神經(jīng)干動(dòng)作電位及其速度測(cè)定

神經(jīng)干動(dòng)作電位及其速度測(cè)定第一頁，共三十一頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)神經(jīng)干標(biāo)本的制備。觀察坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動(dòng)作電位、雙向性傳導(dǎo)并測(cè)定其傳導(dǎo)速度。觀察機(jī)械損傷對(duì)神經(jīng)興奮和傳導(dǎo)的影響學(xué)習(xí)絕對(duì)不應(yīng)期和相對(duì)不應(yīng)期的測(cè)定方法了解蛙類坐骨神經(jīng)干產(chǎn)生動(dòng)作電位后其興奮性的規(guī)律性變化第二頁，共三十一頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)原理用電刺激神經(jīng)，在刺激電極的負(fù)極下神經(jīng)纖維膜內(nèi)產(chǎn)生去極化，當(dāng)去極化達(dá)到閾電位，膜上產(chǎn)生一次可傳導(dǎo)的快速電位反轉(zhuǎn)，即動(dòng)作電位神經(jīng)干由許多神經(jīng)纖維組成。其動(dòng)作電位是以膜外記錄方式記錄到的復(fù)合動(dòng)作電位如果兩個(gè)引導(dǎo)電極置于興奮性正常的神經(jīng)干表面，興奮波先后通過兩個(gè)電極處，便引導(dǎo)出兩個(gè)方向相反的電位波形，稱雙相動(dòng)作電位第三頁，共三十一頁，2022年，8月28日雙相動(dòng)作電位BiphasicActionPotential興奮區(qū)細(xì)胞外引導(dǎo)電極檢流計(jì)第四頁，共三十一頁，2022年，8月28日＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－動(dòng)作電位的傳導(dǎo)ConductionofAP

動(dòng)作電位以局部電流的形式傳導(dǎo)＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－＋＋＋＋＋＋＋＋－－－－局部電流第五頁，共三十一頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)原理：如果兩個(gè)引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)纖維完全損傷，興奮波只通過第一個(gè)引導(dǎo)電極，不能傳至第二個(gè)引導(dǎo)電極，則只能引導(dǎo)出一個(gè)方向的電位偏向波形，稱單向動(dòng)作電位第六頁，共三十一頁，2022年，8月28日單相動(dòng)作電位MonophasicActionPotential損傷區(qū)興奮區(qū)細(xì)胞外引導(dǎo)電極檢流計(jì)第七頁，共三十一頁，2022年，8月28日刺激偽跡(Stimulusartifact)刺激偽跡AP刺激器放大器+－地刺激電流i-i+R+R-地刺激偽跡是刺激電流通過導(dǎo)電介質(zhì)擴(kuò)散至兩引導(dǎo)電極而形成的電位差信號(hào)。第八頁，共三十一頁，2022年，8月28日動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的測(cè)定

MeasurementofConductionVelocityofAP－+SΔt

傳導(dǎo)速度測(cè)定

υ=

SACΔt刺激器輸入通道R1-Rr1+R2-R2+第九頁，共三十一頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)原理：神經(jīng)組織在接受一次刺激產(chǎn)生興奮后，其興奮性將會(huì)發(fā)生規(guī)律性的變化，依次經(jīng)過絕對(duì)不應(yīng)期、相對(duì)不應(yīng)期、超常期和低常期，然后回到正常水平。采用兩次脈沖，通過調(diào)節(jié)兩次脈沖間隔，可測(cè)得坐骨神經(jīng)的絕對(duì)不應(yīng)期和相對(duì)不應(yīng)期第十頁，共三十一頁，2022年，8月28日材料和方法－材料蟾蜍或蛙；蛙板、探針、粗剪刀、細(xì)剪刀、尖鑷子、玻璃分針、大頭針、培養(yǎng)皿、滴管、瓷碗、鋅銅弓或鋁銀電極、任氏液、鐵支架，張力換能器，瓷碗，培養(yǎng)皿，微機(jī)生物信號(hào)采集處理儀等。

第十一頁，共三十一頁，2022年，8月28日1.坐骨神經(jīng)干標(biāo)本的制備1.1毀腦脊髓

1.2剪除軀干上部及內(nèi)臟

1.3剝皮（之后洗凈雙手和用過的全部手術(shù)器械）1.4完成坐骨神經(jīng)標(biāo)本1.4.1分離兩腿

1.4.2游離坐骨神經(jīng)

