藥物檢驗工05藥物的鑒別課件

藥物檢驗工Druginspectionworkers藥物的鑒別內(nèi)容化學(xué)鑒別法2光譜鑒別法3色譜鑒別法4概述1藥物鑒別特點？已知物的確證試驗1鑒別試驗為個別分析，2通常采用不同方法鑒別，綜合分析3原料藥鑒別項下試驗項目為3～4有的僅1～2個，制劑鑒別項目一般比原料藥少4藥物鑒別方法方法化學(xué)鑒別法光譜鑒別法色譜鑒別法生物學(xué)法四、鑒別方法化學(xué)鑒別法光譜鑒別法生物學(xué)法

HPLC、GC鑒別法

薄層色譜鑒別法

紙色譜鑒別法

呈色反應(yīng)鑒別法

紫外光譜鑒別法

紅外光譜鑒別法

沉淀生成反應(yīng)鑒別法

色譜鑒別法

氣體生成反應(yīng)鑒別法

測定生成物的熔點熒光反應(yīng)鑒別法

（二）化學(xué)鑒別方法

合適試劑氣體產(chǎn)生熒光出現(xiàn)沉淀生成顏色改變真?zhèn)嗡幬镉行С煞值挠袩o判斷Ch.P、USP一般鑒別試驗JP、BP定性反應(yīng)一、一般鑒別試驗

（generalidentificationtest）（一）概念、特點及試驗項目以藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其物理化學(xué)性質(zhì)為依據(jù)，通過化學(xué)反應(yīng)來鑒別藥物真?zhèn)?。無機(jī)藥物：根據(jù)其組成的陰離子和陽離子的特殊反應(yīng)，并以《中國藥典》第四部項下的一般鑒別試驗為依據(jù)。有機(jī)藥物：采用典型的官能團(tuán)反應(yīng)。鈉鹽

Na+方法（1）取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無化火焰中燃燒，火焰即顯鮮黃色。（鈉的火焰試驗反應(yīng)極靈敏，最低檢出量約為0.1ng鈉離子，若由試藥和所用儀器引入微量鈉時，均能出現(xiàn)鮮黃色火焰，故應(yīng)在測試前，將鉑絲燒紅，趁熱浸入鹽酸中，如此反復(fù)處理，直至火焰不現(xiàn)黃色，再蘸試樣進(jìn)行試驗。并只有當(dāng)強(qiáng)烈的黃色火焰持續(xù)數(shù)秒鐘不退，才能確認(rèn)為正反應(yīng)。）（2）取供試品的中性溶液，加醋酸氧鈾鋅試液，即生成黃色沉淀。原理（1）焰色反應(yīng)：黃色（2）化學(xué)反應(yīng)水楊酸鹽方法（1）取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。（該試驗反應(yīng)極為靈敏，只需取稀溶液進(jìn)行試驗，如取用量大，產(chǎn)生顏色過深，可加水稀釋后觀察。）（2）取供試品溶液，加稀鹽酸，即析出白色水楊酸沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液中溶解。原理（1）FeCl3顯色反應(yīng)（2）弱酸鹽的溶解性紫色

苯甲酸鹽方法（1）取供試品的中性溶液，加三氯化鐵試液，即生成赭色沉淀；再加稀鹽酸，變?yōu)榘咨恋?。?）取供試品，置干燥試管中，加硫酸后，加熱，不炭化，但析出苯甲酸，在試管內(nèi)凝結(jié)成白色升華物。原理（1）FeCl3反應(yīng)（2）酸堿性：強(qiáng)堿弱酸鹽氯化物

Cl-方法（1）取供試品溶液，加硝酸使成酸性后，加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加硝酸，沉淀復(fù)生成。如供試品為生物堿或其他有機(jī)堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進(jìn)行試驗。（2）取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳，混勻，加硫酸濕潤，緩緩加熱，即發(fā)生氯氣，能使?jié)駶櫟牡饣浀矸墼嚰堬@藍(lán)色。原理（1）與銀鹽的反應(yīng)（2）與二氧化錳的反應(yīng)硫酸鹽

