流加熱10min，趁熱濾過，濾液供檢查黃酮及其苷類、蒽醌及其苷類、強(qiáng)心苷、香豆精及其苷類、內(nèi)酯、揮發(fā)油、植物甾醇和油脂類等。（試管反應(yīng)因中藥顏色深，容易造成假陽性）中藥化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試法1．單項(xiàng)預(yù)試即直接尋找生物堿、苷、、、。2．系統(tǒng)預(yù)試法常用遞增極性溶劑法

溶劑混溶性表中藥化學(xué)成分提取基本方法2．1提取合理地選擇單一或混合溶劑進(jìn)行提取是保證正確的樣品制備的第一步。首先以低極性溶劑提取可得到親脂性的組分，而用醇類溶劑提取則可得到大量的極性與非極性物質(zhì)。若開始階段采用極性大的溶劑提取，則接著可用溶劑分配方法將提取物分為極性不同的部位。在提取操作的各種方法中，攪拌與機(jī)械振蕩是常用的方法，此外還有滲濾或加壓固液提取等手段。在加壓固液提取法中，將干燥的植物裝在柱中，用泵加壓使提取溶劑通過柱床。Dionex公司生產(chǎn)的適用于該方法的一種提取裝置ASE200(AcceleratedSolventExtraction)，據(jù)稱每次提取只需20min．提取溫度也可調(diào)至高達(dá)200℃，并可選擇三種不同大小的提取器：11，22和33ml。盡管該儀器價格較高，卻代表了提取技術(shù)方面的重要進(jìn)步。在蛋白質(zhì)的純化過程中，提取物的制備是關(guān)鍵的一步，其中有些需要特別注意之處，如有時可能需要加人緩沖溶液、洗滌劑、輔因子或其他一些試劑。（1）溶劑法水＞甲醇＞乙醇＞丙酮＞乙酸乙酯＞乙醚＞氯仿＞苯＞石油醚冷浸煎煮回流滲漉連續(xù)抽提（2）水蒸氣蒸餾法（3）升華法2.2.1官能團(tuán)的極性(2)化合物的極性則由分子中所含官能團(tuán)的種類、數(shù)目及排列方式等綜合因素所決定。以氨基酸來說，分子結(jié)構(gòu)中既有正電基團(tuán)，又有負(fù)電基團(tuán)，故極性很強(qiáng)。高級脂肪酸，如硬脂酸，雖也含有如羧基這樣的強(qiáng)極性基團(tuán)，但因分子的主體乃由長鏈烴基所組成，故極性依然很弱。又如葡萄糖，因分子中含有許多-OH基，故為極性化合物，但鼠李糖(6-去氧糖)及加拿大麻糖(2，6-去氧糖)因分子中—CH20H及—CHOH分別脫去氧變?yōu)椤狢H3及—CH2，故極性即隨之降低。再如，從黃花夾竹桃果仁中曾分出下列七種成分。(表1-4)。2．制備色譜用樣品的制備與純化2.1提取

水層石油醚液用氯仿或乙醚萃取

水層氯仿或乙醚液乙酸乙酯萃取

水層乙酸乙酯液正丁醇萃取

水層正丁醇液中藥粉末用乙醇提取，濾液，回收乙醇，用水混懸，用石油醚萃取[乙醇濃度的影響95%乙醇可提取生物堿、揮發(fā)油、樹脂和葉綠素；60—70%的乙醇可提取苷類成分；40—50%的乙醇可提取強(qiáng)心苷和鞣質(zhì)；20—30%的乙醇可提取蒽醌及其苷類成分；][水對植物細(xì)胞的穿透力最強(qiáng)，因此用有機(jī)溶劑進(jìn)行提取時一般可以先以水浸潤干燥后再提取。]滲漉與加壓固液提取滲漉是不加熱的連續(xù)抽提，缺點(diǎn)是溶劑用量大，回收費(fèi)時，優(yōu)點(diǎn)是不受熱，溶劑可以套用。一般到無色或滲漉液體積相當(dāng)于藥材量的10倍時可停止?jié)B漉。加壓固液提取是將干燥的中藥粉末裝入柱中，用泵加壓使提取溶劑通過柱床，Dionex公司ASE200型提取器，每次提取20min即可，提取溫度也可調(diào)整到200℃其規(guī)格有11、22、33ml的。