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致病性病毒對(duì)食品的污染演示文稿當(dāng)前1頁,總共42頁。致病性病毒對(duì)食品的污染當(dāng)前2頁,總共42頁。+致病性病毒對(duì)食品的污染當(dāng)前3頁,總共42頁。+病毒:病毒(virus)由一個(gè)核酸分子(DNA或RNA)與蛋白質(zhì)(Protein)構(gòu)成或僅由蛋白質(zhì)構(gòu)成(如朊病毒)。病毒個(gè)體微小,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單。由于沒有實(shí)現(xiàn)新陳代謝所必需的基本系統(tǒng),所以病毒自身不能復(fù)制。但是當(dāng)它接觸到宿主細(xì)胞時(shí),便脫去蛋白質(zhì)外套,它的核酸(基因)侵入宿主細(xì)胞內(nèi),借助后者的復(fù)制系統(tǒng),按照病毒基因的指令復(fù)制新的病毒。當(dāng)前4頁,總共42頁。+食品中常見病毒:1.瘋牛?。貌《?.諾瓦克病毒(Norwalkvirus)3.甲肝病毒(HAV)4.禽流感病毒當(dāng)前5頁,總共42頁。+瘋牛病的爆發(fā):20世紀(jì)80年代中期至90年代中期是瘋牛病暴發(fā)流行期,主要的發(fā)病國(guó)家如英國(guó)及其他歐洲國(guó)家有大量的?;疾〔⒈辉讱ⅲl(fā)生瘋牛病國(guó)家的牛肉及牛肉制品的出口受到了嚴(yán)格的限制。英國(guó)是發(fā)生瘋牛病最多的國(guó)家,1999年統(tǒng)計(jì)占總發(fā)病數(shù)的99%。到2000年7月,在英國(guó)有超過34000個(gè)牧場(chǎng)的17.6萬多頭牛感染了此病,最高發(fā)病時(shí)間是在1993年1月,每月至少有1000頭牛發(fā)病。截至到2002年,英國(guó)共屠宰病牛1100多萬頭,經(jīng)濟(jì)損失達(dá)數(shù)百億英鎊。當(dāng)前6頁,總共42頁。+一、瘋牛?。貌《警偱2?“madcow”disease)學(xué)名為“牛海綿狀病”,簡(jiǎn)稱BSE。醫(yī)學(xué)家們發(fā)現(xiàn)BSE的病程一般為14~90天,潛伏期長(zhǎng)達(dá)4~6年,多發(fā)生在4歲左右的成年牛身上癥狀:煩躁不安,對(duì)聲音和觸摸,尤其是對(duì)頭部觸摸過分敏感,步態(tài)不穩(wěn),經(jīng)常亂踢以至摔倒、抽搐、強(qiáng)直性痙攣,糞便堅(jiān)硬,兩耳對(duì)稱性活動(dòng)困難,呼吸頻率增快,體重下降,極度消瘦以至死亡。當(dāng)前7頁,總共42頁。+人類瘋牛病“克——雅二氏病”受瘋牛病危害的不僅是牛,人若食用了被污染了的牛肉、牛脊髓等,也有可能染上克羅伊茨費(fèi)爾德—雅各布氏癥(克-雅氏癥),簡(jiǎn)稱CJD——是一種罕見的致命性海綿狀腦病。據(jù)專家們統(tǒng)計(jì),每年在100萬人中只有一個(gè)會(huì)得CJD。患者以年輕人為主,發(fā)病時(shí)間平均為14個(gè)月。其典型臨床癥狀:出現(xiàn)癡呆或神經(jīng)錯(cuò)亂,視覺模糊,平衡障礙,肌肉收縮等。病人最終因精神錯(cuò)亂而死亡。截至2003年底累計(jì)已有至少137人死于新型克雅氏癥,其中多數(shù)在英國(guó)。當(dāng)前8頁,總共42頁。+瘋牛病致病因及生物特性:瘋牛病是1985年4月最早在英國(guó)出現(xiàn)的一種新病。1996年確診,1997年美國(guó)生物化學(xué)家斯坦利·普魯辛納發(fā)現(xiàn)瘋牛病的致病因子是朊蛋——朊病毒(Prion)。特性:1.可濾過性,增殖非常緩慢;2.與已知病毒特征明顯不同,不具有病毒結(jié)構(gòu),未檢出核酸;