1.4.3完成坐骨神經(jīng)標(biāo)本

材料和方法－方法第十二頁，共三十一頁，2022年，8月28日剪除軀干上部及內(nèi)臟圖4-1-4剝?nèi)テつwN標(biāo)本的制備第十三頁，共三十一頁，2022年，8月28日坐骨神經(jīng)干制備蟾蜍毀腦脊髓，去上肢和內(nèi)臟，下肢剝皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上，剪去尾椎；標(biāo)本腹面向上，用玻璃分針分離脊柱兩側(cè)神經(jīng)叢，用線在近脊柱處結(jié)扎，剪斷神經(jīng)；將神經(jīng)干從腹面移向背面。標(biāo)本背面向上固定，從大腿至跟腱分離坐骨神經(jīng)。坐骨神經(jīng)標(biāo)本置任氏液中備用。第十四頁，共三十一頁，2022年，8月28日2.儀器連接RM6240C微機(jī)生物信號(hào)處理系統(tǒng)神經(jīng)干標(biāo)本盒。S+S-E

R1-R1+R2-R2+神經(jīng)干標(biāo)本盒兩對(duì)引導(dǎo)電極分別接微機(jī)生物信號(hào)處理系統(tǒng)1、2通道材料和方法－方法第十五頁，共三十一頁，2022年，8月28日

采樣頻率通道模式掃描速度靈敏度濾波頻率時(shí)間常數(shù)材料和方法－方法3.傳導(dǎo)速度的測(cè)定（及參數(shù)設(shè)置）第十六頁，共三十一頁，2022年，8月28日材料和方法－方法4.不應(yīng)期的測(cè)定（及參數(shù)設(shè)置）采用雙刺激模式，逐步增加波間隔第二個(gè)動(dòng)作電位出現(xiàn)時(shí)的刺激間隔及第二個(gè)動(dòng)作電位振幅剛開始與第一個(gè)相等時(shí)的刺激間隔

第十七頁，共三十一頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)結(jié)果RM6240系統(tǒng)蟾蜍坐骨神經(jīng)動(dòng)作電位引導(dǎo)實(shí)驗(yàn)界面單向、雙向動(dòng)作電位的波形特點(diǎn)動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度、神經(jīng)干不應(yīng)期時(shí)程第十八頁，共三十一頁，2022年，8月28日討論單相、雙相動(dòng)作電位的形成動(dòng)作電位傳導(dǎo)的速度測(cè)定的原理和常見的影響因素絕對(duì)不應(yīng)期和相對(duì)不應(yīng)期形成的原因影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的主要干擾因素第十九頁，共三十一頁，2022年，8月28日注意事項(xiàng)神經(jīng)盡可能分離得長一些標(biāo)本制備時(shí)要注意保持標(biāo)本的濕潤標(biāo)本制備時(shí)盡量避免使用尖銳的器械，以免損傷神經(jīng)使用電刺激時(shí)，刺激強(qiáng)度不宜太大，否則可能導(dǎo)致神經(jīng)的損傷注意接地，防止干擾第二十頁，共三十一頁，2022年，8月28日結(jié)論神經(jīng)干受刺激后，以膜外記錄方式可記錄到一個(gè)雙相動(dòng)作電位（簡單描述其特點(diǎn)），在兩個(gè)引導(dǎo)電極間損傷神經(jīng)其動(dòng)作電位變?yōu)閱蜗嗨鶞y(cè)得的動(dòng)作電位傳導(dǎo)的速度及絕對(duì)不應(yīng)期、相對(duì)不應(yīng)期的時(shí)程第二十一頁，共三十一頁，2022年，8月28日2.實(shí)驗(yàn)步驟2.3單相動(dòng)作電位參數(shù)測(cè)定+-R1-R1+R2-R2+PeripheralendCentralend2.1末梢引導(dǎo)條件：刺激電壓1.2，刺激波寬0.1ms2.2刺激強(qiáng)度（U）與動(dòng)作電位振幅（A）的關(guān)系條件：刺激電壓0.2～2V，刺激波寬0.1ms+-R1-R1+R2-R2+PeripheralendCentralend第二十二頁，共三十一頁，2022年，8月28日3.1中樞端引導(dǎo)

