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文檔簡介
【目的】學(xué)學(xué)習(xí)血液和組織中藥物含量的測定方法,了解磺胺類藥物在體內(nèi)的分布動(dòng)力學(xué)規(guī)律與臨床意義?!驹怼?/p>
吸收:藥物自用藥部位進(jìn)入血液循環(huán)的過程稱為吸收。
分布:藥物隨血液循環(huán)到達(dá)機(jī)體各部位的過程稱為分布。
磺胺嘧啶的測定原理:磺胺類藥物為氨基苯類化合物,在酸性溶液中可與亞硝酸鈉其重氮反應(yīng)生成重氮鹽,此鹽在堿性溶液中與麝香草酚起偶聯(lián)反應(yīng)形成橙紅色偶氮化和物,將該化合物在525nm波長下比色,其OD值與磺胺類藥物濃度成正比。
第一頁,共9頁?!舅幤贰?/p>
20%磺胺嘧啶鈉(SD-Na),0.05%SD,
7.5%和15%三氯醋酸,肝素、0.5%麝香草酚,0.5%亞硝酸鈉,蒸餾水【儀器】分光光度計(jì),離心機(jī),電子秤,刻度離心管,試管,手術(shù)器械,組織研磨器,小鼠灌胃器,移液管,托盤天平。
【動(dòng)物】
小鼠,體重20~22g第二頁,共9頁。【方法、步驟】1.取小鼠兩只,記為給藥組和對(duì)照組,給藥組灌胃給予20%SD-Na0.1ml/10g,對(duì)照組給予等容積生理鹽水。2.給藥組于藥后30min通過摘眼球取血。對(duì)照組在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)同法取血(用于裝血樣的離心管需提前用肝素抗凝,取血后搖勻)。3.將離心管編號(hào),準(zhǔn)確吸取抗凝血0.2ml,加入盛有7.5%三氯醋酸2.8ml的離心管中,充分搖勻。第三頁,共9頁?!痉椒?、步驟】4.取血后,頸椎脫臼處死上述兩只小鼠,分別剪開腹腔和顱腔,迅速剖取上述小鼠的肝,腎,腦并用濾紙沾去血液。5.準(zhǔn)確稱取腦,肝,腎組織各200~400mg,分置與組織研磨器中,按100mg組織加三氯醋酸1ml制備勻漿,倒入相應(yīng)編號(hào)的離心管中,離心,3000r/10min第四頁,共9頁?!痉椒?、步驟】6.準(zhǔn)確吸取各管上清液1.5ml分別加至相對(duì)應(yīng)編號(hào)的試管中,標(biāo)準(zhǔn)管吸取對(duì)照管上清液1.4ml,加0.1ml標(biāo)準(zhǔn)SD溶液(1mg/ml)然后各管依次加入0.5ml亞硝酸鈉,充分搖勻后加入1.0ml麝香草酚并搖勻。7.以對(duì)照管做參比,525nm波長測OD值。第五頁,共9頁。操作流程圖血0.2ml血沉淀液離心腦(3000r/10min)取上清液腎300~400三氯醋酸1.5ml肝(1ml/100mg)
組織勻漿研磨血藥濃度濃度值光密度測定液組織藥物濃度OD值測定三氯醋酸2.8ml亞硝酸鈉0.5ml麝香草酚1.0ml對(duì)照組給予生理鹽水給藥組給予磺胺并于30min后實(shí)驗(yàn)第六頁,共9頁。.計(jì)算:
OD標(biāo)=1.0第七頁,共9頁。注意事項(xiàng):1、集血瓶和注射器用時(shí)需提前用肝素潤洗2、給藥組取血間隔為藥后半小時(shí)3、每次所取樣品中磺胺的濃度不一樣,磺胺很容易被污染,
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