方法（1）取供試品溶液，加氯化鋇試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。（2）取供試品溶液，加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。（3）取供試品溶液，加鹽酸，不生成黃色沉淀（與硫代硫酸鹽區(qū)別）。原理（1）與鋇鹽的反應(yīng)（2）與鉛鹽的反應(yīng)（3）與硫代硫酸鹽區(qū)別（黃）丙二酰脲類方法（1）取供試品約0.1g，加碳酸鈉試液1ml與水10ml，振搖2分鐘，濾過，濾液中逐滴加硝酸銀試液，即產(chǎn)生白色沉淀，振搖，沉淀即溶解；繼續(xù)滴加過量的硝酸銀試液，沉淀不再溶解。（2）取供試品約50mg，加吡啶溶液（110）5ml，溶解后，加銅吡啶試液1ml，即顯紫色或生成紫色沉淀。原理（1）銀鹽反應(yīng)（2）銅鹽反應(yīng)2.專屬鑒別試驗

藥物的專屬鑒別試驗是證實某一種藥物的依據(jù)，它是根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性不同，選用某些特有的靈敏的定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)巍?/p>

如巴比妥類藥物含有丙二酰脲母核，主要的區(qū)別在于5，5一位取代基和2一位取代基的不同：苯巴比妥含有苯環(huán)，司可巴比妥含有雙鍵，硫噴妥鈉含有硫原子，可根據(jù)這些取代基的性質(zhì)，采用各自的專屬反應(yīng)進(jìn)行鑒別。又如甾體激素類藥物含有環(huán)戊烷并多氫菲母核，主要的結(jié)構(gòu)差別在A環(huán)和D環(huán)的取代基不同，可利用這些結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行鑒別確證。呈色反應(yīng)沉淀生成反應(yīng)生成氣體反應(yīng)生成熒光反應(yīng)褪色反應(yīng)生成衍生物測定熔點系指供試品溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭┤芤?，在一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，生成易于觀測的有色產(chǎn)物。在鑒別試驗中最為常用的反應(yīng)類型有：1）三氯化鐵呈變色反應(yīng)——酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基呈色反應(yīng)茚三酮反應(yīng)分為兩步：第一步是將氨基酸氧化形成CO2、NH3和醛，而水合茚三酮被還原成還原型茚三酮；第二步是所形成的還原型茚三酮和另一個水合茚三酮分子和氨縮合生成藍(lán)紫色有色物質(zhì)。稱為羅曼紫（Ruhemann'spurple）。此化合物最大吸收峰在570nm波長處。由于此吸收峰的大小與氨基酸釋放的氨量成正比，因此可作為氨基酸的定量分析方法,醫(yī)學(xué)上這個反應(yīng)被用于鑒定指紋。4）重氮化-偶合顯色反應(yīng)——芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基；5）氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)。銀鏡反應(yīng)、菲林試劑、高錳酸鉀沉淀生成反應(yīng)１)與重金屬離子的沉淀反應(yīng)在一定條件下，藥物和重金屬離子反應(yīng)，生成不同形式的沉淀；2）與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）的沉淀反應(yīng)多為生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機(jī)堿及其鹽；3）其它沉淀反應(yīng)。生成氣體反應(yīng)

1)大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣；2)化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體；3)含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生乙酸乙酯的香味。4)含碘有機(jī)藥物經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；褪色反應(yīng)