一般提取分離情況有2種，即已知化學(xué)結(jié)構(gòu)類型的成分和一無所知的成分。對于已知結(jié)構(gòu)類型的成分可借助文獻(xiàn)等設(shè)計分離方法。而對于無任何信息的中藥，關(guān)鍵是先有療效，然后跟蹤分離。先做化學(xué)成分預(yù)試，然后設(shè)計提取分離方法。1．各種試劑對化學(xué)成分的溶解度都不是絕對的，有相互夾帶，需注意；2．有機(jī)溶劑的滲透性差，所以用有機(jī)溶劑提取前可先將中藥用水潤透，干燥后再用有機(jī)溶劑提取，效果會更好；3．中藥水提液如處理不及時，因其中含糖、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)易發(fā)霉，為防止發(fā)霉，可加入少量甲苯、甲醛或氯仿等做防腐劑；4．用水滲漉時，有時室溫較高，在滲漉過程中，中藥會發(fā)酵，為防止發(fā)酵可用氯仿飽和的水進(jìn)行滲漉；提取過程中的幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)及注意2.3溶劑分配溶劑分配主要是根據(jù)待分離物質(zhì)在不相混溶的兩相中分配系數(shù)的不同得以分離。是一種簡便快捷的方法。在得到提取物之后，接著用溶劑分配可除去大量外來雜質(zhì)，特別是在進(jìn)行生物活性跟蹤分離時可快速得到富含所需成分的部分。如用于從植物中尋找抗腫瘤成分，抗HIV的活性成分，生物堿成分，對紫杉醇的初步純化等。在從植物中尋找新的具有抑制HIV活性的化合物時，一以1：1的二氯甲烷與甲醇及甲醇相繼提取植物材料時，對各部位進(jìn)行溶劑分配。具體方法如下：將粗提物首先在己烷與10%水-甲醇之間進(jìn)行分配，極性大的下層調(diào)至含水25%，用四氯化碳進(jìn)行分配，上層加水至含水35%，用氯仿繼續(xù)提??；當(dāng)從水相中蒸除甲醇后，用乙酸乙酯對剩余水相進(jìn)行萃取。在用上述方法對馬來西亞藤黃科植物Calophyllumlanigerum進(jìn)行研究時，植物中具有抗HIV活性的物質(zhì)集中于己烷與四氯化碳提取部位。對這兩個部位進(jìn)行進(jìn)一步分離，得到一系列calanolides香豆素類物質(zhì)。Gustafson等（1992）用類似的溶劑分配法從大戟科薩摩亞植物Homalanthusnutans中分得一個極性相對較大的12-去氧巴豆醇（12-deoxyphorbol）酯類化合物Prostratin，并發(fā)現(xiàn)它可以抑制HIV-1的細(xì)胞殺傷作用。Prostratin2.4濾過濾過是在分離之前的最基本的操作，以除去顆粒雜質(zhì)?？梢杂媒伈?、濾紙、垂溶玻璃漏斗等。此外，也可使溶液通過裝有硅膠或其他填料的短柱進(jìn)行純化，這樣可以除去其中有強(qiáng)吸附力的污染物，這些污染物在進(jìn)行柱色譜分離時可能會產(chǎn)生不良的后果。濾過困難的時候可采用離心的方法，現(xiàn)今還有用絮凝劑或澄清劑的。2.5凝膠過濾在色譜分離前使用象SephadexLH-20一類的分子排阻凝膠色譜也是常用的樣品凈化手段，有利于樣品的進(jìn)一步分離提純。（詳見該章）2.6沉淀可自然沉淀和試劑沉淀，自然沉淀是除去溶液中的顆粒雜質(zhì)或熱溶，冷不溶的雜質(zhì)，也可用生物堿沉淀試劑，也可有醇提水沉或水提醇沉，以除去雜質(zhì)。作為一種初步純化方法，沉淀還經(jīng)常被用于皂苷的研究中。