農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)解析

農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)解析第1頁(yè)/共40頁(yè)2主要內(nèi)容前言國(guó)內(nèi)現(xiàn)行農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法農(nóng)殘快速檢測(cè)方法展望第2頁(yè)/共40頁(yè)3一、前言

隨著人們環(huán)境意識(shí)的不斷加強(qiáng)，由農(nóng)藥引起的食品安全問題也越來(lái)越受到人們的關(guān)注。為了保障消費(fèi)者的安全和健康，提高農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全水平，增強(qiáng)農(nóng)業(yè)產(chǎn)品的國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力，我國(guó)政府決定加強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的監(jiān)控，建立健全農(nóng)藥殘留的檢測(cè)體系，實(shí)施對(duì)蔬菜、瓜果、茶葉生產(chǎn)全過(guò)程的農(nóng)藥監(jiān)控，從源頭抓起，加強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)地檢測(cè)，把住農(nóng)產(chǎn)品的市場(chǎng)準(zhǔn)入關(guān)。第3頁(yè)/共40頁(yè)4

（一）農(nóng)藥概念農(nóng)藥(pesticides)是指農(nóng)藥是指用于預(yù)防、消滅或者控制危害農(nóng)業(yè)、林業(yè)的病、蟲、草及其他有害生物，以及有目的地調(diào)節(jié)植物、昆蟲生長(zhǎng)的藥物的通稱。

現(xiàn)在農(nóng)藥不僅應(yīng)用于農(nóng)業(yè)，而且也廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)、林業(yè)和公共衛(wèi)生事業(yè)等方面。第4頁(yè)/共40頁(yè)5（二）農(nóng)藥殘留的概念

農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于生物體、食品(農(nóng)副產(chǎn)品)和環(huán)境中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。

第5頁(yè)/共40頁(yè)6（三）農(nóng)藥的分類

1.按化學(xué)成分可分為有機(jī)氯、有機(jī)磷、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類及砷、汞、銅、硫磺等制劑。

2.按用途可分為殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和糧食熏蒸劑等。第6頁(yè)/共40頁(yè)7（四）農(nóng)藥的毒性及種類農(nóng)藥除了可造成人體的急性中毒外，絕大多數(shù)對(duì)人體產(chǎn)生的慢性危害，多是通過(guò)污染食品的形式造成。

某些農(nóng)藥對(duì)人和動(dòng)物的遺傳和生殖造成影響，產(chǎn)生畸形和引起癌癥等方面的毒素作用。第7頁(yè)/共40頁(yè)81、有機(jī)氯農(nóng)藥容易在人體內(nèi)蓄積慢性毒性作用，主要表現(xiàn)在侵害肝、腎及神經(jīng)系統(tǒng)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)有致畸、致癌作用我國(guó)1983年停止生產(chǎn)，1984年停止使用這類農(nóng)藥

第8頁(yè)/共40頁(yè)9六六六，BHC滴滴涕，DDT第9頁(yè)/共40頁(yè)10滴滴涕：減少了蛋殼的厚度，從而降低了小鳥的孵出率。二惡英：進(jìn)入機(jī)體后幾乎不被排泄、沉積在肝臟和脂肪組織中。屬于劇毒物質(zhì)，毒性比氰化鉀高50—1000倍，致癌毒性比黃曲霉毒素高10倍，會(huì)引起基因突變，影響繁殖力和智力發(fā)育。

第10頁(yè)/共40頁(yè)11早期的高效高毒品種：對(duì)硫磷（1605）、甲拌磷（3911）、內(nèi)吸磷（1059）后期使用得較多的為高效低毒低殘留的品種，如：樂果、敵百蟲、殺螟松、倍硫磷毒性極低的馬拉硫磷、雙硫磷、氯硫磷、鋅硫磷、碘硫磷、地亞農(nóng)、滅蜈松2、有機(jī)磷農(nóng)藥第11頁(yè)/共40頁(yè)12有機(jī)磷農(nóng)藥主要品種甲胺磷乙酰甲胺磷第12頁(yè)/共40頁(yè)13樂果一六0五第13頁(yè)/共40頁(yè)14急性毒性：有機(jī)磷農(nóng)藥化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，分解快，在作物中殘留時(shí)間短。抑制血液和組織中膽堿酯酶的活性，引起乙酰膽堿在體內(nèi)大量積聚而出現(xiàn)一系列神經(jīng)中毒癥狀，如神經(jīng)功能紊亂、出汗、震顫，精神錯(cuò)亂、語(yǔ)言失常等。第14頁(yè)/共40頁(yè)15主要表現(xiàn)為植物性食物殘留，尤其是含有芳香物質(zhì)的植物如：水果、蔬菜，特別是葉菜類如小白菜、大白菜、雞毛菜、甘藍(lán)、芹菜、韭菜、芥菜、花菜、綠花菜、茼蒿、枸杞菜和黃瓜等第15頁(yè)/共40頁(yè)163、氨基甲酸酯類農(nóng)藥西維因、殺滅威、速滅威、葉蟬散等除草劑：敵草隆、敵稗在作物上的殘留時(shí)間為4d，在動(dòng)物的肌肉和脂肪中的明顯蓄積時(shí)間約為7d殘留量很低第16頁(yè)/共40頁(yè)17