具有不飽和鍵與高錳酸鉀或溴水反應(yīng)，如司可巴比妥鈉。氧化還原反應(yīng)，如碘液等。生成熒光反應(yīng)一、原理熒光鑒別法是利用制劑中某些成分，如黃酮類、蒽醌類、香豆素類等在可見光或紫外光照射下能產(chǎn)生一定顏色熒光的性質(zhì)，對中藥制劑進(jìn)行鑒別。有的成分本身不具熒光性，但加酸、堿處理后，或經(jīng)其它化學(xué)方法處理后也可產(chǎn)生熒光供鑒別用。二、特點本法操作簡便、靈敏，具有一定的專屬性。例如大黃和土大黃，前者顯棕色至棕紅色熒光，而后者顯亮藍(lán)色熒光，很容易區(qū)分。生成熒光反應(yīng)三、常用的熒光發(fā)射形式有以下類型：（1）藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光；（2）藥物溶液加硫酸使呈酸性后，在可見光下發(fā)射熒光；（3）藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下發(fā)射出熒光；（4）藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其它反應(yīng)后，發(fā)射熒光。（380-780nm）四、操作方法通常取藥品溶液點加于濾紙上或加入蒸發(fā)皿中，置紫外光燈（365nm）下約10cm處觀察所產(chǎn)生的熒光。必要時可在供試品上加酸、堿或其它試劑，再觀察熒光及其變化。生成衍生物測定熔點利用甾醇、甾酮類藥物與一些試劑反應(yīng)生成酯、肟、縮氨基脲或水解甾體生成相應(yīng)母體，測定熔點。1、焰色試驗：常用干法。利用某些元素所具有的特異焰色，可鑒別它們?yōu)槟囊活慃}類藥物。方法：取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，使火焰顯出特殊的顏色。鈉黃銅綠鉀銣紫焰色反應(yīng)第三節(jié)光譜鑒別法一、紫外光譜鑒別法

1、原理、特點及適用范圍原理：有機(jī)藥物具有能吸收紫外可見光的基團(tuán)，則顯示特征的吸收光譜，不同結(jié)構(gòu)的物質(zhì)可產(chǎn)生不同的紫外－可見吸收光譜特點：具有一定的專屬性，儀器普及率高，操作簡單，應(yīng)用范圍廣。缺點是光譜較簡單，曲線性狀變化不大，專屬性小于IR。光的反射、折射、衍射等現(xiàn)象。光的吸收、放射、光電效應(yīng)等現(xiàn)象?；鶓B(tài)激發(fā)態(tài)波長波長波長發(fā)射光強(qiáng)度透過光強(qiáng)度物質(zhì)吸收強(qiáng)度光、熱等能量3、紫外-可見光吸收的依據(jù)

（1）紫外吸收的依據(jù)：芳環(huán)或共軛體系是是否是1）.生色團(tuán)(chromophore)：含有π→π*躍遷，n→π*躍遷的基團(tuán)>C=C<，>C=O，-N=N-，-CC-，-CN-等（2）可見光吸收的依據(jù)：具有生色團(tuán)和助色團(tuán)2）.助色團(tuán)(auxochrome)

：含有非鍵電子的雜原子飽和基團(tuán)-OH、-NH2、

-OR、-SH、-Clk——比例常數(shù)，與吸光物質(zhì)的本性、入射光波長、溶劑及溫度等因素有關(guān)。

A＝kcl1.朗伯-比爾定律當(dāng)用適當(dāng)波長的單色光照射一溶液時，吸光度與溶液濃度c及液層厚度l的乘積成正比。朗伯—比爾定律適用于均勻、非散射介質(zhì)，但不適用于非單色光和濃度大的溶液。

第一節(jié)朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律不同的物質(zhì)對同一波長的單色光，可有不同的吸光系數(shù)，吸光系數(shù)越大，表明該物質(zhì)的吸光能力越強(qiáng)，靈敏度越高，所以吸光系數(shù)是定量和定性的依據(jù)。2、吸光系數(shù)

（1）物理意義吸光物質(zhì)在單位濃度及單位厚度（1cm）的吸光度。在給定單色光、溶劑和溫度等條件下，吸光系數(shù)是物質(zhì)的特性常數(shù)，表明物質(zhì)對某一特定波長的吸收能力。摩爾吸光系數(shù)：在入射光波長一定時，溶液濃度為1mol/L，液層厚度為1cm時所測得的吸光度稱為摩爾吸光系數(shù)，常用ε表示。百分吸光系數(shù)：在入射光波長一定時，溶液濃度為1﹪（1g／100ml，W/V）、層厚度為1cm時所測得的吸光度稱為百分吸光系數(shù)，常用表示。

