微生物學(xué)消毒與滅菌

關(guān)于微生物學(xué)消毒與滅菌1第1頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四2消毒（disinfection）殺死物體上病原微生物的方法，并不一定能殺死含芽胞的細(xì)菌或非病原微生物。滅菌（sterilization）

殺死物體上所有微生物（包括病原菌和非病原菌及其芽胞）的方法。抑菌（bacteriostasis）抑制細(xì)菌生長繁殖的方法防腐（antisepsis）

防止或抑制體外細(xì)菌生長繁殖的方法。無菌（asepsis）

不存在活菌的意思。無菌技術(shù)是指在進(jìn)行外科手術(shù)或分離、轉(zhuǎn)種及培養(yǎng)時(shí)防止其他微生物污染實(shí)驗(yàn)材料的操作方法。

基本概念:第2頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四3第一節(jié)物理消毒滅菌法熱力滅菌法輻射滅菌法濾過除菌法超聲波滅菌法干燥與低溫抑菌法第3頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四4一、熱力滅菌法原理高溫使菌體蛋白質(zhì)、核酸、酶等凝固或變性失活。方法

濕熱滅菌

干熱滅菌第4頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四51.干熱滅菌法（Dryheat）第5頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四6電熱干烤箱

第6頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四7巴氏消毒法(pasteurization)

61.1~62.8℃30min/71.7℃15~30s,用于牛奶、酒類的消毒.煮沸法

一般細(xì)菌100℃5min,芽孢1~2h，加入2％碳酸鈉可用于消毒食具、刀剪、注射器。流動(dòng)蒸汽消毒法

100℃蒸汽15~30min芽孢不能全部殺滅。間歇蒸汽消毒法

100℃蒸汽15~30min,37℃過夜,100℃蒸汽15~30min，如此連續(xù)三次以上.適于不耐高熱的含糖、牛奶等培養(yǎng)基。高壓蒸汽消毒法

103.4kPa蒸汽壓,121.3℃,15~20min，適于培養(yǎng)基、生理鹽水、手術(shù)敷料等耐高溫、耐濕熱物品的滅菌。2.濕熱滅菌法（Moistheat）第7頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四8手提式高壓蒸汽滅菌器立式高壓蒸汽滅菌器第8頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四9立式智能高壓蒸汽滅菌器第9頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四10干熱滅菌與濕熱滅菌穿透力的比較加熱方式傳導(dǎo)

介質(zhì)溫度（℃）加熱時(shí)間（h）透過布層溫度（℃）結(jié)果20層40層100層干熱空氣130～1404867270以下滅菌不完全濕熱飽和

蒸汽105.3310110l10l滅菌完全第10頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四11二、輻射殺菌法（Radiation）（一）紫外線：波長265～266nm殺菌原理：主要作用于細(xì)菌DNA，使相鄰兩個(gè)胸腺嘧啶共價(jià)結(jié)合形成二聚體，從而干擾DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致細(xì)菌變異和死亡。用途與缺陷：穿透力弱，只能用于手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室的空氣消毒和不耐熱的物品表面消毒。第11頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四12（二）電離輻射：包括x射線和γ射線，有較高的能量與穿透力。用于食品、一次性醫(yī)用塑料制品的消毒。（三）微波：可穿透玻璃、塑料薄膜和陶瓷等介質(zhì)，但不能穿透金屬。常用于非金屬器械消毒，實(shí)驗(yàn)室用品、食品餐具、藥杯等消毒。第12頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四13三、過濾除菌法是用物理阻留的方法除去液體和氣體的微生物。主要適合于不耐高溫的血清、抗生素、抗毒素、藥液以及空氣除菌。不能去除病毒、支原體、衣原體等。第13頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四14濾菌器

杯式過濾器圓筒式過濾器第14頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四15第15頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四16四、超聲波殺菌法

目前主要用于粉碎細(xì)胞，以提取細(xì)胞組分或制備抗原等。第16頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四17五、干燥與低溫抑菌法

干燥法常用于保存食物低溫可使細(xì)菌的新陳代謝減慢，故常用作保存細(xì)菌菌種，冷凍真空干燥法是目前保存菌種的最好方法。第17頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四18第二節(jié)化學(xué)消毒滅菌法第18頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四19一、消毒劑的主要種類根據(jù)殺滅微生物作用的能力高效消毒劑：戊二醛、甲醛中效消毒劑：乙醇、碘伏低效消毒劑：新潔爾滅、洗必泰

第19頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四20根據(jù)殺菌機(jī)制促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固

酚類(高濃度)、醇類等干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝

某些氧化劑、重金屬鹽類等損傷細(xì)菌細(xì)胞膜

酚類(低濃度)、表面活性劑等第20頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四21根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)酚類－－石炭酸（苯酚）、來蘇（甲酚皂）、洗必泰（氯已定）等醇類－－70%~75%乙醇?xì)⒕ψ顝?qiáng)重金屬鹽類－－紅汞等氧化劑－－過氧化氫、過氧乙酸等表面活性劑－－增加菌細(xì)胞表面張力，并增加其通透性使細(xì)菌破裂，如新潔爾滅（苯扎溴銨）等烷化劑－－甲醛等，殺菌力強(qiáng)，但毒性大第21頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四22二、消毒劑的應(yīng)用第22頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四231.患者排泄物與分泌物

糞、尿、膿、痰等，多用等量的20%漂白粉、5%石炭酸或2%來蘇兒攪拌均勻，作用2h再傾去。廁所、陰溝的消毒多采用生石灰。第23頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四24

2.皮膚（手）外科手術(shù)常采用0.1%新潔而滅、0.01%洗必泰泡手。傳染科醫(yī)護(hù)人員手的消毒常用0.2%-0.4%過氧乙酸浸泡,可以殺滅乙肝病毒。注射或手術(shù)部位局部消毒用2.5%碘酒、70%酒精。皮膚淺表創(chuàng)傷可用2%紅汞。第24頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四25

3.粘膜預(yù)防新生兒淋球菌性眼結(jié)膜炎：1%硝酸銀滴眼口腔粘膜消毒：3%過氧化氫沖洗尿道、陰道、膀胱：0.1%高錳酸鉀或0.01%洗必泰等。第25頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四26

4.水

煮沸法自來水用氯氣消毒漂白粉第26頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四275.空氣常用甲醛加熱或甲醛混合高錳酸鉀熏蒸：甲醛40ml加高錳酸鉀30g/m3，熏蒸12～24h。居室空氣消毒可用5-10ml醋酸/m3加等量水加熱蒸發(fā)。肝炎病房可用3g/m3過氧乙酸熏蒸90min。第27頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四28

6.食具的消毒

煮沸15-30min

0.5%~1%漂白粉或過氧乙酸液浸泡30~60min。7.蔬菜、瓜果采用0.1%高錳酸鉀浸泡15min。第28頁，共31頁，2023年，2月20日，星期四298.溫度計(jì)70%～75％酒精浸泡30min。肝炎者用2%碘酒浸泡