同型半胱氨酸的檢測(cè)及臨床應(yīng)用

同型半胱氨酸的檢測(cè)及臨床應(yīng)用2023/4/41第1頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三前言同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）是一種人體內(nèi)的含硫氨基酸，為蛋氨酸和半胱氨酸代謝過(guò)程中的重要中間產(chǎn)物。新熱點(diǎn):許多學(xué)者認(rèn)為血液Hcy升高已成為動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因子，也成為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)研究的新熱點(diǎn)。新理念:伴有血漿Hcy升高(>10umol/L)的原發(fā)性高血壓定義為H型高血壓。2023/4/422第2頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

同型半胱氨酸（Hcy）能夠讓四分之三的高血壓患者腦卒中死亡風(fēng)險(xiǎn)增加12倍。2023/4/43

3第3頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三一、Hcy的存在形式有研究發(fā)現(xiàn)在正常人和高Hcy血癥患者血漿中，Hcy大部分（70％）是與蛋白質(zhì)結(jié)合，血漿中與Hcy結(jié)合的是白蛋白。Hcy在血液中的存在方式:部分以同型半胱氨酸-半胱氨酸二硫化物存在，微量以還原型同型半胱氨酸存在，大部分通過(guò)二硫鍵與白蛋白結(jié)合而存在。2023/4/444第4頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三二、影響血液Hcy水平的因素1、遺傳因素：

①C667T點(diǎn)突變可引起Hcy升高。②CBS基因多態(tài)性。③蛋氨酸合成酶基因多態(tài)性。2023/4/455第5頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2、性別與年齡：國(guó)內(nèi)外不少研究發(fā)現(xiàn)，Hcy隨年齡增長(zhǎng)而升高，而且男性>女性。女性在絕經(jīng)前的水平較低，絕經(jīng)后顯著升高，認(rèn)為其機(jī)制可能與雌激素水平的變化有關(guān)。

2023/4/466第6頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三3、營(yíng)養(yǎng)因素：

①VitB6、VitB12、葉酸是Hcy代謝輔酶，它們的水平與Hcy水平呈負(fù)相關(guān)，攝入不足時(shí)，上述三個(gè)酶活性下降，則Hcy升高。②飲酒：長(zhǎng)期飲酒可引起肝細(xì)胞蛋氨酸合成酶活性下降，從而造成Hcy血癥。③飲食中蛋氨酸含量過(guò)高：有報(bào)道認(rèn)為高動(dòng)物蛋白、低植物蛋白飲食可能是Hcy血癥的危險(xiǎn)因素之一。2023/4/477第7頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三三、同型半胱氨酸致病機(jī)理1、內(nèi)皮毒性作用：

Hcy可引起內(nèi)皮細(xì)胞損傷，尤其合并高血壓時(shí)更易受損，并且破壞血管壁彈力層和膠原纖維。2、刺激血管平滑肌細(xì)胞增生：

Hcy可直接誘導(dǎo)血管平滑肌細(xì)胞增殖。2023/4/488第8頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三3、致血栓作用：

Hcy可促進(jìn)血栓調(diào)節(jié)因子的表達(dá)，激活蛋白C和凝血因子Ⅻ、Ⅴ，血小板內(nèi)前列腺素合成增加，從而促進(jìn)血小板粘附和聚集。2023/4/499第9頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2023/4/410

Hcy通過(guò)多種途徑損傷血管，它損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞同時(shí)刺激血管平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)，二者導(dǎo)致的損傷阻塞血流通路；Hcy還破壞正常凝血機(jī)制；增加血栓形成引起心臟病發(fā)作及中風(fēng)。10第10頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三4、脂肪、糖、蛋白代謝紊亂：