二者的關(guān)系：48

（2）吸光系數(shù)的兩種表示方法2023/2/949第二節(jié)紫外可見分光光度計光源單色器吸收池檢測器顯示系統(tǒng)0.575光源單色器吸收池檢測器顯示1.光源2023/2/950作用--提供入射光在整個紫外光區(qū)或可見光譜區(qū)可以發(fā)射連續(xù)光譜，具有足夠的輻射強(qiáng)度、較好的穩(wěn)定性、較長的使用壽命?？梢姽鈪^(qū)：鎢燈、鹵鎢燈作為光源，其輻射波長范圍在320～2500

nm。

紫外區(qū)：氫、氘燈，發(fā)射200～375nm的連續(xù)光譜。

2.單色器2023/2/951

作用：將光源發(fā)射的復(fù)合光分解成單色光并可從中選出一任波長單色光。①入射狹縫：光源的光由此進(jìn)入單色器；②準(zhǔn)光裝置：透鏡或返射鏡使入射光成為平行光束；③色散元件：將復(fù)合光分解成單色光；棱鏡或光柵；④聚焦裝置：透鏡或凹面反射鏡，將分光后所得單色光聚焦至出射狹縫；⑤出射狹縫。3.樣品室2023/2/952樣品室放置各種類型的吸收池（比色皿）和相應(yīng)的池架附件。在紫外區(qū)須采用石英池，可見區(qū)一般用玻璃池。

注意：為了減少反射損失，比色皿的光學(xué)面必須完全垂直于光束方向。

比色皿的使用方法:(1)用作盛空白溶液的比色皿與盛試樣溶液的比色皿應(yīng)互相匹配，即有相同的厚度與相同的透光性。(2)拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。不得將光學(xué)面與硬物或臟物接觸。(3)測定有色溶液吸光度時，一定要用有色溶液潤洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色溶液的濃度。另外，在測定一系列溶液的吸光度時，應(yīng)由稀到濃的順序測定，以減小測量誤差。(4)盛裝溶液時，高度為比色皿的2/3-4/5處即可。(5)比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水紙吸干，以保護(hù)透光面。(6)凡含有腐蝕玻璃的物質(zhì)的溶液，不得長期盛放比色皿中。(7)不能將比色皿放在火焰或電爐上加熱或干燥箱內(nèi)烘烤。2023/2/9533.比色皿的清洗(1)每次做完實驗時，應(yīng)立即洗凈比色皿。清洗比色皿時，一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如比色皿被有機(jī)物沾污，可用鹽酸-乙醇混合洗滌液（1:2）浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或鉻酸洗液等氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿，以免損壞。(2)不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。2023/2/9542023/2/9564.檢測器

利用光電效應(yīng)將透過吸收池的光信號變成可測的電信號，常用的有光電池、光電管或光電倍增管。5.顯示系統(tǒng)

檢流計、數(shù)字顯示、計算機(jī)進(jìn)行儀器自動控制和結(jié)果處理。課堂互動試述紫外-可見分光光度計的主要部件及其作用？

57利用標(biāo)準(zhǔn)試樣對未知物進(jìn)行鑒定時，對兩者吸收光譜中峰的位置、數(shù)目和吸收強(qiáng)度進(jìn)行比較，如果兩者完全一致，就可初步判斷可能為同一種物質(zhì)；如果有明顯差別，肯定不是同一種物質(zhì)。第三節(jié)紫外-可見吸收光譜的應(yīng)用1.對比吸收光譜的特征數(shù)據(jù)：λmax、E1％1cm、ε(一)、定性分析2.對比吸光度（或吸光系數(shù)）不只一個吸收峰的化合物，可用不同吸收峰處測得吸光度的比值作為鑒別的依據(jù)。V-B12的鑒別規(guī)定在361nm與278nm吸光度的比值應(yīng)為1.70~1.88；361nm與550nm吸光度的比值應(yīng)為3.15~3.45（1）與標(biāo)準(zhǔn)品對照（2）與文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照（標(biāo)準(zhǔn)譜圖庫：46000種化合物紫外光譜的標(biāo)準(zhǔn)譜圖）

