生物化學(xué)實驗教案(全)

生物化學(xué)實驗―教案―目錄實驗一糖的顏色反應(yīng)1實驗二糖的還原作用3實驗三多糖的實驗4實驗四糖的旋光性和變旋現(xiàn)象5實驗五血糖的定量測定（葡萄糖氧化酶法）7實驗六人血清中總膽固醇的測定8實驗七牛奶中粗脂肪含量的測定9實驗八牛奶中酪蛋白的提取11實驗九牛奶中酪蛋白含量的測定12實驗十氨基酸的紙層析14實驗十一醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質(zhì)16實驗十二蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)18實驗十三蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)20實驗十四SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量21實驗十五雙縮脲法測定蛋白質(zhì)濃度22實驗十六考馬斯亮藍法測定蛋白質(zhì)濃度24實驗十七紫外光吸收法測定蛋白質(zhì)濃度25實驗十八血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶的測定27實驗十九過氧化物酶的作用28實驗二十溶菌酶的提純結(jié)晶29實驗二十一酵母RNA的提取30實驗二十二RNA的定量測定（苔黑酚法）31實驗二十三DNA的提取及含量測定32實驗二十四蕎麥中總黃酮的定性定量研究32實驗一糖的顏色反應(yīng)[實驗?zāi)康募耙骫1.掌握莫式（Molisch）試驗鑒定糖的原理和方法。2.掌握塞式（Seliwanoff）試驗鑒定酮糖的原理和方法。3.掌握杜式(Tollen)試驗鑒定酮糖的原理和方法。[實驗原理]1．莫式試驗：糖經(jīng)無機酸（濃硫酸、濃鹽酸）脫水產(chǎn)生糠醛或糠醛衍生物，后者在濃無機酸作用下，能與а-萘酚生成紫紅色縮合物。2．塞式試驗：酮糖在濃酸的作用下，脫水生成5-羥甲基糠醛，后者與間苯二酚作用，呈紅色反應(yīng)；有時亦同時產(chǎn)生棕紅色沉淀，此沉淀溶于乙醇，成鮮紅色溶液。3．杜式試驗：戊糖在濃酸溶液中脫水生成糠醛，后者與間苯三酚結(jié)合成櫻桃紅色物質(zhì)。[實驗儀器及用品]儀器：水浴鍋。器皿：吸管、試管。實驗藥品：蔗糖、葡萄糖、淀粉、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、а-萘酚、濃硫酸、95%乙醇、間苯二酚、鹽酸、間苯三酚。[實驗試劑]莫式試劑：а-萘酚5g,溶于95%乙醇并稀釋至100ml?，F(xiàn)用現(xiàn)配，并貯于棕色試劑瓶中。塞式試劑：間苯二酚50mg，溶于100ml鹽酸（VH2O：VHCl=2:1），現(xiàn)用現(xiàn)配。杜式試劑：2%間苯三酚乙醇溶液（2g間苯三酚溶于100ml95%乙醇中）3ml,緩緩加入濃鹽酸15ml及蒸餾水9ml。臨用時配制。[實驗內(nèi)容及步驟]一、莫式實驗于4支試管中，分別加入1ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液和少許纖維素（棉花或濾紙浸在1ml水中），然后各加莫式試劑2滴，搖勻，將試管傾斜，沿管壁慢慢加入濃硫酸1.5ml（切勿振搖?。?，硫酸層沉于試管底部與糖溶液分成兩層，觀察液面交界處有無紫色環(huán)出現(xiàn)。二、塞式試驗于4支試管中，分別加入0.5ml1%葡萄糖溶液、1%蔗糖溶液、1%果糖溶液，然后各加塞式試劑2.5ml，搖勻，同時置沸水浴內(nèi)，比較各管顏色及紅色出現(xiàn)的先后順序。三、杜式試驗于3支試管中加入杜式試劑1ml，再分別加入1滴1%葡萄糖溶液、1%半乳糖溶液和1%阿拉伯糖溶液，混勻。將試管同時放入沸水浴中，觀察顏色的變化，并記錄顏色變化的時間。四、實驗現(xiàn)象記錄仔細觀察實驗中的顏色變化，對于塞式試驗和杜式試驗還需記錄下顏色變化的時間。實驗二糖的還原作用[實驗?zāi)康募耙骫掌握糖的還原反應(yīng)來鑒定糖的原理和方法。[實驗原理]費林(Fehling)試劑和本尼迪(Benedict)試劑均為含Cu2+的堿性溶液，能使具有自由醛基或酮基的糖氧化，其本身則被還原成紅色或黃色的Cu2O，此法常用作還原糖的定性或定量測定。[實驗儀器及用品]實驗儀器：水浴鍋實驗器皿：吸管、試管實驗試劑：硫酸酮、氫氧化鈉、酒石酸鉀鈉、檸檬酸鈉、無水碳酸鈉、淀粉、蔗糖、葡萄糖。[實驗試劑]1.費林試劑試劑A：CuSO4·5H2O34.5g,溶于蒸餾水并稀釋至500ml。試劑B：氫氧化鈉125g，酒石酸鉀鈉137g，溶于蒸餾水并稀釋至500ml。臨用時將試劑A與試劑B等體積混合。2.本尼迪試劑：檸檬酸鈉（Na3C6H3O7·11H