3.對(duì)福爾馬林、蛋白酶、加熱、電離輻射、紫外線抵抗力強(qiáng)。
4.朊毒體的復(fù)制傳播都較細(xì)菌、病毒更快當(dāng)前9頁,總共42頁。+瘋牛病感染途徑:當(dāng)前10頁,總共42頁。+預(yù)防和治療:慕尼黑大學(xué)曾發(fā)布消息說,該大學(xué)和波恩大學(xué)以及馬普研究所的研究人員合作,從被感染了Scrapie病毒的實(shí)驗(yàn)鼠腦蛋白分子中發(fā)現(xiàn)了一種物質(zhì),這種物質(zhì)能明顯延長(zhǎng)被感染的實(shí)驗(yàn)鼠的生命,并可以制成疫苗用來預(yù)防和治療瘋牛病。Scrapie病毒是瘋牛病病毒和人類克雅氏病毒的一種變種。慕尼黑大學(xué)的研究人員稱,利用這種物質(zhì)制成的疫苗,能有效地預(yù)防瘋牛病,但能否用于人類預(yù)防和治療克雅氏病還需深入研究。當(dāng)前11頁,總共42頁。+檢測(cè)技術(shù)1998年愛爾蘭報(bào)道了一種BSE免疫學(xué)檢測(cè),2h可報(bào)告結(jié)果,1d可檢測(cè)1.4萬頭牛。1999年7月Moynagh等報(bào)道了三種理想的方法:1、單抗檢測(cè)PrPSC的免疫印跡法(Prionics)2、多克隆抗體檢測(cè)PrPSC的化學(xué)發(fā)光ELISA(Enfer)法3、在變性和濃縮后用兩種單抗檢測(cè)PrPSC的夾心免疫法(CEA)當(dāng)前12頁,總共42頁。2023/3/17案例2010廣州12月17日電,廣東省衛(wèi)生廳通報(bào)2010年11月全省突發(fā)公共衛(wèi)生事件信息顯示,廣州從化市報(bào)告1起諾如病毒感染事件,發(fā)病429人,無死亡病例。當(dāng)前13頁,總共42頁。+二、諾瓦克病毒(NorwalkViruses,NV)
1968年在美國(guó)諾瓦克市暴發(fā)的一次急性腹瀉的患者糞便中分離的病原。因此得名。諾瓦科病毒是直徑27nm的圓形結(jié)構(gòu)的病毒,無包膜,尚不能在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。Norwalk病毒是是一種高致病、傳染性極強(qiáng)的腸胃病毒,能導(dǎo)致急性胃腸炎。當(dāng)前14頁,總共42頁。+感染及表現(xiàn):諾瓦克病毒通常棲息于牡蠣等貝類中,人若生食這些受污染的貝類會(huì)被感染,患者的嘔吐物和排泄物也會(huì)傳播病毒。諾瓦克病毒能引起腹瀉,主要臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐。部分會(huì)有輕微發(fā)燒、頭痛、肌肉酸痛、倦怠、頸部僵硬、畏光、等現(xiàn)象癥狀通常持續(xù)1~2天。普遍感到病情嚴(yán)重,一日多次劇烈嘔吐。癥狀一般攝入病毒后24~48小時(shí)出現(xiàn),但是暴露后12小時(shí)也可能出現(xiàn)癥狀。沒有證據(jù)表明感染者能成為長(zhǎng)期病毒攜帶者,但是從發(fā)病到康復(fù)后2周感染者的糞便和嘔吐物中可以檢出病毒。當(dāng)前15頁,總共42頁。+傳染途徑:當(dāng)前16頁,總共42頁。+預(yù)防:1.病后2~3天后再上崗,期間避免食品加工工作2.諾瓦克病毒患者經(jīng)常無預(yù)兆劇烈嘔吐,嘔吐物有感染性。嘔吐物附近任何表面都應(yīng)該被迅速清理和用漂白劑消毒,然后沖洗干凈3.諾如病毒污染的食物應(yīng)當(dāng)扔棄,食用生蔬菜前應(yīng)當(dāng)徹底清洗。4.紡織品(包括衣服、毛巾、桌布和餐巾)沾染嘔吐物或糞便時(shí),應(yīng)迅速高溫清洗5.牡蠣等應(yīng)該從正當(dāng)途徑獲得和保留適當(dāng)?shù)淖C明材料6.干燥后諾瓦克病毒會(huì)漂浮在空氣中,造成感染,因此必須注意消毒。除此之外要注意勤洗手當(dāng)前17頁,總共42頁。+檢測(cè)技術(shù)(1)免疫電鏡法(IEM)