Hcy可促進(jìn)脂質(zhì)沉積于動(dòng)脈壁，泡沫細(xì)胞增加，還可改變動(dòng)脈壁糖蛋白分子纖維化結(jié)構(gòu)，促進(jìn)斑塊鈣化。2023/4/41111第11頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三5、干擾谷胱甘肽的合成：谷胱甘肽是一種重要的高氧化劑，它能防止很多細(xì)胞成分的氧化互相作用，對(duì)血管產(chǎn)生保護(hù)作用。Hcy干擾谷胱甘肽的合成，從而對(duì)機(jī)體造成危害。2023/4/41212第12頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三6、影響體內(nèi)的轉(zhuǎn)甲基化反應(yīng)：

Hcy濃度的升高會(huì)影響體內(nèi)許多物質(zhì)的甲基化過(guò)程，如核酸（DNA和RNA）、蛋白質(zhì)、髓磷脂、多糖、膽堿和兒茶酚胺類的甲基化；甲基化能力的降低影響細(xì)胞的發(fā)育及分化，這可能是Hcy致病的關(guān)鍵因素。

2023/4/41313第13頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三四、Hcy的測(cè)定方法

同位素法：該方法靈敏度高，特異性強(qiáng)，但操作繁瑣且有放射污染，未能推廣使用。色譜法：靈敏度、特異性好，但儀器價(jià)格昂貴而不能推廣。熒光偏振免疫測(cè)定：此法需要專門的熒光偏光免疫檢測(cè)儀。2023/4/41414第14頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三ELISA：對(duì)儀器要求不高，易普及，但結(jié)果準(zhǔn)確性相對(duì)較差。放射免疫法：結(jié)果準(zhǔn)確，但有放射性污染，很少使用。循環(huán)酶法：快速、簡(jiǎn)便、靈敏度高。可上全自動(dòng)生化分析儀，適用大批標(biāo)本，臨床應(yīng)用廣泛。2023/4/41515第15頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三Hcy循環(huán)酶法實(shí)驗(yàn)參數(shù)的設(shè)計(jì)

實(shí)驗(yàn)參數(shù)根據(jù)分析儀的不同有所差異，可要求試劑供應(yīng)商提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)參數(shù)。下面列舉OLYMPUS系列的實(shí)驗(yàn)參數(shù)：

SampleVolume（樣品體積）：9ulR1Volume（試劑1體積）：167ulR2Volume（試劑2體積）：45ulMeasureWave1（主波長(zhǎng)）：340nmMeasureWave2（副波長(zhǎng)）：700nm2023/4/41616第16頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三METHOD（反應(yīng)類型）：ENDMethodPoint（反應(yīng)點(diǎn)）：20~27ReagentODLimit（吸光度范圍）：-2.0~2.5DynamicRange(反應(yīng)范圍)：3~50CalibrationType（定標(biāo)數(shù)）：1點(diǎn)Unit（單位）：umol/L2023/4/41717第17頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三五、同型半胱氨酸的臨床應(yīng)用2023/4/41818第18頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三1、心血管病防治（1）HCY升高與動(dòng)脈粥樣硬化(AS)的關(guān)系：

1969年就曾有人從尸檢中發(fā)現(xiàn)2例血漿Hcy濃度超過(guò)正常人幾十倍的病兒存在廣泛的動(dòng)脈粥樣硬化和動(dòng)脈血栓。臨床上發(fā)現(xiàn)高胱氨酸尿癥病人早年多因全身動(dòng)脈粥樣硬化和血栓形成死于腦梗塞和心肌梗塞，這與血中Hcy升高有關(guān)。2023/4/41919第19頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

有學(xué)者在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中觀察到注射Hcy后引起高Hcy血癥，2—3個(gè)月后發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化。認(rèn)為高Hcy血癥是發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。2023/4/42020第20頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三（3）Hcy水平與心血管疾病的危險(xiǎn)性

通過(guò)血管內(nèi)超聲觀察AS斑塊情況，觀察到血漿HCY濃度<8umol/L時(shí)，斑塊較?。?.17-0.76mm）,>8umol/L時(shí)，斑塊明顯增大（0.27-1.04，p<0.001）,表明與冠狀動(dòng)脈病變程度呈正相關(guān)。2023/4/421*