將含有皂苷的提取物，（如經(jīng)過丁醇—水分配之后）的濃縮甲醇液傾入大量的乙醚中，利用濾過或離心的方法收集沉淀的皂苷。反復(fù)利用這種沉淀法可達(dá)到更好的效果。2.7色譜分離的固態(tài)上樣法擬進(jìn)行柱色譜分離（各種柱色譜，干柱、減壓柱、加壓柱等）的樣品在洗脫劑中溶解度不佳時，可采用固態(tài)上樣法。首先將樣品溶在適當(dāng)?shù)娜軇?，然后加?倍量的失活吸附劑，（或硅藻土），將該混合物在30—40℃下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干，然后把所得的粉末撒到色譜柱的上部，樣品上要蓋上一層凈砂或粗硅膠，或玻璃珠，以保護(hù)樣品的平面，保證層析效果。2.8脫除葉綠素一般脫除葉綠素的方法可以是醇提水沉或直接用水提取，而一種新的方法，如果不存在溶解度的問題，將提取物通過裝有十八烷基硅膠的短柱可把所含的葉綠素方便地除去。例如從薔薇科植物Dryasoctopetala

中分離黃酮苷之前先將該植物的乙醇提取物，通過硅膠短柱以除去其中的單寧，然后再經(jīng)過一個C18硅膠柱可以清除其中含有的葉綠素。同樣在利用中壓或高壓液相色譜從菊科植物Bidenscampylotheca（鬼針草屬）中分離具有抗炎活性的聚炔類化合物時，先將植物地上部位的己烷提取物懸浮于甲醇中，使之通過Sep-PakC18硅膠柱，以甲醇洗脫，即可將其中的葉綠素脫除。2.9去除蠟質(zhì)去除蠟質(zhì)的簡便方法是熱水提放冷析蠟，而先用石油醚提取也可先除去葉綠素?；蛑苯佑靡掖继崛?，提取物則不含葉綠素，回收乙醇，再用石油醚提取，以除去油脂和蠟。而用乙腈除去所含的蠟質(zhì)是較合適的方法。如將茄科植物Petuniaintegrifolia

的氯仿提取物（顯示昆蟲拒食活性）懸浮于沸騰的乙腈中攪拌1h，冷卻至5℃后，析出蠟狀的固態(tài)物質(zhì)。在傾出的上清液中約含有原來提取物的50%。再將該溶液流經(jīng)C18柱，以乙腈洗脫，可除去其中的葉綠素及一些低極性脂類物質(zhì)。對具有活性的petuniolides（麥角甾烷類衍生物，如petuniolideC）進(jìn)行半制備HPLC分離而使其得到純化。在對菊科植物黃花蒿Artemisiaannua中具有細(xì)胞毒的黃酮類和萜類物質(zhì)進(jìn)行分離的過程中，也采用了乙腈沉淀的方法。先將該植物的地上部分用己烷提取，提取物溶于20ml氯仿中，加入180ml乙腈后析出蠟質(zhì)，然后，再進(jìn)行色譜分離工作。petuniolideC2.10脫除單寧類物質(zhì)對植物某一部位進(jìn)行生物活性測試前，有時要求先除去單寧類物質(zhì)?？捎靡韵聨追N方法，用明膠/氯化鈉溶液沉淀；用可溶解的聚乙酰吡咯烷酮（PVP）、咖啡因或皮粉處理；或經(jīng)過聚酰胺柱處理。在上述幾種方法中最后一種是最有效的方法，但其選擇性較差，有時也回吸附一些除單寧以外的多酚類化合物，因此也有一定的不足。Tan等曾將該法用于對人體免疫缺陷病毒Ⅰ型逆轉(zhuǎn)錄酶（HIV-1RT）有抑制作用的的植物提取物的篩選，同時對去除單寧的幾種法也進(jìn)行了比較。在上述方法中，去除單寧的機(jī)理是單寧的酚羥基與沉淀試劑中的酰胺官能團(tuán)形成氫鍵，產(chǎn)生了不溶的復(fù)合物沉淀。存在的問題是一些進(jìn)有酚羥基的非單寧類物質(zhì)（如某些黃酮類化合物）也可能被除去。此外，醌類化合物與所用的試劑之間由于會產(chǎn)生共價作用，也可能被除去。如果想要除去所有的酚類化合物，采用乙酸鉛沉淀法是最有效的途徑。用10g 乙酸鉛溶于100ml水的溶液可達(dá)到此目的。