NV被發(fā)現(xiàn)后很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi),電鏡一直是檢測(cè)的主要手段,具有直接、可靠的優(yōu)點(diǎn)。電鏡觀察需要的樣品量為106~107個(gè)病毒顆粒/mL排泄物。這個(gè)技術(shù)僅在發(fā)病早期適用。免疫電鏡能使電鏡的靈敏度提高10-100倍。在顯微鏡下包被康復(fù)病人的血清。血清抗體玉同源病毒相結(jié)合,因此提高了診斷效率。但I(xiàn)EM不適合大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查。當(dāng)前18頁,總共42頁。+(2)放射免疫和生物素-親和素法(RIA法)檢測(cè)抗原與IEM法相比在靈敏度上沒有明顯差異,但用RIA法能檢測(cè)出急性期和恢復(fù)期之間抗體升高4倍以上,對(duì)流行病學(xué)調(diào)查更有意義。實(shí)驗(yàn)需6d,同時(shí)還需要放射性同位素標(biāo)記。(3)酶鏈免疫法(ELISA)
此法特異性強(qiáng),靈敏度高,診斷迅速,且較經(jīng)濟(jì),是目前可廣泛應(yīng)用的檢測(cè)方法。這種技術(shù)的檢測(cè)樣品量要求104~106病毒顆粒/mL排泄物。當(dāng)前19頁,總共42頁。+(4)雜交技術(shù)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)
RT-PCR方法是檢測(cè)病人排泄物和環(huán)境中樣品的諾瓦科病毒基因的特異手段。這個(gè)方法的靈敏度為102~104病毒顆粒/mL排泄物。高敏感的RT-PCR方法依賴于PCR引物的設(shè)計(jì)。依賴RNA的RNA聚合酶區(qū)域被認(rèn)為是諾瓦科病毒基因組的最保守的區(qū)域。盡管用于擴(kuò)增的RdRp區(qū)域基因的引物能擴(kuò)增大多數(shù)的諾瓦科病毒,但由于諾瓦科病毒遺傳多樣性使這些引物很難擴(kuò)增所有的諾瓦科病毒。當(dāng)前20頁,總共42頁。+案例:1988年上海市甲肝大流行當(dāng)前21頁,總共42頁。+三、甲肝病毒(HAV)病毒性肝炎是當(dāng)前危害人類健康的疾病之一。目前認(rèn)為病毒性肝炎病原體至少有五種,包括甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、丁型肝炎病毒(HDV)、戌型肝炎病毒(HEV),它們的特性、傳播途徑、臨床經(jīng)過均不完全相同,但它們均能引起肝炎病變。當(dāng)前22頁,總共42頁。項(xiàng)目甲型肝炎乙型肝炎丙型肝炎丁型肝炎戌型肝炎病毒HAVHBVHCVHDVHEV病毒分類微小核糖核酸病毒嗜肝脫氧核糖核酸病毒黃病毒(缺陷病毒)杯狀病毒病毒大小27nm42nm30~60nm40nm27~34nm基因ssRNA(+)7.8kbdsDNA3,2kbssRNA(+)10.5kbssRNA(-)1.7kbssRNA(+)3.5kb抗原HAVAg(VP1~4)HBsAgHBcAgHBeAgHCVAgHDVAgHEVAg傳播途徑腸道傳播腸道外及性傳播多數(shù)腸道外傳播多數(shù)和腸道外傳播腸道傳播潛伏期(范圍)25天(15~45天)75天(40~120天)50天(15~90天)50天(25~75天)40天(20~30天)慢性化無3~10%40~70%2~70%無暴發(fā)性肝炎0.2%0.2%0.2%2~20%0.2~10%當(dāng)前23頁,總共42頁。+甲型肝炎病毒的發(fā)現(xiàn)1973年Feinslone首先用免疫電鏡技術(shù)在急性期患者的糞便中發(fā)現(xiàn)甲型肝炎病毒