氨基甲酸酯類殺蟲劑進(jìn)入人體內(nèi)，在胃中酸性條件下可與食物中的亞硝酸鹽和硝酸鹽反應(yīng)生成亞硝基化合物，具有致癌性。第17頁(yè)/共40頁(yè)

分析步驟

所需設(shè)備1.采集樣品2.稱取樣品分析天平3.搗碎樣品高速組織搗碎機(jī)4.樣品的提取分離漏斗等5.樣品的凈化SPE、SPME等6.樣品的濃縮氮吹儀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等7.樣品的定性、定量測(cè)定GC、HPLC、GC-MS等（五）傳統(tǒng)農(nóng)殘分析技術(shù)一般過(guò)程第18頁(yè)/共40頁(yè)19

優(yōu)點(diǎn)

缺點(diǎn)能夠?qū)γ恳环N農(nóng)藥進(jìn)行準(zhǔn)確的定性和定量檢驗(yàn)分析周長(zhǎng)長(zhǎng)檢驗(yàn)費(fèi)用高需要消耗大量的有機(jī)溶劑、容易造成環(huán)境污染需要使用GC、HPLC等昂貴的大型儀器設(shè)備對(duì)檢驗(yàn)分析人員的化學(xué)分析水平有較高要求檢驗(yàn)分析過(guò)程繁瑣、影響因子復(fù)雜、不易掌控（六）傳統(tǒng)農(nóng)殘分析技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)第19頁(yè)/共40頁(yè)20

傳統(tǒng)的農(nóng)殘化學(xué)分析主要是氣相或液相色譜等儀器

優(yōu)點(diǎn)：敏感(10－l2

～10－6mol／L)、準(zhǔn)確

缺點(diǎn)：操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)及成本高。難以滿足需求－－怎么辦？－－發(fā)展適合我國(guó)的快速檢測(cè)技術(shù)第20頁(yè)/共40頁(yè)21生化檢測(cè)生物檢測(cè)化學(xué)比色法

二、適合我國(guó)的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法酶抑制法免疫分析法發(fā)光菌檢測(cè)法敏感家蠅檢測(cè)法速測(cè)卡速測(cè)儀主要為酶免疫法第21頁(yè)/共40頁(yè)22酶抑制法

酶抑制技術(shù)是研究比較成熟、應(yīng)用最廣泛快速的農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)，是根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶（AChE)的特異性生化反應(yīng)建立起來(lái)的農(nóng)藥殘留的微量和痕量快速檢測(cè)技術(shù)。第22頁(yè)/共40頁(yè)231、速測(cè)卡法第23頁(yè)/共40頁(yè)24速測(cè)卡檢測(cè)結(jié)果“-”陰性（藍(lán)色）“+”弱陽(yáng)性（淡藍(lán)）“++”強(qiáng)陽(yáng)性（白色）第24頁(yè)/共40頁(yè)252、速測(cè)儀原理:在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。酶催化乙酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)。用分光光度計(jì)在412nm處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化，計(jì)算出抑制率，通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。第25頁(yè)/共40頁(yè)26農(nóng)藥殘留快速測(cè)試儀第26頁(yè)/共40頁(yè)27速測(cè)儀檢測(cè)結(jié)果

判定依據(jù)

說(shuō)明抑制率小于等于50

合格抑制率大于50超標(biāo)，說(shuō)明含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制率與農(nóng)藥殘留量成正相關(guān)，抑制率越高說(shuō)明殘留量越高第27頁(yè)/共40頁(yè)28免疫分析技術(shù)

免疫分析技術(shù)是將免疫反應(yīng)與現(xiàn)代測(cè)試手段相結(jié)合而建立的超微量分析技術(shù)，是基于抗原抗體特異性結(jié)合和反應(yīng)為基礎(chǔ)的分析方法。目前應(yīng)用于農(nóng)殘檢測(cè)的是酶免疫分析(EIA)和放射性免疫分析(RIA)。其中酶聯(lián)免疫分析技術(shù)應(yīng)用最為普遍。第28頁(yè)/共40頁(yè)293、酶聯(lián)免疫技術(shù)

ELISA是一種以酶作為標(biāo)記物的免疫分析方法，也是目前應(yīng)用最廣泛的免疫分析方法之一，它將酶標(biāo)記在抗體／抗原分子上形成酶標(biāo)抗體／酶標(biāo)抗原，酶作用于能呈現(xiàn)出顏色的底物，通過(guò)儀器或肉眼進(jìn)行辨別。第29頁(yè)/共40頁(yè)30ELISA法基本原理是預(yù)先結(jié)合在固相載體上的抗體或抗原分子與樣品中的抗原或抗體分子在一定條件下進(jìn)行免疫學(xué)反應(yīng)。該法因不需昂貴儀器設(shè)備，對(duì)人體無(wú)害等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛采用，具有靈敏、特異、快速、穩(wěn)定以及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。第30頁(yè)/共40頁(yè)31