MayerEL,RobinsonK,JacobsenDW.etal.Lowplasmhomocyseinelevelspredicreducedatheromaburdeninpatientundergoingcoronaryintervention:Evideencefromintravascularultrsund.JAmCollCardiol,1995,25(specialissum):81A.24第21頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2023/4/422冠動(dòng)脈病變與血漿HCY濃度的關(guān)系冠動(dòng)脈造影例數(shù)年齡血漿HcyP值正常2050.1±2.610.6±0.45<0.02單支病變3045.1±1.615.5±1.830.16雙支病變3555.7±1.617.8±2.05<0.053支病變4055.0±1.419.5±1.970.006惠汝太教授等的研究結(jié)果顯示：冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)隨著血漿Hcy濃度增高而增加。

25第22頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三有研究表明：輕度、中度Hcy水平升高可使心血管疾病死亡危險(xiǎn)性增加4~6倍，血漿總Hcy水平每升高5μmol/L則CHD危險(xiǎn)性男性增加60%，女性增加80%。2023/4/423*ArnesenE,RefsumH,BonaaKH,etal.Serumtotalhomocysteineandcoronaryheartdisease［J］.IntJEpidemiol,1995,24(4):704-709.26第23頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

美國(guó)專家在Framingham心臟病研究項(xiàng)目中發(fā)現(xiàn)，Hcy與心力衰竭的相關(guān)性更為密切，對(duì)尚未出現(xiàn)心臟病癥狀者來(lái)說(shuō)，Hcy升高者患心力衰竭的危險(xiǎn)可加倍，婦女的危險(xiǎn)可增加3倍。2023/4/42427第24頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2、HCY與神經(jīng)系統(tǒng)疾病

腦血管病是目前嚴(yán)重危害人類健康的主要疾病，近年來(lái)隨著分子生物學(xué)的深入發(fā)展，Hcy在腦卒中的作用日益受到重視，普遍認(rèn)為血漿Hcy>15umol／L為高Hcy血癥，普通人群血漿Hey水平升高者只有不到5％，而在腦卒中患者中可達(dá)30~40％。2023/4/42528第25頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三

美國(guó)研究表明：

Hcy的升高是與中風(fēng)有重要關(guān)聯(lián)的危險(xiǎn)因子。美國(guó)最新的數(shù)據(jù)顯示中年后期男性中風(fēng)發(fā)病率，處于55-64這個(gè)年齡段的男性相對(duì)于45-54年齡段的男性而言，前者患中風(fēng)的幾率是后者的三倍。《中風(fēng)和腦血管疾病》雜志2008；17；165-168“美國(guó)中年后期的男性發(fā)生中風(fēng)的相關(guān)因子急劇增加”2023/4/42629第26頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三2023/4/427腦中風(fēng)與血漿Hcy濃度的關(guān)系