(HepatitisAvirus,HAV)。屬微小RNA病毒科,新型腸道病毒72型。當(dāng)前24頁,總共42頁。+免疫電鏡中的甲肝病毒當(dāng)前25頁,總共42頁。+甲肝的危害:
1.容易集體爆發(fā):美國(guó)疾病控制和預(yù)防中心(CDC)和國(guó)家傳染病中心GregoryLArmstrong博士推測(cè),每年甲肝感染者人數(shù)可能高達(dá)60,000-140,000人,是每年公布人數(shù)的二到五倍。一旦引起爆發(fā)后果很難得到控制。
2.導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷:甲型肝炎致病機(jī)制是肝炎病毒在肝臟復(fù)制,造成肝細(xì)胞損害而引起的一系列癥狀:如發(fā)熱、厭油、厭食、腹痛、腹瀉、黃疸等。當(dāng)前26頁,總共42頁。+3.甲肝對(duì)妊娠的影響:臨床經(jīng)過同一般甲肝??砂l(fā)生于妊娠各期。早期者易致流產(chǎn),晚期易致早產(chǎn),產(chǎn)后較易出現(xiàn)陰道大出血。甲肝越是妊娠后期,影響越嚴(yán)重。分娩時(shí)易導(dǎo)致大出血,產(chǎn)后易繼發(fā)其他感染。演變?yōu)橹匕Y肝炎不但危及孕婦生命,胎兒也常突然死亡。因此,妊娠時(shí)患了肝炎必須住院治療。當(dāng)前27頁,總共42頁。+傳染源與傳播途徑:當(dāng)前28頁,總共42頁。2023/3/17易感人群凡是未感染過甲型肝炎病毒的人,無論是兒童還是成人均是易感者。當(dāng)前29頁,總共42頁。+預(yù)防:1.養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣,把住“病從口入”關(guān)。食品要高溫加熱,一般情況下,加熱100℃一分鐘就可使甲肝病毒失去活性。2.對(duì)一些自身易攜帶致病菌的食物如螺螄、貝殼、螃蟹,尤其是能富集甲肝病毒的毛蚶等海、水產(chǎn)品,食用時(shí)一定要煮熟蒸透,杜絕生吃、半生吃以及腌制后直接食用等不良飲食習(xí)慣。3.接種甲肝疫苗,可以提高人群免疫力,預(yù)防甲肝的發(fā)生和暴發(fā)流行。4.對(duì)密切接觸者,包括當(dāng)傳染源已明確(如食物或水)的所有已暴露者,已流行甲肝的學(xué)校、醫(yī)院、家庭或其他單位中的成員,可及時(shí)給予丙種球蛋白注射。注射時(shí)間越早越好,最遲不宜超過接觸感染后7~10天,免疫效果可以維持35天。對(duì)密切接觸者應(yīng)進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察45天。5.食源性感染應(yīng)檢查廚師的抗HAV-IgM,確診后應(yīng)隔離治療。6.發(fā)現(xiàn)甲肝病人應(yīng)及時(shí)報(bào)告當(dāng)?shù)氐募膊☆A(yù)防控制中心采取有效措施隔離傳染源,切斷傳播途徑,保護(hù)易感人群,控制傳染病的流行,早期報(bào)告對(duì)控制疫情具有非常重要的意義。當(dāng)前30頁,總共42頁。+檢測(cè)技術(shù)(1)GB/T22287—2008貝類中甲型肝炎病毒檢測(cè)方法:普通RT—PCR方法和實(shí)時(shí)熒光RT—PCR方法實(shí)時(shí)熒光RTPCR方法是在常規(guī)RTPCR的基礎(chǔ)上,加入一條特異性的熒光探針。