微生物的顯微鏡直接計(jì)數(shù)法

關(guān)于微生物的顯微鏡直接計(jì)數(shù)法第一頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)使用目鏡測微尺和鏡臺測微尺在顯微鏡下測定微生物大小的方法。

學(xué)習(xí)使用血球記數(shù)板測定微生物數(shù)量的方法。

第二頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一實(shí)驗(yàn)材料顯微鏡、目鏡測微尺、鏡臺測微尺、血球記數(shù)板、酵母菌懸液、蓋玻片、無菌滴管、吸水紙、擦鏡紙。第三頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一實(shí)驗(yàn)步驟測定酵母菌細(xì)胞的大小

測定的工具：目鏡測微尺鏡臺測微尺目鏡測微尺每格實(shí)際代表的長度隨物鏡的放大倍數(shù)而改變，也會(huì)因使用不同的顯微鏡而產(chǎn)生誤差，因此在使用前必須用鏡臺測微尺進(jìn)行校正。

目鏡測微尺的每格長度(μm)=鏡臺測微尺×10/目鏡測微尺第四頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一酵母菌顯微直接計(jì)數(shù)

方法：活菌計(jì)數(shù)法——平板菌落計(jì)數(shù)法；總菌計(jì)數(shù)法——血球計(jì)數(shù)板或霍瑟（PeroffHausser）細(xì)菌計(jì)數(shù)板（二者原理和部件相同，只是厚薄不同而已）。細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)÷100×400×10×1000×稀釋倍數(shù)細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)÷80×400×10×1000×稀釋倍數(shù)第五頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一取清潔無油的血球計(jì)數(shù)板，在計(jì)數(shù)室上面加蓋血蓋片。取酵母菌液，搖勻，用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入，計(jì)數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。用4×鏡觀察并將計(jì)數(shù)室移至視野中央。在4×鏡下計(jì)數(shù)：計(jì)數(shù)4個(gè)（或5個(gè)）中格的平均值，然后求得每個(gè)中格的平均值。乘上16（或25）就得出計(jì)數(shù)區(qū)總菌數(shù)，最后再換算到每mL菌液中的含菌數(shù)。注意事項(xiàng)：計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右。出芽計(jì)一半第六頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一實(shí)驗(yàn)結(jié)果目鏡測微尺標(biāo)定結(jié)果：

×目鏡下

倍物鏡目鏡測微尺每格長度是

μm。菌號酵母的直徑大小測定結(jié)果

目鏡測微尺格數(shù)實(shí)際直徑/μm1

2

3

4

5

均值

第七頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一將顯微計(jì)數(shù)結(jié)果記錄于下表中。T表示五個(gè)中方格中的總菌數(shù)；D表示菌液稀釋倍數(shù)。

各中格中菌數(shù)TD二室平均值個(gè)/ml12345第一室

第二室

第八頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一問題與討論為什么目鏡測微尺必須用鏡臺測微尺來校正？

在顯微鏡下直接測定微生物數(shù)量有什么優(yōu)缺點(diǎn)？第九頁，共十一頁，編輯于2023年，星期一本次實(shí)驗(yàn)課結(jié)束

請確保血球計(jì)數(shù)板清洗干凈！

請值日生