醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)一抗原抗體反應(yīng)

醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室Tel:姓名1醫(yī)學(xué)PPT第一講

抗原抗體反應(yīng)

antigen-antibodyreaction2醫(yī)學(xué)PPT什么是抗原抗體反應(yīng)？抗原與相應(yīng)抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)稱為抗原抗體反應(yīng)?？乖贵w反應(yīng)既可在體內(nèi)作為體液免疫應(yīng)答的效應(yīng)機(jī)制自然發(fā)生，也可在體外作為免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果出現(xiàn)。在體內(nèi)，可表現(xiàn)為溶菌、殺菌、促進(jìn)吞噬或中和毒素等作用，有時(shí)亦可引起免疫病理?yè)p傷，在體外，依相應(yīng)抗原物理性狀(顆粒狀或可溶性)以及反應(yīng)的條件(電解質(zhì)、補(bǔ)體等)不同，可出現(xiàn)凝集、沉淀、細(xì)胞溶解和補(bǔ)體結(jié)合等反應(yīng)。3醫(yī)學(xué)PPT4醫(yī)學(xué)PPT抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)

1.特異性

Ab1Ab2Ab35醫(yī)學(xué)PPT抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)

2.比例性抗體過(guò)?？乖^(guò)剩抗原抗體比例合適6醫(yī)學(xué)PPT抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)

3.可逆性7醫(yī)學(xué)PPT體外抗原抗體反應(yīng)的影響因素

電解質(zhì)溫度酸堿度作用時(shí)間8醫(yī)學(xué)PPT抗原抗體反應(yīng)類型可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所產(chǎn)生的沉淀反應(yīng)顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所發(fā)生的凝集反應(yīng)抗原抗體結(jié)合后激活補(bǔ)體所致的細(xì)胞溶解反應(yīng)細(xì)菌外毒素或病毒與相應(yīng)抗體結(jié)合所致的中和反應(yīng)免疫標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)。9醫(yī)學(xué)PPT凝集反應(yīng)---ABO血型的鑒定10醫(yī)學(xué)PPT實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.熟悉凝集反應(yīng)的定義及血型鑒定實(shí)驗(yàn)的原理。2.掌握血型鑒定實(shí)驗(yàn)的操作及結(jié)果的正確觀察與判斷。3.了解血型鑒定實(shí)驗(yàn)的用途。11醫(yī)學(xué)PPT凝集反應(yīng)定義：在一定濃度的電解質(zhì)環(huán)境中，顆粒性抗原（紅細(xì)胞、細(xì)菌、乳膠顆粒等）和相應(yīng)抗體反應(yīng)能夠產(chǎn)生肉眼可見(jiàn)的凝集塊直接凝集間接凝集間接凝集抑制試驗(yàn)抗球蛋白試驗(yàn)12醫(yī)學(xué)PPT13醫(yī)學(xué)PPT間接凝集反應(yīng)14醫(yī)學(xué)PPT間接凝集抑制15醫(yī)學(xué)PPT抗球蛋白法檢測(cè)IgG抗體的原理抗球蛋白可以和IgG反應(yīng)通過(guò)搭橋作用使紅細(xì)胞凝集16醫(yī)學(xué)PPT概述血型系統(tǒng)Bloodgroupsystem