聚酰胺法，該單寧去除法是是由Wall等于1969年建立的。當(dāng)需要進(jìn)行生物活性測試的植物提取物量少時，可取3mg該提取物，溶于最少量的水中，然后加到裝有400mg聚酰胺粉的玻璃柱（10cm×0.6cm）上，依次用2ml水、2ml50%甲醇及5ml無水甲醇洗脫，收集所有的流分。甲醇可將含有兩個或3個酚羥基的非單寧類化合物洗脫下來，即可回收大部分黃酮類化合物。固相提取柱的另一制備方法是將1gMachereyNagel聚酰胺SC6（預(yù)先用水溶脹）加入一個裝有玻璃棉塞的12ml注射器做柱用，將3-6mg的提取物溶于少量水中（＜0.5ml）之后，加到柱上，先用2ml水洗脫，然后以甲醇-水（1：1）2ml洗脫，再以甲醇5ml洗脫。聚乙烯吡咯烷酮法（PVP）Loomis和Battaile1966年就對該法做過介紹。用500ml10%（w/v）的PVP溶液足以從2mg植物提取物（溶于0.5ml水）中完全除去單寧。這相當(dāng)于以50mg/ml（5%w/v）這一有效濃度的PVP溶液處理2mg/ml的植物提取物。皮粉法歐洲藥典規(guī)定將0.75g粉碎的植物加入150ml水中，煮沸30min，將溶液濾過，取100ml濾液加入1g皮粉，振搖60min，以除去水相中的單寧。我們通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，取100mg植物或其他提取物置于10ml25%乙醇或水中，加入200mg皮粉攪拌60min。然后可將混合物濾過，蒸發(fā)濾液，可可除去其中的單寧。此外還有醇溶液中調(diào)pH法等（氨水）。2.11固相提取法固相提取預(yù)制柱的工作原理與液-固提取相同，常用下面兩種方式：1）樣品中的干擾性雜質(zhì)被吸附于于柱上，而所需的化合物被洗脫下來；2）需要的化合物被吸附于柱上，而干擾性雜質(zhì)被洗脫下來。后者可起到濃縮化合物的作用，通過更換溶劑將所需的化合物洗脫下來。有很多公司生產(chǎn)裝有正相及反相吸附劑的固相分離柱。固相提取法很適合于自動化操作，尤其適用于對大量樣品進(jìn)行常規(guī)純化。有報道將頭盔目軟體動物Philinopsisspeciosa的提取物首先通過C18BondElut短柱進(jìn)行初步純化，然后利用半制備型高壓液相色譜法分離得到2位十六烷酮基取代的吡啶類化合物。將番茄醬的石油醚提取物通過一裝有硅膠的短柱（BondElut），用石油醚洗脫，除番茄紅素（紅色）外的胡蘿卜素類化合物都被洗脫下來。番茄紅素則可用氯仿洗脫，再進(jìn)一步用半制備型高壓液相色譜分離，得到純品。估計上述硅膠短柱最多可吸附溶于105ml石油醚中的31mg番茄紅素。番茄紅素（紅色）2.12制備型高壓液相色譜的樣品預(yù)處理在高壓液相色譜進(jìn)樣之前，需對樣品進(jìn)行過濾，使用能套在注射器上的濾片可以除去樣品中混有的顆粒狀雜質(zhì)，既方便，又價廉。顆粒狀雜質(zhì)可能損壞高壓液相色譜儀的閥門，阻塞管道或柱子入口端的濾板。濾片可以是不銹鋼或塑料套的，但通常用一次性的聚丙烯外殼的濾片。這種濾片一般有凹陷的入口一細(xì)凸的出口可與注射器相連。過濾膜的材料可以是聚四氟乙烯、乙酸纖維、尼龍、紙或無機(jī)膜。在選用過濾膜時應(yīng)注意使其適合于所用的溶劑，在一點(diǎn)在使用含四氫呋喃的溶劑時尤其重要。過濾膜的孔徑可在0.1-2μm之間—0.45μm孔徑的過濾膜可適用于絕大多數(shù)場合?？捎肕illexHV濾片或類似的孔徑經(jīng)過嚴(yán)格檢測的過濾膜。