例

數(shù)血漿Hcy

P

值

危險(xiǎn)對(duì)照183212.8//中風(fēng)182314.7

<0.001↑1.87

惠汝太教授等的研究結(jié)果顯示:隨著Hcy濃度增高，腦中風(fēng)危險(xiǎn)度增加1.87倍。30第27頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三高HCY是造成老年癡呆癥與帕金森的重要因素：弗明漢醫(yī)學(xué)研究中心對(duì)1092例（>76歲）追蹤調(diào)查8年Hcy值，結(jié)果：Hcy超出14μmol/L，患老年性癡呆的危險(xiǎn)性增加1.8倍，患多異古怪癡呆發(fā)生率增加1.6倍。英國(guó)OPTIMA項(xiàng)目研究發(fā)現(xiàn)：Hcy水平大于11.2μmol/L的病人，三年后隨訪，發(fā)現(xiàn)他們大腦顳葉（包括海馬）快速萎縮。2023/4/42831第28頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三3、糖尿病及并發(fā)癥防治國(guó)內(nèi)外大量研究結(jié)果顯示，血漿Hcy水平可作為2-型糖尿病患者患大血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。監(jiān)測(cè)糖尿病患者Hcy水平有利于對(duì)其預(yù)后的評(píng)估。Hcy升高在糖尿病伴腎臟、視網(wǎng)膜及血管并發(fā)癥的患者更為嚴(yán)重高Hcy血癥也能促進(jìn)糖尿病微血管并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展。2023/4/42932第29頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三4、CRF并發(fā)癥防治慢性腎功能衰竭（CRF）患者普遍有高Hcy血癥，其發(fā)生率是正常人33倍。尿毒癥時(shí)一方面肝臟蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶活性升高，導(dǎo)致S-腺苷蛋氨酸水平升高；另一方面腎功能下降使Hcy代謝的必需產(chǎn)物——絲氨酸合成減少，導(dǎo)致Hcy代謝受抑制引起Hcy的堆積。2023/4/43033第30頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三5、肺血栓栓塞癥防治研究表明，高Hcy血癥（>20μmol/L）使得深靜脈血栓的危險(xiǎn)性明顯增大，高Hcy血癥可使深靜脈血栓發(fā)生率增加4倍。高Hcy是我國(guó)漢族人群肺血栓栓塞癥（PTE）發(fā)病的一個(gè)獨(dú)立的危險(xiǎn)因子，降低Hcy可降低國(guó)人靜脈血栓栓塞癥（VTE）的危險(xiǎn)。2023/4/43134第31頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三6、預(yù)測(cè)骨折風(fēng)險(xiǎn)美國(guó)和荷蘭的流行病學(xué)研究結(jié)果顯示：高Hcy的人容易骨折，高Hcy組與低Hcy組相比，男性的骨折風(fēng)險(xiǎn)為后者的4倍，女性為1.9倍。研究還顯示：老年人骨折中19%是由高Hcy引起的。Hcy阻礙骨膠原纖維狀蛋白質(zhì)形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的作用可能就是高Hcy者容易骨折的原因。2023/4/43235第32頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三7、診斷與監(jiān)測(cè)肝損傷研究結(jié)果顯示：血漿Hcy濃度在急性肝病和慢性肝病患者間差異有顯著性；血漿Hcy濃度對(duì)于慢性肝損傷的敏感性為91%，特異性為89%。以病理組織切片對(duì)照敏感性為94%，特異性為89%。血漿Hcy濃度檢測(cè)還可應(yīng)用于對(duì)普通人群慢性肝病的篩選。2023/4/43336第33頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三8、優(yōu)生優(yōu)育與母嬰健康流行病學(xué)研究報(bào)導(dǎo)：血中Hcy值高的婦女容易產(chǎn)生妊娠并發(fā)癥

(32%)；早產(chǎn)(38%)；新生兒體重減低

(>99%)。孕婦檢測(cè)Hcy對(duì)防治妊娠并發(fā)癥與優(yōu)生優(yōu)育（預(yù)防早產(chǎn)、流產(chǎn)、新生兒體重減低、胎兒神經(jīng)管畸型等）具有重要意義。2023/4/43437第34頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三9、腫瘤防治有研究發(fā)現(xiàn)：未服抗葉酸藥物的乳腺癌、卵巢癌和胰腺癌中有許多患者的血清Hcy升高。Ueland和Refsum在白血病患者的研究認(rèn)為Hcy升高是因腫瘤細(xì)胞的快速增殖所致。許多惡性腫瘤細(xì)胞有對(duì)蛋氨酸的依賴性，蛋氨酸的依賴或高Hcy血癥可能是惡性腫瘤一種表型的表達(dá)。2023/4/43538第35頁(yè)，共39頁(yè)，2023年，2月20日，星期三LilyL等在一組未用藥的腫瘤患者中將Hcy濃度與主要的腫瘤標(biāo)志