?Thesadtlerstandardspectra,Ultraviolet?3.對比吸光譜的一致性(二)、純度鑒定1.雜質(zhì)檢查：當(dāng)甲醇中含有少量苯時，被污染甲醇的紫外吸收光譜在256nm處就會出現(xiàn)苯的特征吸收。2.雜質(zhì)的限量檢測：腎上腺素中的雜質(zhì)腎上腺酮不得超過0.6%。其具體方法是：用0.05mol/L的HCl溶解腎上腺素制成2mg/ml的溶液，在1cm吸收池中，于310nm處測定吸光度A。規(guī)定A≤0.05。可以推定分子骨架，判斷發(fā)色團(tuán)之間的共軛關(guān)系和估計共軛體系中取代基的種類、位置和數(shù)目。(三)、結(jié)構(gòu)分析有機(jī)化合物的紫外吸收光譜適用范圍：含有芳環(huán)或共軛雙鍵的藥物在紫外光區(qū)有特征吸收，含有生色團(tuán)和助色團(tuán)的藥物在可見光區(qū)有吸收。紫外光譜是物質(zhì)在200～400

nm的近紫外光區(qū)和400～800

nm的可見光區(qū)的吸收光譜。UV圖提供兩個重要數(shù)據(jù)：吸收峰的位置和光吸收強(qiáng)度。由于藥物分子中多含有紫外光區(qū)的生色基，因此紫外分光光度法廣泛應(yīng)用于藥品檢驗。紫外光譜鑒別法總結(jié)：2、常用的方法對比吸收曲線一致性對比最大吸收波長和相應(yīng)吸光度的一致性對比吸收系數(shù)的一致性對比最大、最小吸收波長和相應(yīng)吸光度比值的一致性經(jīng)化學(xué)處理后，測定其反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性。對比最大吸收波長和同時測定最小吸收波長的一致性規(guī)定一定濃度的供試品在最大吸收波長處的吸收度規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法規(guī)定吸收波長和吸收度比值法二、紅外光譜鑒別法特點：能反映出藥物分子的結(jié)構(gòu)特點，專屬性強(qiáng)，準(zhǔn)確率高。不單獨使用本方法進(jìn)行鑒別。方法：標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法試樣制備方法：壓片法、糊法、膜法、溶液法1.近紅外、中紅外和遠(yuǎn)紅外

波段名稱波長μ波數(shù)（cm-1）近紅外0.75—2.513300－4000

中紅外2.5－254000－400

遠(yuǎn)紅外25－1000400－10

紅外光譜是研究波數(shù)在4000-400cm-1范圍內(nèi)不同波長的紅外光通過化合物后被吸收的譜圖。譜圖以波長或波數(shù)為橫坐標(biāo)，以透光度為縱坐標(biāo)而形成。透光度以下式表示：I：表示透過光的強(qiáng)度；I0：表示入射光的強(qiáng)度。2.紅外光譜的表示方法

橫坐標(biāo)：波數(shù)()400～4000cm-1；表示吸收峰的位置。

縱坐標(biāo)：透過率（T%），表示吸收強(qiáng)度。T↓，表明吸收的越好，故曲線低谷表示是一個好的吸收帶。3分子振動與紅外光譜3.1分子的振動方式(1)伸縮振動：(2)彎曲振動：