在使用硅膠為固定相進(jìn)行中壓液相色譜分離時，樣品的預(yù)處理不是很重要，因在分離結(jié)束后固定相及殘留在其上的雜質(zhì)通常被丟棄。然而在使用制備型高壓液相色譜進(jìn)行分離或固定相為反相硅膠時，由于色譜柱很貴，需對樣品進(jìn)行預(yù)處理，以除去減緩流速的雜質(zhì)。樣品的預(yù)處理工作可采取不聯(lián)機(jī)或聯(lián)機(jī)兩種方式進(jìn)行。前者可使用常壓色譜柱分離以及通過粗硅膠或短柱過濾等方法。在色譜柱與進(jìn)樣器之間安裝前置柱可除去顆粒狀雜質(zhì)和/或吸附性強(qiáng)的樣品組分。前置柱通常裝有少量與色譜柱相同的填料，如填充得當(dāng)，對系統(tǒng)的分離效果不會造成很大影響。硅膠預(yù)處理柱可防止含有緩沖鹽或堿的流動相所引起的麻煩，上述物質(zhì)可破壞鍵和相填充料的硅膠骨架，常會在柱的上部形成空隙。預(yù)處理柱安裝在泵與進(jìn)樣器之間，這樣盡管流動相被硅膠所飽和，但在進(jìn)樣途中不會有空隙或氣泡。聯(lián)機(jī)純化方法也可采用柱轉(zhuǎn)換的方式來完成，Okano等(1984)在分離25一羥基維生素r]2時即利用了這種方法。如圖2．2所示，與進(jìn)樣器相連的前置柱被用來吸附25一羥基維生素砬，而低極性的組分被洗脫下來。然后將六通閥轉(zhuǎn)到圖示的虛線位置，增加溶劑的極性，待純化的樣品被洗脫進(jìn)入循環(huán)高壓液相色譜系統(tǒng)。該方法與Sep-Pak短柱具有相同的純化功能。當(dāng)將較大體積的樣品溶液直接加到HPLC柱上時，該方法還可起濃縮的作用，因而十分有用。2.2超臨界流體提?。⊿FE）該方法尤其適用于對熱及化學(xué)不穩(wěn)定的化合物的提取，并主要用于從混合物中提取低極性成分。如原本用水蒸氣蒸餾或索氏提取的可用SFE法有效替代。這種方法提取速度快，并可通過調(diào)節(jié)壓力，提高溶劑的溶出能力。選擇適當(dāng)?shù)臏囟扰c壓力能提高提取的選擇性能，并獲得更干凈的提取物，收得率也高于常規(guī)的液-液及液-固提取。超臨界流體提取不必使用大量的有機(jī)溶劑，因而具有顯著的安全性。另外，它對環(huán)境的污染也很小，特別是它減少了含鹵素溶劑的使用。許多超臨界流體具有質(zhì)量傳遞性能（與液-液及液-固提取相比，具有低黏度和高擴(kuò)散率，適合于對植物組織的提?。?，在室溫時呈氣態(tài)，相對惰性、無毒且價格低廉，如二氧化碳、氧化氮和氨氣等。也可通過加入甲醇、乙醇、丙醇、二氯甲烷及水等溶劑以改善其提取性能。利用SFE法而獲得的天然產(chǎn)物種類正迅速增多，不僅有植物樣品，還有微生物樣品。其中，一些較成熟的應(yīng)用實(shí)例包括蛇麻草提取物的制備，從煙草中提取尼古丁，從咖啡中提取咖啡因等。以SFE方法進(jìn)行香料、調(diào)味品及精油的提取更具有重要的經(jīng)濟(jì)價值。利用超臨界流體二氧化碳從植物星狀回芹（staranise）中提取茴香腦（純度＞90%）比用傳統(tǒng)的溶劑提取法更有效，后者不僅工藝煩瑣、費(fèi)時，而且成本更高。在從石蒜科植物中提取生物堿的過程中，有人研究了幾個可提高收率的因素。在滲漉之后，采用超臨界氧化氮提取方法，獲得了很好的效果用超臨界流體二氧化碳從腰果殼中提取酚性漆樹酸（anacardicacid），5-十五碳二烯間苯二酚（cardal）和腰果酚（cardanol）衍生物時，所得產(chǎn)物比用戊烷提取所得的產(chǎn)物質(zhì)量更好。用超臨界流體二氧化碳從木蘭科植物荷花玉蘭（Magnolia