17醫(yī)學(xué)PPT1901年發(fā)現(xiàn)的人類第一個(gè)血型系統(tǒng)----ABO血型系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)者----奧地利科學(xué)家KarlLandsteinerABO血型系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)18醫(yī)學(xué)PPT【實(shí)驗(yàn)原理】血型是指紅細(xì)胞的血型，是根據(jù)紅細(xì)胞膜外表面存在的特異性抗原（鑲嵌于紅細(xì)胞膜上的糖蛋白和糖脂）來(lái)確定的，這種抗原或凝集原是由遺傳決定的YYY+19醫(yī)學(xué)PPT實(shí)驗(yàn)器材1：載玻片、采血針、牙簽等2：A型和B型標(biāo)準(zhǔn)血清、酒精棉球20醫(yī)學(xué)PPT操作步驟1.取載玻片，酒精消毒正面，在背面標(biāo)記A和B兩區(qū)2.酒精消毒指端皮膚和采血針后，用采血針刺破皮膚，擠出少量血液，涂在玻片A、B兩區(qū)，并立即用無(wú)菌干棉球壓迫止血3.在兩區(qū)分別滴加一滴抗A定型試劑和抗B定型試劑，立即用牙簽混勻4.靜置3分鐘，觀察凝聚現(xiàn)象，判定實(shí)驗(yàn)結(jié)果21醫(yī)學(xué)PPT實(shí)驗(yàn)結(jié)果22醫(yī)學(xué)PPTABO血型檢查臨床意義1.輸血：輸血前必須檢查血型，選擇血型相同的供血者，進(jìn)行交叉配血完全相合才能輸血。2.母嬰ABO血型不合引起的新生兒溶血病，主要是依靠血型血清學(xué)檢查來(lái)診斷。3.器官移植時(shí)受者與供者也必須ABO血型相符合才能移植，血型不符極易引起急性排異反應(yīng)、導(dǎo)致移植失敗。4.ABO血型與疾病之間的聯(lián)系也有一些報(bào)道，某些看來(lái)造血系統(tǒng)無(wú)關(guān)的疾病實(shí)際上可能與紅細(xì)胞血型抗原有關(guān)。23醫(yī)學(xué)PPT沉淀反應(yīng)

----對(duì)流免疫電泳24醫(yī)學(xué)PPT沉淀反應(yīng)可溶性抗原在有適量電解質(zhì)存在的條件下與相應(yīng)的抗體結(jié)合，形成肉眼可見(jiàn)的沉淀物，稱為沉淀反應(yīng)類型：

沉淀反應(yīng)環(huán)狀沉淀反應(yīng)絮狀反應(yīng)瓊脂擴(kuò)散單向擴(kuò)散雙向擴(kuò)散＋電泳火箭電泳對(duì)流免疫電泳25醫(yī)學(xué)PPT單向擴(kuò)散AgConcentrationDiameter2AgAgAgAgAbingel26醫(yī)學(xué)PPT單向擴(kuò)散27醫(yī)學(xué)PPT雙向擴(kuò)散即將抗原和抗體分別加入瓊脂對(duì)應(yīng)的孔中，二者會(huì)向四周擴(kuò)散，在形成白色沉淀線。二者比例合適處28醫(yī)學(xué)PPT雙向擴(kuò)散29醫(yī)學(xué)PPT30醫(yī)學(xué)PPT電泳定義：即帶電顆粒在電場(chǎng)的作用下向著相反的電極移動(dòng)，稱為電泳。原理：蛋白質(zhì)分子在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及側(cè)鏈的游離基團(tuán)而成為帶電顆粒，并可在電場(chǎng)內(nèi)移動(dòng)，其移動(dòng)方向取決于蛋白質(zhì)分子所帶靜電荷。不同蛋白質(zhì)分子根據(jù)其氨基酸組成及所在溶液的pH值，攜帶的靜電荷不盡相同，致使它們?cè)陔妶?chǎng)中的遷移率各異，從而達(dá)到分理的目的。

31醫(yī)學(xué)PPT火箭免疫電泳32醫(yī)學(xué)PPT火箭免疫電泳33醫(yī)學(xué)PPT對(duì)流免疫電泳對(duì)流免疫電泳實(shí)質(zhì)上是由電泳定向加速的雙向擴(kuò)散抗原在電泳時(shí)從負(fù)極向正極移動(dòng)抗體由正極向負(fù)極移動(dòng)34醫(yī)學(xué)PPT實(shí)驗(yàn)器材1：載玻片、打孔器、三角燒瓶、移液管、洗耳球、10%的瓊脂、記號(hào)筆2：酒精燈、火柴、電爐、電泳儀、電泳槽3：微量加樣器、抗原及抗體樣品35醫(yī)學(xué)PPT操作步驟制板打孔封底加樣電泳3－4ml瓊脂孔間距3mm約7ul切割火焰2－3次總電流＝4mA/cmx2.5cm(板寬)xN(板數(shù)）30分鐘

抗原

抗體36醫(yī)學(xué)PPT對(duì)流免疫電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果37醫(yī)學(xué)PPT對(duì)流免疫電泳38醫(yī)學(xué)PPT思考題1、對(duì)流免疫電泳試驗(yàn)中如果抗原、抗體的正極和負(fù)極放反了