第七章分生組織培養(yǎng)與脫毒詳解演示文稿

第七章分生組織培養(yǎng)與脫毒詳解演示文稿當(dāng)前1頁，總共25頁。優(yōu)選第七章分生組織培養(yǎng)與脫毒當(dāng)前2頁，總共25頁。37.1植物病毒的危害和種類:受病毒危害嚴(yán)重的作物有：大田作物：馬鈴薯、甘薯和煙草蔬菜：白菜、大蒜、蔥、番茄和蘿卜果樹：柑橘、蘋果、草莓和香蕉花卉：香石竹、各種菊花、天竺葵和紫羅蘭植物病毒已超過600種；感染草莓的病毒有62種，柑橘有15種，馬鈴薯有26種植物病毒有RNA、DNA病毒當(dāng)前3頁，總共25頁。草莓病毒病4環(huán)斑型變色型壞死型畸形生長型一般減產(chǎn)30%左右當(dāng)前4頁，總共25頁。57.2植物病毒的傳播及分布:介體傳播1.昆蟲介體：400多種（如蚜蟲200多種、葉蟬130多種、飛虱等），以蚜蟲為主；2.動物介體（如螨、線蟲）；3.真菌和菟絲子。飛虱傳播病毒

蚜蟲傳播病毒

螨蟲傳播病毒

7.2.1傳播當(dāng)前5頁，總共25頁。6嫁接傳播非介體傳播

是指植物病毒從感病寄主體內(nèi)由于傷殘或分泌而達(dá)到體外，與另一寄主體通過機械摩擦所造成的微傷接觸而傳染；無性繁殖當(dāng)前6頁，總共25頁。7植物病毒的分布

7.2.2.1侵入活體寄生，不能從氣孔侵入。微小傷口——胞間連絲——原生質(zhì)，產(chǎn)生侵染（1）通過寄主柔膜組織昆蟲傳播的病毒，可通過3種類型的組織侵入：（2）通過寄主韌皮組織

（3）通過木質(zhì)部當(dāng)前7頁，總共25頁。87.2.2.2增殖與運轉(zhuǎn)病毒粒子（核酸）細(xì)胞核內(nèi)復(fù)制，到達(dá)細(xì)胞質(zhì)誘導(dǎo)病毒蛋白質(zhì)形成，最后組裝在一起。病毒復(fù)制到一定量，形成侵染點，通過胞間連絲（移動較慢）與韌皮部（速度極快），擴(kuò)散到其他部分。當(dāng)前8頁，總共25頁。97.2.2.3分布頂端分生組織一般是無毒的，或者是只攜有濃度很低的病毒。病毒數(shù)量隨著與莖尖距離的加大而增加，在較老的組織中病毒濃度很高。當(dāng)前9頁，總共25頁。10孔雀綠、硫尿嘧啶等病毒抑制劑、核酸合成抑制劑。生產(chǎn)上很難應(yīng)用。1.高溫處理

①溫湯浸漬處理法②熱風(fēng)處理法2.低溫處理1.種子繁殖2.分生組織培養(yǎng)中脫毒3.愈傷組織誘導(dǎo)4.微型嫁接脫毒5.珠心胚培養(yǎng)物理學(xué)方法化學(xué)方法生物學(xué)方法7.3植物病毒的防治方法及原理：當(dāng)前10頁，總共25頁。11高溫空氣熱處理脫毒示意圖切取嫩梢1.5~2.0cm帶病毒植株熱處理38℃嫩梢嫁接當(dāng)前11頁，總共25頁。12熱處理與莖尖分生組織培養(yǎng)結(jié)合脫毒

