臨床血液學(xué)檢驗：實驗四 POXandPAS

實驗三過氧化物酶染色（POX）過碘酸-雪夫反應(yīng)（PAS）細(xì)胞化學(xué)染色

CytochemicalStaining實質(zhì)是原位顯示細(xì)胞成分結(jié)構(gòu)，常為不移動的有機化學(xué)物。細(xì)胞化學(xué)染色包括三個步驟：固定化學(xué)染色（包括復(fù)染）化學(xué)定量過氧化物酶染色

PeroxidaseStaining

（POX）1.原理：

傳統(tǒng)方法----聯(lián)苯胺法

過氧化氫過氧化物酶新生態(tài)氧聯(lián)苯胺

聯(lián)苯胺藍(lán)亞硝基鐵氰化鈉穩(wěn)定的藍(lán)色化合物然后10分鐘操作步驟新鮮涂片滴加A液3滴（覆蓋標(biāo)本即可）滴加等量B液3滴,吹勻水洗，甩干甩干，鏡檢滴加C液3滴，D液6滴混勻5分鐘注意事項（1）標(biāo)本要新鮮（2）試劑要室溫，用后要蓋好，防止揮發(fā)（3）加試劑要充分混勻，使染色均勻結(jié)果判斷（100×）胞漿中出現(xiàn)紅棕色至藍(lán)黑色顆粒為陽性反應(yīng)（—）無顆粒沉著（弱+）顆粒細(xì)小，分布稀疏（+）顆粒較粗常呈局灶性分布（++）顆粒粗大分布較密占胞漿1/2~2/3（+++）顆粒粗大，呈團塊狀分布（++++）顆粒布滿細(xì)胞，可覆蓋胞核正常參考值

正常人淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞、巨核細(xì)胞、成熟嗜堿性粒細(xì)胞，均無POX；粒細(xì)胞系統(tǒng)：早幼粒以下階段細(xì)胞均為陽性，且逐漸加強，嗜酸粒細(xì)胞陽性最強單核細(xì)胞內(nèi)POX呈弱陽性。臨床意義

1.輔助鑒別急性白血病的類型急性粒細(xì)胞白血病AML（+）急性淋巴細(xì)胞白血病ALL（-）(陽性率<3％)

急性單核細(xì)胞白血病AMOL（-/±）

2.輔助鑒別急性早幼粒細(xì)胞白血?。ˋPL)、急性單核細(xì)胞白血?。ˋMOL)、惡性組織細(xì)胞?。∕H)A:APLB:AMMLC:AMOLD:ALL過碘酸是一種氧化劑，能使細(xì)胞內(nèi)含有乙二醇的糖類氧化產(chǎn)生雙醛基，醛基與schiff試劑中的品紅結(jié)合，形成紫紅色化合物，定位于含有多糖成分的部位。PeriodicAcid-Schiff(PAS)reaction過碘酸－雪夫反應(yīng)（糖原染色)操作步驟涂片滴加A液3滴固定60秒（DW沖洗，待干）滴加B液（高碘酸）3滴氧化10min，DW沖洗，待干滴加C液（雪夫染液）3滴氧化15min，DW沖洗待干滴加D液（甲綠）3滴復(fù)染5分鐘鏡檢DW沖洗待干結(jié)果陽性反應(yīng)：胞質(zhì)內(nèi)染紅色或紫紅色，呈彌散狀、顆?；驂K狀。胞核染成綠色。PAS反應(yīng)沉淀顆粒特點粒系統(tǒng)（+）細(xì)顆粒狀或均勻紅色淋巴系統(tǒng)少數(shù)（+）（<20％）粗顆粒狀或塊狀單核系統(tǒng)（+）細(xì)顆粒狀紅系（-）巨核系（+）顆粒狀或塊狀正常血細(xì)胞PAS染色特點

臨床意義1.鑒別淋巴系統(tǒng)增生的性質(zhì)惡性增生時多呈強陽性---ALL、CLL、淋巴瘤（紅色顆?；驂K狀）2.鑒別紅系增生的性質(zhì)紅血病、紅白血病為強陽性地中海貧血、IDA、MDS為陽性巨幼細(xì)胞性貧血、HA、AA陰性3.急粒大多數(shù)陰性/少數(shù)陽性（均勻分布顆粒）4.巨核系（血小板）陽性，有助于M7的診斷5.Gaucher

細(xì)胞(+)，Niemman-pick

細(xì)胞(-/±)注意事項：1.試劑要在室溫2.雪夫試劑及時使用3.結(jié)果及時觀察，放置1周褪色CLLALLALLALL中粗

粗粒散在分布A:紅白血病B:巨幼貧M6PAS染色POXPAS然后10分鐘新鮮涂片滴加A液3滴（覆蓋標(biāo)本即可）滴加等量B液3滴,吹勻水洗，甩干甩干，鏡檢滴加C液3滴，D液6滴混勻5分鐘涂片滴加A液3滴固定60秒（DW沖洗，待干）滴加B