食品中金黃色葡萄球菌的檢測

課程名稱：微生物檢驗檢測學(xué)習(xí)項目5—食品中金黃色葡萄球菌的檢測當(dāng)今社會生活水平大大提高，但是生活質(zhì)量卻在日趨月下，一系列的食品健康問題頻頻爆出。思念水餃“病菌門”風(fēng)波還未平息，另一知名品牌“三全”的速凍水餃也被查出金黃色葡萄球菌超標(biāo)。2011年11月，三全水餃在第三季度流通環(huán)節(jié)食品抽檢中，發(fā)現(xiàn)有14批次的產(chǎn)品金黃色葡萄球菌不合格。在現(xiàn)有的國家標(biāo)準(zhǔn)中，“金黃色葡萄球菌”是“不得檢出”（即不得含有）的項目。那么黃色葡萄球菌是什么呢？他對人體都多大危害呢？目錄信息資訊方案制定項目實施結(jié)果評價01信息資訊02方案制定03項目實施04結(jié)果評價第一步信息資訊01什么是大腸菌群02認(rèn)識檢測流程03菌落計數(shù)第一步信息資訊01什么是金黃色葡萄球菌02認(rèn)識檢測流程03結(jié)果報告01認(rèn)識金黃色葡萄球菌葡萄球菌的分類以菌落色素分：金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、檸檬色葡萄球菌；按生理化學(xué)組成：金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌01認(rèn)識金黃色葡萄球菌培養(yǎng)特性需氧及兼性厭氧。在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長良好，培養(yǎng)24h后，形成中等大小、圓形、表面光滑、無色半透明、邊緣整齊的菌落，其菌落特征亦與大腸桿菌相似（無糞臭味）。01認(rèn)識金黃色葡萄球菌生物學(xué)特性球形或稍呈橢圓形，直徑1.0um左右，排列成葡萄狀,或雙球狀或鏈球狀。葡萄球菌無鞭毛，不能運動。無芽胞，除少數(shù)菌株外一般不形成莢膜。易被常用的堿性染料著色，革蘭氏染色為陽性。01認(rèn)識金黃色葡萄球菌生化特性能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、甘露醇和山梨醇并產(chǎn)氣；不發(fā)酵乳糖、蔗糖和側(cè)金盞花醇；不產(chǎn)吲哚、V-P反應(yīng)陰性；不水解尿素和對苯丙氨酸不脫氨。02認(rèn)識檢測流程故事（1）檢測的意義葡萄球菌可通過多種途徑侵入機(jī)體，導(dǎo)致皮膚或器官的多種感染，甚至敗血癥。由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒，在進(jìn)食含腸毒素食物后1～6小時即可出現(xiàn)癥狀，如惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉，大多數(shù)病人于數(shù)小時至1日內(nèi)恢復(fù)。02認(rèn)識檢測流程（2）檢測流程：檢樣（樣品處理）——增菌——平板分離——生化試驗——革蘭氏染色、鏡檢03結(jié)果觀察依據(jù)：GB4789.10-2010

平板分離Baird-Parker平板血平板血漿凝固酶試驗第二步方案制定01方案制定02階段成果預(yù)測03方案檢查01方案制定有位秀才第三次進(jìn)京趕考，住在一個經(jīng)常住的店里?？荚嚽皟商焖隽巳齻€夢，第一個夢是夢到自己在墻上種白菜，第二個夢是下雨天，他戴了斗笠還打傘，第三個夢是夢到跟心愛的表妹脫光了衣服躺在一起，但是背靠著背。根據(jù)國標(biāo)，制定金黃色葡萄球菌檢測流程02階段成果預(yù)測03方案檢查組間互評第三步項目實施01檢測準(zhǔn)備02樣品檢測03結(jié)果報告01檢測準(zhǔn)備——乳粉中金黃色葡萄球菌檢測培養(yǎng)基7.5%NaCl肉湯、Baird-Parder平板、血平板、BHI藥品革蘭氏染色液一套、生理鹽水、NaOH、HCl設(shè)備生物安全柜、顯微鏡、恒溫培養(yǎng)箱（36℃）器皿移液管（1支10ml）、滴管小試管2支、均質(zhì)杯1個、錐形瓶(250mL)1個、平皿2套、載玻片1片其他：試管架、酒精燈、消毒缸、報紙（一大一?。⑾炊?、記號筆、消毒棉球注：桌面物品擺放有序且在指定位置，如記號筆和消毒棉球在小托盤里所準(zhǔn)備的物品歸類擺放，如吸管筒、培養(yǎng)皿放入烘箱（一）器材準(zhǔn)備清單02樣品檢測——餅干中菌落總數(shù)的測定02樣品檢測——增菌7.5%NaCl肉湯目的：（1）使處于瀕死狀態(tài)的沙門氏菌恢復(fù)活力（2）增加數(shù)量（樣品中的所有細(xì)菌數(shù)量）方法：25克樣品+225毫升7.5%NaCl肉湯→36℃±1℃培養(yǎng)18～24小時02樣品檢測——平板分離采用四區(qū)劃線法，將培養(yǎng)好的增菌液分別接種于血平板和Baird-Parker平板。置于合適的溫度下培養(yǎng)，觀察現(xiàn)象并及時記錄。02樣品檢測——生化試驗①從血平板或Baird-Parker平板上挑取可疑菌落接種5mLBHI，36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。②吸取0.5mL生理鹽水于凍干兔血漿中，振蕩使之溶解，制成血漿液。再加入培養(yǎng)后的BHI0.2mL～0.3mL，振蕩搖勻，36℃±1℃恒溫箱或水浴鍋內(nèi)，每半小時觀察一次，觀察