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文檔簡介
超高壓液相色譜基本內(nèi)容概述
原理特點
應(yīng)用
4223145
不足原理UPLC保持了傳統(tǒng)HPLC的基本原理,但其分離效能和分析速度卻得到了全面提升,這歸功于其獨特的小顆粒色譜填料技術(shù)。在HPLC的速率理論中,VanDeemter方程可簡化為:
H=A+B/v+Cv(1)其中:
H—理論塔板高度v—流動相的平均線速A、B、C均為常數(shù),其中:A—渦流擴散項系數(shù)B—分子擴散項系數(shù)C—傳質(zhì)阻力項系數(shù)各項均與固定相粒度(dp)相關(guān)如僅考慮dp對H的影響,(1)式可表示為:H=a(dp)+b/v+c(dp)2v(2)特點與其他液相色譜相比較,UPLC具有以下幾個特點:1、填料粒徑小,壓力大
UPLC
HPLC
粒徑<2um5~10um
壓力>100MPa30~60MPa2、檢測靈敏度高,重現(xiàn)性好。如采用UPLC/MS/MS分析大鼠血漿中的混合藥物時靈敏度提高了5~10倍。3、快速、高效、高分辨的色譜模式4、進樣系統(tǒng)一般常采用靜態(tài)切割、壓力平衡(采用一強一弱的雙溶劑進樣)和自動進樣三種方式;5、輸液系統(tǒng)具有耐壓性能、各部分之間要有良好的密封;6、檢測系統(tǒng)使用高頻檢測器(短時間內(nèi)出現(xiàn)的許多色譜峰需要更快的數(shù)據(jù)采集速率相適應(yīng);需要降低樣品在檢測池內(nèi)的駐留時間)。應(yīng)用超高壓液相色譜(UPLC)是一種新型的色譜分析技術(shù),可以單獨使用,也可以和其他色譜如質(zhì)譜聯(lián)用(UPLC/MS)。主要應(yīng)用有:
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