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文檔簡介
實(shí)驗(yàn)二:細(xì)胞分裂及染色體行為觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)材料四、實(shí)驗(yàn)儀器及用具五、藥品和試劑六、實(shí)驗(yàn)步驟一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.掌握植物制片技術(shù),奠定細(xì)胞遺傳學(xué)的研究技術(shù);2.通過對(duì)植物根尖細(xì)胞的觀察,掌握有絲分裂過程中染色體的形態(tài)特征和動(dòng)態(tài)變化。
在細(xì)胞分裂的適當(dāng)(分裂旺盛期)時(shí)候取材,進(jìn)行預(yù)處理,固定、解離、染色和涂抹壓片等方法,使細(xì)胞、染色體分散,便于在顯微鏡下觀察染色體的形態(tài)特征和變化特點(diǎn)及進(jìn)行染色體計(jì)數(shù)。三、實(shí)驗(yàn)材料
大蒜鱗莖四、實(shí)驗(yàn)儀器及用具
多媒體顯微演示系統(tǒng)、顯微鏡、培養(yǎng)箱、分析天平、剪刀(或刀片)、鑷子、解剖針、載玻片、蓋玻片、濾紙、鉛筆、標(biāo)簽紙、膠水、棕色瓶等。五、藥品和試劑
濃鹽酸、95%無水乙醇、0.075mol/LKCI、45%醋酸、蒸餾水,改良苯酚品紅(龍膽紫或醋酸洋紅)(二)預(yù)處理
為了獲得較多中期分裂相的細(xì)胞,同時(shí)使染色體縮短和分散,可對(duì)根尖進(jìn)行預(yù)處理,處理方法如下:根尖浸在蒸餾水中于在1-4℃低溫下處理24小時(shí)。(三)固定或前低滲
用蒸餾水洗凈材料,將根尖放入0.075mol/LKCI溶液中低滲處理20分鐘,然后用蒸餾水沖洗2-3次。(四)解離
將根尖用蒸餾水沖洗2次,放入95%乙醇和濃鹽酸(1?1)混合液中處理2-10分鐘,取出,用水漂洗2遍。
染色完畢,取一蓋玻片,蓋玻片一邊靠在離材料不遠(yuǎn)的載玻片上,左手握鑷子頂著蓋玻片,右手握解剖針托住蓋玻片徐徐放下,若染色液不能布滿蓋玻片時(shí),可在蓋玻片邊緣稍加染色液,然后用一張大小合適的濾紙覆蓋在蓋玻片上,一手固定蓋玻片,另一手持鉛筆橡皮頭,對(duì)準(zhǔn)材料輕敲,使根尖細(xì)胞分散均勻。(六)顯微觀察
制備好的細(xì)胞學(xué)片子,置于顯微鏡的載物臺(tái)上,先用低倍鏡(10×10)調(diào)焦觀察,尋找具有分裂相的細(xì)胞后,再轉(zhuǎn)換到高倍鏡(10×40)下觀察。(七)實(shí)驗(yàn)作業(yè)1.制作細(xì)胞有絲分裂各時(shí)期圖象片子1-
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