GMP質(zhì)量體系復(fù)方丹參片中間產(chǎn)品檢驗(yàn)操作規(guī)程

目的：為檢驗(yàn)復(fù)方丹參片中間產(chǎn)品規(guī)定一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的程序,以便獲得準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù).范圍：適用于復(fù)方丹參片中間產(chǎn)品的檢驗(yàn)。職責(zé)：檢驗(yàn)員，檢驗(yàn)室主任對本規(guī)程實(shí)施負(fù)責(zé)。規(guī)程：性狀：本品為糖衣片，除去包衣后顯褐色；氣芳香，味微苦。鑒別2.1試劑與儀器2.1.1丹參酮ⅡA對照品 2.l.2冰片對照品2.1.3乙醚 2.1.4醋酸乙酯2.1.5苯-醋酸乙酯(19:1) 2.1.61%香草醛硫酸溶液2.1.7甲醇 2.1.8正丁醇2.1.9氨試液 2.1.10三七皂苷R1對照品2.1.11人參皂苷Rb1對照品 2.1.12人參皂苷Rg1對照品2.1.13氯仿-甲醇-水(13:7:2) 2.1.14硫酸乙醇溶液(1→10)2.1.15硅膠G薄層板 2.1.16研缽2.1.17超聲波清洗器 2.1.18容量瓶(10ml)2.1.19電子天平(十萬分之一克) 2.1.20燒杯、量筒2.1.21電爐 2.1.22烘箱2.1.23球形冷凝管 2.1.24鐵架臺2.1.25層析缸 2.1.26微量進(jìn)樣器2.1.27移液管(2ml,1ml) 2.1.28噴霧器2.1.29漏斗漏斗架2.2項(xiàng)目與步驟2.2.1取本品5片，除去糖衣，研碎，加乙醚10ml，超聲波處理5分鐘，濾過，藥渣備用，濾液揮干，殘?jiān)哟姿嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液，另取丹參酮ⅡA、、冰片對照品，分別稱取0.50mg置10ml量瓶中，各加入醋酸乙酯溶解稀釋至刻度，作為對照溶液，照薄層色譜法(SOP-QC-306-00)試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各4μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯(19:1)為展開劑，展開，取出晾干。供試品色譜中，在與丹參酮ⅡA對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；噴以1%香草醛硫酸溶液，在110℃加熱數(shù)分鐘，在與冰片對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)為符合規(guī)定。2.2.2取[鑒別]2.2.1項(xiàng)下的藥渣，加甲醇25ml，加熱回流15分鐘，放冷，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)铀?5ml，微熱使溶解，加水飽和的正丁醇25ml，振搖提取，取正丁醇提取液，用氨試液25ml洗滌棄去氨試液，再用正丁醇飽和的水洗滌2次，每次25ml，正丁醇液濃縮至干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取三七皂苷R1對照品及人參皂苷Rb1，Rg1對照品，分別精密稱取10mg置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，作為對照品溶液。照薄層色譜法(SOP-QC-304-00)試驗(yàn)，吸取上述四種溶液各1ml，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水（13：7：2）放置分層的下層溶液為展開劑，展開，取出晾干，噴以硫酸乙醇溶液（1→10）立即于110—120℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，為符合規(guī)定。3檢查3.1試劑與儀器3.1.1崩解儀3.2項(xiàng)目與步驟3.2.1崩解時(shí)限:取本品6片,按崩解時(shí)限檢查法(SOP-QC-330-00)檢查,應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)全部崩解,為符合規(guī)定。4含量測定4.1試劑與儀器4.1.1C18硅膠色譜柱4.1.2丹參一酮ⅡA對照品4.1.3甲醇4.1.4注射器(10ml)過濾器、濾膜4.1.5電子天平(十萬分之一克)4.1.6高效液相色譜儀4.2檢驗(yàn)步驟按高效液相色譜法(SOP-QC-306-00)檢測4.2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用C18硅膠色譜柱，流動(dòng)相為甲醇-水(73：27)，流速為每分鐘0.9ml，檢測波長為270nm，量取丹參酮ⅡA對照溶液[*]10ul注入液相色譜儀中，理論板數(shù)按丹參酮ⅡA峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。4.2.2丹參酮ⅡA對照溶液與樣品溶液的制備以及測定[*]丹參酮ⅡA對照溶液制備:精密稱取丹參酮ⅡA對照品10mg，置50ml棕色量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置25ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為對照溶液。樣品溶液的制備以及測定:取本品10片，除去糖衣，精密稱定，研細(xì)，取1g精密稱定，精密加入甲醇25ml，稱定重量，超聲處理15分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，取續(xù)濾液量取10ul，注入液相色譜儀,將對照溶液按同法測定，按下式計(jì)算本每片含丹參酮ⅡA(C19H18O3)計(jì),不得少于0.2mg為符合規(guī)定。CW:樣品每片含丹參酮ⅡA的含量(mg)；A1:樣品溶液中含丹參酮ⅡA的峰面積；A