實驗五微生物細胞大小和數(shù)量的測定

實驗五微生物細胞大小和數(shù)量的測定第一頁，共十二頁，2022年，8月28日

微生物細胞大小和數(shù)量的測定目的要求實驗材料實驗程序思考題第二頁，共十二頁，2022年，8月28日目的要求學習使用目鏡測微尺和鏡臺測微尺在顯微鏡下測定微生物大小的方法。學習使用血球記數(shù)板測定微生物數(shù)量的方法。第三頁，共十二頁，2022年，8月28日實驗材料顯微鏡、目鏡測微尺、鏡臺測微尺、細菌染色片、血球記數(shù)板、酵母菌懸液、蓋玻片、無菌滴管、西水紙、擦鏡紙、香柏油、二甲苯。第四頁，共十二頁，2022年，8月28日實驗程序測定微生物的大小測定微生物數(shù)量第五頁，共十二頁，2022年，8月28日實驗程序Ⅰ（測定微生物的大?。y定的工具：目鏡測微尺鏡臺測微尺第六頁，共十二頁，2022年，8月28日實驗程序Ⅱ（測定微生物的大?。?/p>

目鏡測微尺的校正：在高倍鏡下，看清鏡臺測微尺的刻度后，轉動目鏡，使目鏡測微尺與鏡臺測微尺的刻度平行，移動推動器，使目鏡測微尺的0點與鏡臺測微尺的某一刻度重合，然后，仔細尋找兩尺第二個完全重合的刻度。計算兩刻度間目鏡測微尺的格數(shù)和鏡臺測微尺的格數(shù)。由于鏡臺測微尺的刻度每格長10μm，所以可得：目鏡測微尺每格長度（μm）=（鏡臺測微尺格數(shù)×10）/目鏡測微尺格數(shù)注意：校正目鏡測微尺必須針對特定的顯微鏡和附件（特定的接物鏡、接目鏡、鏡筒長度等）進行，而且只能在這特定的情況下才可重復使用。菌體大小的測定：取下鏡臺測微尺，將細菌染色標本置于載物臺上，然后在油鏡下用目鏡測微尺測量菌體的長和寬。第七頁，共十二頁，2022年，8月28日實驗程序Ⅲ（測定微生物數(shù)量）方法：活菌計數(shù)法——平板菌落計數(shù)法；總菌計數(shù)法——血球計數(shù)板或霍瑟（PeroffHausser）細菌計數(shù)板（二者原理和部件相同，只是厚薄不同而已）。

第八頁，共十二頁，2022年，8月28日實驗程序Ⅳ1（測定微生物數(shù)量）本實驗用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌的數(shù)量1.

取清潔無油的血球計數(shù)板，在計數(shù)室上面加蓋玻片。

2.

取酵母菌液，搖勻，用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入，計數(shù)室內(nèi)不得有氣泡。

3.

靜止5min后，用低倍鏡觀察并將計數(shù)室移至視野中央。

4.

在高倍鏡下計數(shù)：隨機計數(shù)五個中格的平均值，然后求得每個中格的平均值。乘上16（或25）就得出一大格中的總菌數(shù)，最后再換算到每mL菌液中的含菌數(shù)。第九頁，共十二頁，2022年，8月28日

實驗程序IV25.

計算方法：

6.注意事項：壓在方格線上的菌體，以壓在底線和右側線上的菌體計入本格內(nèi)；遇到有芽體的酵母時，若芽體和母體同等大，就按單個酵母計數(shù)。

7.

計數(shù)完畢后，血球計數(shù)板要立即清洗干凈，并用吸水紙吸干，最后用擦鏡紙擦干凈，并放回盒內(nèi)。

（X1+X2+X3+X4+X5）5X25（或16）X10X1000x稀釋倍數(shù)

酵母菌細胞數(shù)/mL=第十頁，共十二頁，2022年，8月28日思考題