臨床感染性疾病實(shí)驗(yàn)診斷課件

臨床感染性疾病的實(shí)驗(yàn)診斷要求

邢志廣

臨床感染性疾病實(shí)驗(yàn)診斷的要求臨床細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室的任務(wù)：是從臨床感染標(biāo)本中分離出病原菌并進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定，同時(shí)指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物，為臨床感染性疾病的診斷、治療、預(yù)后和流行病學(xué)調(diào)查以及醫(yī)院內(nèi)感染的監(jiān)控提供可靠的依據(jù)

一診斷對(duì)象和診斷目的病原菌的臨床變遷：感染性疾病病原菌的種類不斷發(fā)生變遷，過(guò)去威脅人類的傳染病如鼠疫、霍亂、白喉等己明顯減少，相反，由條件致病菌引起的內(nèi)源性感染卻明顯增多。新的病原菌不斷出現(xiàn)，原有的病原菌因變異、耐藥等又重新流行。目前，醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室遇到的主要是條件致病菌，它們?cè)跈C(jī)體抵抗力下降，菌群失調(diào)或天然屏障防御功能被破壞時(shí)引起感染。診斷對(duì)象和診斷目的臨床分離病原菌的鑒定水平

一種細(xì)菌鑒定到哪一水平，取決于診斷的目的1.以疾病的病原學(xué)診斷為目的一般情況下只需鑒定到細(xì)菌的種2.為提供治療方案為目的1）可以進(jìn)行臨床標(biāo)本的直接藥物敏感試驗(yàn)2）還可根據(jù)分離出病原菌種類直接提供選擇抗生素范圍和種類3）不少細(xì)菌對(duì)某種藥物有天然耐藥性.由于細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生及變遷,臨床上對(duì)分離的病原菌都要作進(jìn)一步的藥敏試驗(yàn),以期提供更可靠的治療方案.3.以作流行病學(xué)研究為目的必須對(duì)病原菌鑒定到型(血清型或基因型)的水平.只有這樣才能明確傳染源的所在.4.了解細(xì)菌與感染的關(guān)系為目的一種類型的感染可以由不同種細(xì)菌引起,一種細(xì)菌也可以引起多種類型的感染.現(xiàn)己知以前那些曾經(jīng)被認(rèn)為不致病的細(xì)菌在某些情況下會(huì)引起人體的感染.要了解這些細(xì)菌的致病菌性,必須進(jìn)行細(xì)致的鑒定.

二診斷試驗(yàn)選擇鑒定一個(gè)細(xì)菌,盡可能用一個(gè)菌落做全部鑒定試驗(yàn).如果一個(gè)菌落不夠應(yīng)考慮采用純培養(yǎng),即挑取單個(gè)菌落接種于斜面培養(yǎng)基,經(jīng)過(guò)培養(yǎng)即可獲得大量純培養(yǎng)物.對(duì)一株細(xì)菌準(zhǔn)確鑒定應(yīng)綜合多種特性進(jìn)行分析.但臨床實(shí)驗(yàn)室每天要處理大量標(biāo)本,且由于經(jīng)濟(jì)原因不可能做很多試驗(yàn),進(jìn)行全面分析鑒定,因而需要選擇一些合理的試驗(yàn)項(xiàng)目用于常規(guī)檢測(cè).挑選試驗(yàn)應(yīng)以既能完成病原學(xué)鑒定又使試驗(yàn)項(xiàng)目盡可能少而快速為原則.二診斷試驗(yàn)選擇1.選擇有鑒定價(jià)值的試驗(yàn)要對(duì)兩種細(xì)菌進(jìn)行鑒別,須選擇一項(xiàng)兩種菌呈現(xiàn)絕然不同結(jié)果的試驗(yàn),即一種菌呈現(xiàn)陽(yáng)性(陽(yáng)性反應(yīng)菌株陽(yáng)性率須大于90%),另一菌為陰性(陰性反應(yīng)的菌株陽(yáng)性率應(yīng)小于10%),這項(xiàng)試驗(yàn)才有鑒定價(jià)值.否則,就沒(méi)有鑒定價(jià)值.2.選擇簡(jiǎn)易、快速、方便的試驗(yàn)(1)鑒定一種細(xì)菌可能有多種特異的方法,沒(méi)必要逐一進(jìn)行試驗(yàn),只選其中一或兩種達(dá)到目的即可,多選無(wú)意義.(2)選擇操作簡(jiǎn)便,快速的方法.(3)選用復(fù)合培養(yǎng)基,一次操作可同時(shí)看幾個(gè)生化反應(yīng).如此可簡(jiǎn)化操作,節(jié)約人力物力.3.綜合考慮試驗(yàn)的敏感性和特異性敏感性=所有陽(yáng)性結(jié)果數(shù)/所有感染病人數(shù),試驗(yàn)敏感性越高,假陰性結(jié)果就越少.特異性=陰性結(jié)果總數(shù)/未感染病人總數(shù),特異性越高,假陽(yáng)性結(jié)果越少.試驗(yàn)一敏感性和特異性是相互聯(lián)系的,試驗(yàn)的敏感性增加,會(huì)使特異性下降,反之亦然.三常用診斷流程1雙歧索引細(xì)菌的鑒定中經(jīng)常選用的方法.主要針對(duì)那些相互區(qū)別比較容易,有較特殊特征的細(xì)菌.雙歧索引是表明鑒定思路的一種流程,使用起來(lái)非常方便.如革蘭陰性桿菌初步分群的鑒定流程.革蘭陰性桿菌+葡萄糖發(fā)酵－氧化酶非發(fā)酵菌+－