值得注意的是：不是所有的振動都能引起紅外吸收，只有偶極矩(μ)發(fā)生變化的，才能有紅外吸收。H2、O2、N2

電荷分布均勻，振動不能引起紅外吸收。H―C≡C―H、R―C≡C―R，其C≡C（三鍵）振動也不能引起紅外吸收。

結(jié)論：

2.必須是能引起分子偶極矩變化的振動才能產(chǎn)生紅外吸收光譜。1.紅外輻射光的頻率與分子振動的頻率相當(dāng)，才能滿足分子振動能級躍遷所需的能量，而產(chǎn)生吸收光譜。產(chǎn)生紅外光譜的必要條件是：

3.2紅外光譜的八個峰區(qū)4000-1500cm-1區(qū)域又叫官能團(tuán)區(qū).該區(qū)域出現(xiàn)的吸收峰，較為稀疏，容易辨認(rèn).1500-400cm-1區(qū)域又叫指紋區(qū).這一區(qū)域主要是：C－C、C－N、C－O等單鍵和各種彎曲振動的吸收峰，其特點是譜帶密集、難以辨認(rèn)。2.2重要官能團(tuán)的紅外特征吸收振動吸收峰化合物C-H拉伸（或伸縮）C-H彎曲烷烴2960-2850cm-1-CH2-,1460cm-1

-CH3,1380cm-1異丙基，兩個等強(qiáng)度的峰三級丁基，兩個不等強(qiáng)度的峰振動吸收峰化合物C-H拉伸（或伸縮）C=C，CC，C=C-C=C苯環(huán)(拉伸或伸縮)C-H彎曲烯烴1680-16201000-800

RCH=CH21645（中）

R2C=CH21653（中）順RCH=CHR

1650（中）反RCH=CHR

1675（弱）>3000（中）3100-3010三取代1680（中-弱）

四取代1670（弱-無）四取代無共軛烯烴與烯烴同向低波數(shù)位移，變寬與烯烴同910-905強(qiáng)995-985強(qiáng)895-885強(qiáng)730-650弱且寬980-965強(qiáng)840-790強(qiáng)無強(qiáng)吸收峰化合物振動C-H拉伸（或伸縮）C=C，CC，C=C-C=C

苯環(huán)C-H彎析炔烴3310-3300一取代2140-2100弱非對稱二取代2260-2190弱700-6003110-3010中1600中670弱倍頻2000-1650鄰-770-735強(qiáng)間-810-750強(qiáng)

710-690中對-833-810強(qiáng)泛頻2000-1660取代芳烴較強(qiáng)對稱無強(qiáng)同芳烴同芳烴1580弱1500強(qiáng)1450弱-無一取代770-730，710-690強(qiáng)二取代芳烴類別拉伸說明R-XC-FC-ClC-BrC-I1350-1100強(qiáng)750-700中700-500中610-685中游離3650-3500締合3400-3200寬峰不明顯醇、酚、醚-OHC-O1200-1000不特征胺RNH2R2NH3500-3400（游離）締合降低1003500-3300（游離）締合降低100鍵和官能團(tuán)類別拉伸(cm-1)說明1770-1750（締合時在1710）醛、酮C=OR-CHO1750-16802720羧酸C=OOH酸酐酰鹵酰胺腈氣相在3550，液固締合時在3000-2500（寬峰）C=OC=OC=OC=O酯18001860-18001800-17501735NH21690-16503520，3380（游離）締合降低100CN2260-2210鍵和官能團(tuán)第四節(jié)色譜鑒別法進(jìn)行鑒別比移值Rf保留時間色譜鑒別法原理：不同物質(zhì)在不同色譜條件下，產(chǎn)生各自的特征色譜行為。與對照品在相同條件下進(jìn)行色譜分離，并比較其保留行為和檢測結(jié)果是否一致來驗證真?zhèn)?。方法：?）薄層色譜鑒別法在實際工作中，一般采用對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）比較法，要求供試品斑點的Rf值應(yīng)與對照品斑點一致。(Rf的最佳范圍0.3-0.5,可用范圍0.2-0.8)薄層色譜法比移值(Rf)——定性參數(shù)原點到斑點中心距離原點到溶劑前沿距離Rf==ll0原點?l0l1l2前沿1、2——樣品3——標(biāo)準(zhǔn)品前沿原點