35℃熱處理7~28d感染X、Y病毒暗處發(fā)芽

莖尖剝離莖尖分生

組織培養(yǎng)柑橘微芽嫁接脫毒當(dāng)前12頁，總共25頁。四川農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院馬鈴薯研究開發(fā)中心13重點介紹：7.4莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒當(dāng)前13頁，總共25頁。14莖尖培養(yǎng)：概念：是指從十到幾十微米的莖尖分生組織至幾十毫米莖尖或更大芽的離體培養(yǎng)。根據(jù)外植體大小可劃分：莖尖分生組織培養(yǎng)（≦0.1mm）普通莖尖培養(yǎng)（較大的莖尖如幾毫米乃至幾十毫米）當(dāng)前14頁，總共25頁。15莖尖分生組織培養(yǎng)莖尖培養(yǎng)無菌苗莖尖培養(yǎng)途徑易難當(dāng)前15頁，總共25頁。四川農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院馬鈴薯研究開發(fā)中心16來源:丁春邦課件當(dāng)前16頁，總共25頁。17莖尖分生組織培養(yǎng)莖尖培養(yǎng)無菌苗無毒苗區(qū)別?當(dāng)前17頁，總共25頁。18莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒原理:White發(fā)現(xiàn)TMV在煙草根尖分布不均，1934年。Limasset等發(fā)現(xiàn)莖尖也不帶病毒。1949年，Morel等首先利用莖尖分生組織培養(yǎng)獲得了大麗花和馬鈴薯無病毒苗，同時建立了莖尖脫毒的組織培養(yǎng)技術(shù)體系。1952年，Mathews（1970）等認(rèn)為分生組織能避免病毒侵染的可能機理是：當(dāng)前18頁，總共25頁。19（1）在植物體內(nèi)，病毒通過維管系統(tǒng)移動，而分生組織不存在維管系統(tǒng)。此外，病毒通過胞間連絲在細(xì)胞間移動，但其速度很慢，難以侵入活躍生長的莖尖；（2）在旺盛生長的分生細(xì)胞中，代謝活性很高，使病毒無法進(jìn)行復(fù)制；（3）倘若在植物體內(nèi)確實存在著“病毒鈍化系統(tǒng)”的話，它在分生組織中應(yīng)比在任何其他區(qū)域都有更高的活性，因而分生組織不受侵染；（4）在莖尖中存在高水平的內(nèi)源激素，可以抑制病毒的增殖。當(dāng)前19頁，總共25頁。20

帶病毒植株材料處理莖尖剝離

(0.2mm)

莖尖培養(yǎng)

分化芽分化根

病毒檢測

脫毒植株7.4.2莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒過程當(dāng)前20頁，總共25頁。21病毒的種類離體莖尖的大小化學(xué)物質(zhì)熱處理病毒間的干擾7.4.3影響分生組織培養(yǎng)脫毒的因子：當(dāng)前21頁，總共25頁。22一些植物莖尖培養(yǎng)脫除病毒時適宜莖尖大小（朱至清，2002）植物種類病毒種類莖尖大小/mm植物種類病毒種類莖尖大小/mm甘薯馬鈴薯大麗花斑葉花葉病毒縮葉花葉病毒羽狀花葉病毒Y病毒X病毒卷葉病毒G病毒S病毒花葉病毒1.0～2.01.0～2.00.3～1.01.0～3.00.2～0.51.0～3.00.2～0.30.30.6～1.0康乃馨百合鳶尾大蒜矮牽牛菊花草莓甘蔗春山芋花葉病毒各種花葉病毒花葉病毒花葉病毒煙草花葉病毒花葉病毒各種病毒花葉病毒蕪菁花葉病毒0.2～0.80.1～0.20.2～0.50.3～1.00.1～0.30.2～1.00.2～1.00.7～0.80.5當(dāng)前22頁，總共25頁。7.5無病毒植株的鑒定237.5.1指示植物法病毒指示植物鑒定法就是利用病毒在其它植物上產(chǎn)生的枯斑和某些病理癥狀，作為鑒別病毒及病毒種類的標(biāo)準(zhǔn)，有時該法也稱枯斑測定法。病毒癥狀特征指示植物表7-5植物一些病毒病害癥狀和指示植物馬鈴薯X病毒（PVX)輕重不同的花葉和環(huán)斑，因株系而異千日紅，地霉松，指尖椒當(dāng)前23頁，總共25頁。7.5.2抗血清鑒定法24凡能刺激動物機體產(chǎn)生免疫反應(yīng)的物質(zhì)，稱為抗原?？贵w則是由抗原刺激動物機體的免疫活性細(xì)胞而生成的，它存在于血清或體液中，為一種具有免疫特性的球蛋白，能與該抗原發(fā)生?；悦庖叻磻?yīng)。常用的有試管沉淀試驗、凝膠擴(kuò)散反應(yīng)、免疫電泳技術(shù)、炭凝集試驗、熒光抗體技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附法、免疫電子顯微鏡法等。當(dāng)前24頁，總共25頁。7.5.3酶聯(lián)免疫法25酶聯(lián)免