該探針為一段寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收,PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’3’外切酶活性將探針酶切降解,便報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)統(tǒng)可以接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。當(dāng)前31頁,總共42頁。+(2)免疫電鏡敏感性高,標(biāo)本中含有104~106顆粒/mL可被檢出。將標(biāo)本加入特異性抗體HAV血清,經(jīng)孵育后,HAV顆粒與抗血清發(fā)生凝集,再用超速離心加以濃縮,取其免疫復(fù)合物,用磷鎢酸鹽進(jìn)行染色,于電鏡下檢查HAV球形顆粒。(3)固相放射免疫測(cè)定法將放射性同位素與免疫化學(xué)相結(jié)合的體外測(cè)定超微量物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)方法,具有同位素技術(shù)的高靈敏性、準(zhǔn)確性的優(yōu)點(diǎn),同時(shí)又兼有抗原抗體反應(yīng)的專一性。當(dāng)前32頁,總共42頁。+另外,檢查方法還有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附和免疫黏附血凝試驗(yàn)等方法。通過利用葡萄糖球菌A蛋白可吸附IgG的方法,在單份血清中可區(qū)別甲肝抗體為IgM和IgG,根據(jù)急性期病人血清抗體為IgM,而恢復(fù)期病人的血清抗體為主要是IgG,可對(duì)甲肝急性期病人進(jìn)行早期診斷。當(dāng)前33頁,總共42頁。+四、禽流感病毒:當(dāng)前34頁,總共42頁。+禽流感的爆發(fā):
1878年,禽流感在意大利的首次暴發(fā)使人們開始認(rèn)識(shí)這種極具殺傷力的傳染病。此后,禽流感病毒在近兩個(gè)世紀(jì)中,不斷地侵襲著整個(gè)世界。當(dāng)前35頁,總共42頁。+四、禽流感病毒:流感病毒屬于RNA病毒的正黏病毒科,分甲、乙、丙3個(gè)型禽流感病毒(AIV)屬甲型流感病毒,多發(fā)于禽類,一些甲型也可感染豬、馬、海豹和鯨等各種哺乳動(dòng)物及人類乙型和丙型流感病毒則分別見于海豹和豬的感染當(dāng)前36頁,總共42頁。+四、禽流感病毒:甲型流感病毒呈多形性,其中球形直徑80~120nm,有囊膜。基因組為分節(jié)段單股負(fù)鏈RNA。依據(jù)其外膜血凝素(H)/和神經(jīng)氨酸酶(N)蛋白抗原性的不同,目前可分為16個(gè)H亞型(H1~H16)和9個(gè)N亞型(N1~N9)。感染人的禽流感病毒亞型主要為H5N1、H9N2、H7N7,其中感染H5N1的患者病情重,病死率高。當(dāng)前37頁,總共42頁。+禽流感的特征:致病能力造成人感染發(fā)病的禽流感病毒可能是發(fā)生了變異的病毒。研究表明,原本為低致病性禽流感病毒株(H5N2、H7N7、H9N2),可經(jīng)6~9個(gè)月禽間流行的迅速變異而成為高致病性毒株(H5N1)適應(yīng)能力糞便:1周水中:1個(gè)月病毒對(duì)低抗溫抵力較強(qiáng),在有甘油保護(hù)的情況下可保持活力1年以上。
當(dāng)前38頁,總共42頁。+禽流感的傳染源與易患人群:傳染源:主要為患禽流感或攜帶禽流感病毒的家禽,另外野禽
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