???123配展開劑-飽和-點樣-展開-顯色。各步驟的注意事項化合物的極性越大，對固定相硅膠吸附力大，Rf小。反之，極性越小，對固定相為硅膠吸附力小，易于洗脫，Rf大展開劑的極性越大，對化合物的洗脫力也越大，Rf大。反之，極性越小，對化合物的洗脫力也越小，Rf?。?）高效液相色譜鑒別法和氣相色譜鑒別法一般規(guī)定按供試品含量測定項下的高效液相色譜條件進(jìn)行試驗。要求供試品和對照品色譜峰的保留時間應(yīng)一致。含量測定方法為內(nèi)標(biāo)法時，可要求供試品溶液和對照品溶液色譜圖中藥物峰保留時間與內(nèi)標(biāo)物峰的保留時間比值應(yīng)相同。hW1/20.5h0.607hW0tt0tR生物學(xué)法是利用微生物或?qū)嶒瀯游镨b別法儀器鑒別方法增加快（2:1）

UV,IR,HPLC(USP),TLC,PC(BP)藥物鑒別方法新動向

制劑廣泛采用IR鑒別

鑒別方法簡練，專屬性強(qiáng)平均每個品種收載2個鑒別反應(yīng)其他鑒別方法（略）鑒別試驗條件（一）溶液的濃度溶液的濃度主要指被鑒別物質(zhì)的濃度，其大小影響結(jié)果的判斷。如化學(xué)法中要觀察沉淀、顏色；UV法中λmax,A、（二）溶液的溫度溫度過高可使產(chǎn)物分解，導(dǎo)致顏色變淺，甚至觀察不到結(jié)果。（三）溶液的酸堿度使反應(yīng)物處于活化狀態(tài)、反應(yīng)產(chǎn)物處于穩(wěn)定和以觀察狀態(tài)。（四）試驗時間有機(jī)化合物的化學(xué)反應(yīng)較慢，需要一定的反應(yīng)時間和條件。（五）干擾成分的存在藥物制劑的鑒別，其它成分則會干擾檢查結(jié)果的現(xiàn)象觀察。復(fù)習(xí)1、藥物鑒別目的？鑒別藥物真?zhèn)?。而非對未知物的鑒別。2、典型鑒別反應(yīng)？三氯化鐵呈變色反應(yīng)——酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基茚三酮呈色反應(yīng)——脂肪氨基重氮化-偶合顯色反應(yīng)——芳伯氨基或能產(chǎn)生芳伯氨基；3、紫外、紅外光譜常見官能團(tuán)位置4、薄層色譜：比移值大小、過程、點樣大小、飽和目的、展缸使用、極性與比移值關(guān)系、1、某化合物可與三氯化鐵試液反應(yīng)產(chǎn)生綠色，該化合物為：（D）A．含酮基化合物B．含氮雜環(huán)化合物C．含酯基化合物D．含酚羥基化合物

2、能與Fehling（斐林試劑）試劑生成紅色沉淀的是：（A）A．含醛基的化合物B．含酮基的化合物C．含酚羥基的化合物D．含酯基的化合物

3、能與茚三酮試液反應(yīng)生成藍(lán)色到藍(lán)－紫色的化合物是：（A）A．氨基酸類B．多糖類C．生物堿類D．甾體類4、用于藥物分析的紫外光區(qū)的波長范圍是（B）A．190～270nmB．200～400nmC．400～900nmD．4000～400cm-1E．25～1000μm5、芳香第一胺類的藥物可用下列哪種反應(yīng)來鑒別(A)A．重氮化-偶合反應(yīng)B．茚三酮反應(yīng)C．高錳酸鉀褪色反應(yīng)D．焰色反應(yīng)6.蔗糖加硫酸煮沸后，用氫氧化鈉試液中和，再加何種試液，產(chǎn)生紅色沉淀

(C)A

過氧化氫試液

B

硝酸