《人載脂蛋白AⅠ羊多抗血清制備技術(shù)規(guī)程》

ICS65.020.20B41

DB32江 蘇 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB32/TXXXX-2022人Technicalregulationsforproductionofsheepanti-humanapolipoproteinAⅠpolyclonalantiserum江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布DB32/TXXXX-2022DB32/TXXXX-2022II前 言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所提出。本文件由江蘇省畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。江蘇省農(nóng)科院。本文件主要起草人：徐志偉、姚明霞、徐一然、溫小林、鄧碧華、于建寧、李云、胡強(qiáng)、張兆麗、譚圣偉、盛媛媛。PAGEPAGE1人載脂蛋白A羊多抗血清制備技術(shù)規(guī)程范圍本文件運(yùn)用于人載脂蛋白AⅠ羊多抗血清制備中羊品種選擇和飼養(yǎng)要求、免疫佐劑選用、抗原乳化、抗原接種、抗體效價(jià)評(píng)估、抗血清制備的步驟和方法。規(guī)范性引用文件本文件無(wú)規(guī)范性引用文件。術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。AⅠApolipoproteinAⅠ用于運(yùn)輸血液中脂類的高密度主要載脂蛋白,A1是載脂蛋白A族中最多的一種組分，約占HDL顆粒的65%，主要在肝臟、部分在小腸合成。羊的選擇和飼養(yǎng)要求選用體重30kg—40kg生長(zhǎng)發(fā)育良好、10月齡左右的健康羊。采用群養(yǎng)放牧，適當(dāng)補(bǔ)飼方式，每天早晚觀察羊的健康狀況?？乖笕搜逋ㄟ^(guò)優(yōu)化PEG沉淀、離子交換吸附的方法，純度達(dá)96%。免疫佐劑選用首次免疫佐劑采用弗氏完全佐劑，從第二次免疫開(kāi)始，采用弗氏不完全佐劑?？乖榛捎酶咚偌羟蟹ㄈ榛乖?。乳化容器需放置在降溫夾套中，將佐劑按需要量置于乳化容器中，用吸管以60滴/min的速度緩慢加入載脂蛋白AⅠ抗原溶液，用漩渦混合器以1.5萬(wàn)rmp/min混合均勻，抗原溶液全部加完后，再持續(xù)混合15min?？乖臃N免疫劑量和部位1mg1mg/ml,1。表1 免疫劑量和部位次數(shù)間隔天數(shù)（d）免疫接種部位第1次0腹股溝、肘部、耳后、額下、背側(cè)和足窩第2次15腹股溝、肘部、耳后、額下、背側(cè)和腹股溝淋巴結(jié)點(diǎn)第3~9次9腹股溝、肘部、耳后、額下和背側(cè)抗體效價(jià)評(píng)估在第716，可以判定為合格，可以采血?？寡逯苽洳裳?50mL1/5。血清制備37℃1h4500rmp/min15min乳白色或微黃色，去掉沉淀物雜質(zhì)。外觀質(zhì)量血清應(yīng)呈黃色或微紅色血清狀液體，允許少量的絮狀物或沉淀。血清保存血清用滅菌