唾液酸的性質(zhì)

唾液酸的性質(zhì)第1頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸

sialicacid

第2頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸(sialicacid)學(xué)名：N-乙?；窠?jīng)氨酸定義：一類九碳單糖，所有神經(jīng)氨酸或酮基-脫氧壬酮糖酸(KDN)的N-或O-衍生物的總稱。主要食物來(lái)源：母乳，也存在于牛奶、雞蛋和奶酪中。第3頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸的研究背景1936年Blix等人首次從牛下頜骨粘液中分離得到了一種唾液酸1956年Gottschalk小組在檢驗(yàn)粘蛋白中流感病毒的作用時(shí)，分離得到了唾液酸類化合物中最具代表性的N-乙?；窠?jīng)氨酸1967年才完全確定了唾液酸的立體構(gòu)型，包括唾液酸中的酮苷鍵在游離狀態(tài)時(shí)為β-型，在天然綴合物中為α-型。第4頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸的結(jié)構(gòu)N-乙酰神經(jīng)氨酸(NeuAc、Neu5Ac或NANA)，N-羥乙酰神經(jīng)氨酸(NeuGc,NANGNeu5Gc)，去氨基神經(jīng)氨酸(KDN)和神經(jīng)氨酸(Neu),第5頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸的存在形式唾液酸的存在形式主要包括游離態(tài)的唾液酸、聚唾液酸、唾液酸的衍生物和唾液酸的同系物。聚唾液酸(Polysialicacid)是唾液酸單體以α-2,8和/或α-2,9酮苷鍵連接的線性同聚物。唾液酸同系物主要是通過(guò)甲基、乳?；⒘蛩岷土姿峄鶊F(tuán)取代四種主要唾液酸C-4,7,8,9位上的羥基基團(tuán)而實(shí)現(xiàn)。第6頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸的性質(zhì)純的唾液酸是無(wú)色的，易溶于水，在水溶液中不發(fā)生變旋作用，4℃時(shí)貯藏?cái)?shù)月不發(fā)生變化。純的聚唾液酸是白色不定型高聚合物，水溶性較好，粘度低，生物相容性好，在酸的作用下容易降解成單體的唾液酸，具有生物可降解性。第7頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸在不同生物體內(nèi)的分布廣泛存在于各種生物的組織中，是構(gòu)成細(xì)胞表面的復(fù)合糖質(zhì)的組成成分，通常在糖蛋白和糖脂的末端以糖苷的形式存在；原生動(dòng)物極少或不存在，脊椎動(dòng)物和哺乳動(dòng)物體內(nèi)普遍存在；在腦脊液和粘液中存在最多，血清、體液和尿液中也能發(fā)現(xiàn)游離的唾液酸。第8頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸的生物學(xué)功能使唾液粘蛋白具有潤(rùn)滑作用；唾液酸對(duì)細(xì)胞的凝聚具有一定的調(diào)控作用；唾液酸具有抗識(shí)別作用；作為腫瘤標(biāo)志物?？共《咀饔玫?頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸合成研究進(jìn)展生物合成以N-乙?；被咸烟菫樵希ㄟ^(guò)異構(gòu)化酶和唾液酸醛縮酶兩步酶催化反應(yīng)，在酶膜反應(yīng)器中合成了唾液酸第10頁(yè)/共17頁(yè)N-乙?；事短前泛捅嶂gC—C鍵的形成,由此合成得到了唾液酸。在酶反應(yīng)器中加入丙酮酸酯脫羰基酶將反應(yīng)體系中過(guò)量的丙酮酸降解為乙醛和二氧化碳硫胺素焦磷酸鹽第11頁(yè)/共17頁(yè)化學(xué)合成從手性的三醇出發(fā)，通過(guò)順式烯烴的苯硒基氨化反應(yīng)以及反式烯丙醇的雙羥基化反應(yīng)構(gòu)建了全部的手性中心，利用膦葉立德的臭氧化斷裂得到末端的D-羰基酸部分，其中經(jīng)過(guò)了多次的保護(hù)基轉(zhuǎn)換，最后經(jīng)近20步反應(yīng)完成了唾液酸的合成。第12頁(yè)/共17頁(yè)天然產(chǎn)物提取法

以天然產(chǎn)物為原料，如乳清、酪蛋白、豬血、雞蛋黃等，經(jīng)水解、脂肪提取、層析、結(jié)晶等步驟合成。第13頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸的檢測(cè)分光光度法硫代巴比妥酸法游離唾液酸被過(guò)碘酸氧化生成β-甲酰丙酮酸，后者與2-硫代巴比妥酸反應(yīng)生成有色物質(zhì)，在549nm處有最大吸收峰。間苯二酚-過(guò)碘酸/鹽酸法由于過(guò)碘酸氧化以酮苷形式結(jié)合的唾液酸生成結(jié)合的醛，后者可與間苯二酚生成很強(qiáng)的顏色，其最大吸收峰在630nm。NeuNAc及NeuNG的克分子消光系數(shù)各為27900及27000，比單獨(dú)用間苯二酚的靈敏度要高三倍，而且由酮苷結(jié)合的唾液酸生成的醛37℃經(jīng)過(guò)碘酸進(jìn)一步氧化時(shí)是穩(wěn)定的，由游離唾液酸生成的醛則被破壞，而后者在0℃是穩(wěn)定的，根據(jù)上述特性可以測(cè)定結(jié)合、游離及總唾液酸量。第14頁(yè)/共17頁(yè)HPLC(高性能液體色譜)法通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠將游離狀態(tài)和低聚糖結(jié)合狀態(tài)的唾液酸與糖類分離開(kāi)來(lái)。將得到的唾液酸在Cu2+和Cr3+協(xié)同催化下與間苯二酚發(fā)生反應(yīng)，生成的有色物質(zhì)用乙酸丁酯-正丁醇萃取，并在615/610nm處測(cè)定吸光度。薄層層析法展開(kāi)劑:正丙醇∶飽和氨水∶水=6∶1∶2·5;顯色劑:間苯二酚-鹽酸試劑(與唾液酸分析試劑相同)。將點(diǎn)好樣品的層析板置于盛有展開(kāi)劑的層析缸，密閉式展開(kāi)，溶劑前沿距層析板上端1cm時(shí)取出，在室溫下?lián)]發(fā)干，用噴霧器噴灑顯色劑，再在110℃烘箱顯色，待層析板呈現(xiàn)藍(lán)紫色斑點(diǎn)取出。第15頁(yè)/共17頁(yè)唾液酸的應(yīng)用SA也是一種天然的大腦營(yíng)養(yǎng)素，它能促進(jìn)嬰兒的記憶和智力發(fā)育。在奶粉中添加唾液酸可能促進(jìn)突觸的形成，幫助寶寶的記憶