目前，ELISA方法常用的固相載體是96孔聚苯乙烯酶標(biāo)板，常用的酶是辣根過(guò)氧化物酶，常用的底物是鄰苯二胺和四甲基聯(lián)苯胺等。酶標(biāo)板u型96孔第31頁(yè)/共40頁(yè)324、發(fā)光菌檢測(cè)法

農(nóng)藥與細(xì)菌作用后可影響細(xì)菌的發(fā)光程度，通過(guò)細(xì)菌發(fā)光情況，可測(cè)出農(nóng)藥殘留量。

此方法簡(jiǎn)便但是特異性差第32頁(yè)/共40頁(yè)335、敏感家蠅檢測(cè)法敏感家蠅對(duì)殺蟲劑具有敏感性，記錄家蠅存活情況，根據(jù)家蠅的死亡率可知農(nóng)藥殘留情況。該技術(shù)方法直接、過(guò)程簡(jiǎn)單、容易掌握，但定性粗糙，只對(duì)少數(shù)農(nóng)藥有效，而且由于其他生物對(duì)不同農(nóng)藥的毒性反應(yīng)與人畜可能不同，因此影響對(duì)農(nóng)藥殘留量的判斷。如家蠅對(duì)毒性較低的除蟲菊酯類敏感，遠(yuǎn)超過(guò)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類中毒或高毒的農(nóng)藥。第33頁(yè)/共40頁(yè)346、化學(xué)比色法

目前常用的化學(xué)比色法包括各種檢測(cè)試劑和試紙，兩者都是利用迅速產(chǎn)生明顯顏色的化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)待測(cè)物質(zhì)，可通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)比色卡比較進(jìn)行目視定性或半定量分析。

第34頁(yè)/共40頁(yè)35

化學(xué)比色分析法與一般的儀器分析方法相比，具有價(jià)格低，操作相對(duì)簡(jiǎn)便，結(jié)果顯示直觀，一次性使用，不需檢修維護(hù)，有一定的靈敏度和專一性等優(yōu)點(diǎn)。隨著檢測(cè)儀器的不斷發(fā)展，與其相配套的微型檢測(cè)儀器也相應(yīng)出現(xiàn)。如與試劑檢測(cè)方法相配套的微型光電比色計(jì)目前已發(fā)展得比較成熟。第35頁(yè)/共40頁(yè)36三、農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)展望

一些快速速檢測(cè)方法與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法和儀器法相比具有操作簡(jiǎn)單、快速的優(yōu)點(diǎn)，但由于大多數(shù)快速檢測(cè)方法在食品樣品前處理、操作規(guī)范性方面還有許多待完善之處，目前還只能作為快速篩選的手段而不能作為最終診斷的依據(jù)，兼具快速和準(zhǔn)確兩大優(yōu)點(diǎn)是快速檢測(cè)方法追求的目標(biāo)。第36頁(yè)/共40頁(yè)37

目前的食品現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)主要呈現(xiàn)4大趨勢(shì)：1由于高新技術(shù)的應(yīng)用，檢測(cè)能力不斷提高，檢測(cè)靈敏度越來(lái)越高，殘留物的超痕量分析水平已達(dá)到了10-7g2檢測(cè)速度不斷加快，智能化芯片和高速電子器件與檢測(cè)器的使用，使食品安全檢測(cè)周期大大縮短3選擇性不斷提高，高效分離分段、各種化學(xué)和生物選擇性傳感器的使用，使在復(fù)雜混合體中直接進(jìn)行污染物選擇性測(cè)定成為可能；4由于微電子技術(shù)、生物傳感器、智能制造技術(shù)應(yīng)用，檢測(cè)儀器向小型化、便攜化方向發(fā)展，使實(shí)時(shí)、現(xiàn)場(chǎng)、動(dòng)態(tài)、快速檢測(cè)正在成為現(xiàn)實(shí)。針對(duì)我國(guó)的特殊國(guó)情，目前我國(guó)基層單位很多速測(cè)技術(shù)的應(yīng)用還只處于定性或半定量水平，易用型的小型化儀器的應(yīng)用是目前和今后快速檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)。

第37頁(yè)/共40頁(yè)38

儀器分析技術(shù)中的色譜技術(shù)被認(rèn)為是最經(jīng)典、最常用的檢測(cè)技術(shù)。傳統(tǒng)色譜檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)、成本高，需要加快在樣品預(yù)處理技術(shù)和檢測(cè)技術(shù)方面的研究。如樣本預(yù)