3.觀察（observations)條件：刺激電壓1.2V，刺激波寬0.1ms+-R1-R1+R2-R2+中樞端引導(dǎo)的動(dòng)作電位CentralendPeripheralend第二十三頁，共三十一頁，2022年，8月28日3.2末梢端引導(dǎo)

3.觀察（observations)條件：刺激電壓1.2V，刺激波寬0.1msDp1Dp2Ap1Ap2Ap1Ap2+-R1-R1+R2-R2+PeripheralendCentralend第二十四頁，共三十一頁，2022年，8月28日2.觀察（observations)

2.3

傳導(dǎo)速度測(cè)定

條件：刺激電壓1.2V，刺激波寬0.1msSR1-R2-Δtυ=

SR1-R2-Δt+-R1-R1+R2-R2+PeripheralendCentralend第二十五頁，共三十一頁，2022年，8月28日2.觀察（observations)2.4單相動(dòng)作電位參數(shù)測(cè)定DmAmAmDm+-R1-R1+R2-R2+PeripheralendCentralend第二十六頁，共三十一頁，2022年，8月28日2.5刺激強(qiáng)度（U）與動(dòng)作電位振幅（A）的關(guān)系刺激強(qiáng)度與動(dòng)作電位振幅的關(guān)系A(chǔ)（mV)U(V)MaximalstimulusThreshold

stimulus要求：測(cè)定閾強(qiáng)度和最大刺激強(qiáng)度，刺激強(qiáng)度與動(dòng)作電位振幅的關(guān)系曲線條件：刺激電壓0.1～2，刺激波寬0.1ms神經(jīng)干引導(dǎo)所獲得復(fù)合動(dòng)作電位（compoundactionpotential(CAP）與單神經(jīng)纖維引導(dǎo)的動(dòng)作電位的性質(zhì)有所不同。第二十七頁，共三十一頁，2022年，8月28日3.結(jié)果(results)3.2刺激電壓1.2V，波寬0.1ms時(shí)，動(dòng)作電位正相振幅Ap1±smV大于負(fù)相振幅Ap2±smV，兩者有顯著性差異（p<0.05)；動(dòng)作電位正相時(shí)程Dp1±sms顯著短于負(fù)相時(shí)程Dp2±sms，兩者有顯著性差異（p<0.05)，見表1和圖1、圖2。表1蟾蜍坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位參數(shù)nUth(V)Umax

(V)υ

(m/s)Ap1(mV)Ap2()Dp1(ms)Dp2()Am(ms)Dm(ms)123456x±s3.1刺激波寬0.1ms時(shí)，閾刺激0.35±0.08V；最大刺激Umax±sV，刺激電壓1.2V時(shí)，動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度為±s（m/s)，見表1。第二十八頁，共三十一頁，2022年，8月28日Ap1Ap2Dp1Dp1t圖1蟾蜍坐骨神經(jīng)干雙相動(dòng)作電位圖2蟾蜍坐骨神經(jīng)干單相動(dòng)作電位AmDm3.3刺激電壓1.2V時(shí)，單相動(dòng)作電位振幅Am±smV大于雙相動(dòng)作電位正相振幅Ap1±smV，兩者無顯著性差異（p>0.05)；單相動(dòng)作時(shí)程Dm±sms顯著長于雙相動(dòng)作電位正相Dp1±sms，兩者有顯著性差異（p<0.05)，見圖1、圖2和表1。第二十九頁，共三十一頁，2022年，8月28日3.4在刺激電壓低于Uthreshold時(shí)，測(cè)不到動(dòng)作電位；刺激電壓從Uthreshold增加至Umaximal，動(dòng)作電位振幅呈曲線增長，刺激電壓高于Umaximal動(dòng)作電位振幅不再增長，見圖3。A（mV)圖3刺激強(qiáng)度與動(dòng)作電位振幅的關(guān)系U(V)0.51.01.52463.5刺激電壓1.2V，3molKCl處理前，動(dòng)作電位振幅為Ac1±smV

，處理后5min，動(dòng)作電位振幅為At1±smV，與處理前比有顯著性差異（p<0.05)，見表3。第三十頁，共三十一頁，2022年，8月28日