弧菌科腸桿菌科三常用診斷流程

革蘭陽(yáng)性球菌雙岐索引鑒定三常用診斷流程

微球菌科雙岐索引鑒定三常用診斷流程

鏈球菌屬的雙岐索引鑒定三常用診斷流程奈瑟氏菌屬、布蘭漢菌屬的雙岐索引鑒定

革蘭氏陰性球菌氧化酶+DNA酶+-布蘭漢氏菌屬營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)+-其他奈瑟氏菌麥芽糖+-腦膜炎奈瑟氏菌淋病奈瑟氏菌三常用診斷流程常見(jiàn)菌的初步分群雙岐索引鑒定臨床分離菌

革蘭染色+-球菌桿菌球菌桿菌觸酶動(dòng)力DNA酶發(fā)酵+-+-+-+-微鏈李棒卡奈氧化酶非球球斯?fàn)钏?-發(fā)菌菌特菌布菌弧腸酵科科菌菌蘭菌菌菌屬等漢科科三常用診斷流程3數(shù)字編碼鑒定法編碼是即將所得生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)化成數(shù)學(xué)模式，可以把某一細(xì)菌的全部生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)化成數(shù)字，經(jīng)查閱檢索手冊(cè)又可將該數(shù)字轉(zhuǎn)化成細(xì)菌名稱．編碼的原則是：鑒定細(xì)菌的各種微量生化反應(yīng)管組成系列試劑，將生化項(xiàng)目排序并依次進(jìn)行分組，每組中的每個(gè)試驗(yàn)都有其一個(gè)數(shù)值代碼．試驗(yàn)陽(yáng)性時(shí)結(jié)果用其數(shù)值代碼表示，試驗(yàn)陰性時(shí)結(jié)果用0表示，將每組中各試驗(yàn)結(jié)果加起來(lái)得一總值，這樣按順序各組總值組成的數(shù)碼組合，即為檢索編碼．查編碼手冊(cè)，該編碼所對(duì)應(yīng)的細(xì)菌名稱即為鑒定結(jié)果．如腸桿菌科細(xì)菌生化編碼鑒定．腸桿菌科細(xì)菌生化編碼鑒定表組別試驗(yàn)項(xiàng)目代碼結(jié)果結(jié)果代碼總值硫化氫４－０1苯丙氨酸２－０１葡糖酸鹽１＋１靛基質(zhì)４－０２甲基紅２＋２３枸櫞酸鹽１＋１尿素４＋４３動(dòng)力２＋２７產(chǎn)氣１＋１賴氨酸４＋４４鳥氨酸２＋２６棉子糖１－０山梨醇４＋４５