第25章免疫缺陷病及其免疫檢驗(yàn)

臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)第二十五章

免疫缺陷病及其免疫檢驗(yàn)吳俊英目錄概述免疫缺陷病常用的檢驗(yàn)項(xiàng)目第一節(jié)概述重點(diǎn)提示免疫缺陷病的分類與臨床特點(diǎn)原發(fā)性T細(xì)胞缺陷病的特征與代表性疾病原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病的特征與代表性疾病獲得性免疫缺陷綜合癥的發(fā)病機(jī)制與免疫學(xué)特征免疫缺陷?。╥mmunodeficiencydiseases,ID）由于遺傳或其他因素造成的免疫系統(tǒng)先天發(fā)育障礙或后天損傷所引起的各種臨床綜合癥。一、免疫缺陷病的分類和特點(diǎn)（一）免疫缺陷病的分類原發(fā)性免疫缺陷病（primaryimmunodeficiencydisease,PIDD）免疫系統(tǒng)遺傳缺陷或先天發(fā)育不全所致的臨床綜合癥。繼發(fā)性免疫缺陷?。╯econdaryimmunodeficiencydisease,SIDD）免疫系統(tǒng)受到感染、腫瘤、營(yíng)養(yǎng)不良、代謝性疾病等作用引起免疫功能低下所致的臨床綜合癥。原發(fā)性免疫缺陷病原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病原發(fā)性T細(xì)胞缺陷病原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷病原發(fā)性補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷病

繼發(fā)性免疫缺陷病繼發(fā)性T細(xì)胞缺陷繼發(fā)性低丙球血癥繼發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷繼發(fā)性補(bǔ)體缺陷

（一）免疫缺陷病的分類易感染：感染的性質(zhì)和嚴(yán)重程度取決于免疫缺陷的類型及程度。易伴發(fā)惡性腫瘤：多為病毒所致腫瘤和淋巴系統(tǒng)腫瘤。易伴發(fā)自身免疫?。阂許LE、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和惡性貧血等多見。（二）免疫缺陷病的特點(diǎn)各類免疫缺陷病的感染特點(diǎn)免疫缺陷病易感病原體類別感染類型體液免疫缺陷化膿性感染為主敗血癥、肺炎、氣管炎、中耳炎等細(xì)胞免疫缺陷細(xì)胞內(nèi)寄生病原體感染為主重癥病毒感染、真菌感染、結(jié)核感染等聯(lián)合免疫缺陷化膿菌感染為主，合并胞內(nèi)病原體感染全身重癥細(xì)菌及病毒感染，頑固性腹瀉等吞噬細(xì)胞缺陷和補(bǔ)體缺陷化膿菌感染為主化膿性腦膜炎、全身性肉芽腫等原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病原發(fā)性T細(xì)胞缺陷病原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷病原發(fā)性補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷病二、原發(fā)性免疫缺陷病B細(xì)胞先天發(fā)育缺陷或不能接受Th細(xì)胞傳遞的信號(hào)，導(dǎo)致抗體合成或分泌障礙。特征：-占原發(fā)性免疫缺陷病50%

-外周血B細(xì)胞減少或功能缺陷

-體內(nèi)Ig水平降低或缺失

-T細(xì)胞數(shù)量正常

-易發(fā)生反復(fù)化膿性感染（一）原發(fā)性B細(xì)胞缺陷病臨床類型：

①全部Ig缺失或極度降低，如Bruton型丙種球蛋白缺乏癥；②部分缺失，如選擇性IgA缺乏癥；③Ig正常，但在抗原刺激后無應(yīng)答反應(yīng)。1.性聯(lián)無丙種球蛋白血癥又稱Bruton綜合征。X連鎖隱性遺傳，女性攜帶，男性發(fā)病。B細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)分子酪氨酸激酶基因缺陷,使B細(xì)胞發(fā)育停滯。血清各類Ig降低。患兒多在出生6月后反復(fù)發(fā)生化膿性感染。2.選擇性IgA缺陷病常染色體顯性或隱性遺傳。表達(dá)mIgA的B細(xì)胞發(fā)育停滯,不能分化為漿細(xì)胞?；颊咭话銦o明顯癥狀,易患呼吸、消化道感染。IgA異常低下<50mg/L,sIgA缺乏。其他Ig水平正常。T細(xì)胞發(fā)生、分化受阻而導(dǎo)致的疾病。特征：-占原發(fā)性免疫缺陷病18%。

-淋巴組織發(fā)育不良，淋巴細(xì)胞缺乏；

-易合并自身免疫病和惡性腫瘤；

-Ig可正常，但B細(xì)胞對(duì)TD-Ag無應(yīng)答；

-對(duì)病毒和真菌易感。

（二）原發(fā)性T細(xì)胞缺陷病1.先天性胸腺發(fā)育不全綜合癥亦稱DiGeorge綜合癥。胚胎早期第三、四咽囊分化發(fā)育障礙。外周血T細(xì)胞減少，B細(xì)胞功能降低。對(duì)病毒、真菌易感。T細(xì)胞和B細(xì)胞均有分化發(fā)育障礙，導(dǎo)致細(xì)胞免疫和體液免疫聯(lián)合缺陷所致的疾病。特征：-占20%。-為性聯(lián)或常染色體隱性遺傳；

-T、B細(xì)胞均缺乏或功能缺陷；

-易發(fā)生各種嚴(yán)重感染及機(jī)會(huì)性感染；

-多在1～2歲死亡。

（三）原發(fā)性聯(lián)合免疫缺陷病性聯(lián)重癥聯(lián)合免疫缺陷病(X-SCID)X連鎖隱性遺傳,0～6月發(fā)病。IL-2R鏈基因突變,致多種CK受體表達(dá)異常。T細(xì)胞明顯減少。B數(shù)量正常但功能異常。血清Ig減少,類型轉(zhuǎn)換障礙。對(duì)各種病原體均易感。占10%,可表現(xiàn)為吞噬細(xì)胞數(shù)量、移動(dòng)、黏附、殺菌障礙等。類型：-粒細(xì)胞減少癥和粒細(xì)胞缺陷癥。

-白細(xì)胞黏附缺陷。

-慢性肉芽腫。（四）原發(fā)性吞噬細(xì)胞缺陷病

（五）原發(fā)性補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷病發(fā)病率最低，2%。補(bǔ)體系統(tǒng)的各種成分均可缺陷，包括補(bǔ)體固有成分、調(diào)控蛋白和補(bǔ)體受體。臨床表現(xiàn)為易感染及易伴發(fā)風(fēng)濕病等。多是疾病和理化生物因素影響免疫功能所致。發(fā)病率高于原發(fā)性免疫缺陷病。臨床表現(xiàn)和免疫學(xué)特征與原發(fā)性相似。常見原因：感染、腫瘤、營(yíng)養(yǎng)不良、藥物等。三、繼發(fā)性免疫缺陷病acquiredimmunodefiencysyndrome，AIDS1981年首次報(bào)道；1983年證實(shí)是由人類免疫缺陷病毒（HIV）引起。細(xì)胞表面CD4分子是其天然受體；CD4+T細(xì)胞質(zhì)和量嚴(yán)重受損；患者常伴發(fā)機(jī)會(huì)性感染，腫瘤及中樞退行性變。

獲得性免疫缺陷綜合征

1、病原學(xué)：人類免疫缺陷病毒屬逆轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒屬；分HIV-1和HIV-2兩型；HIV-1為全球致病主要病原；直徑100nm～140nm；由病毒核心和外膜組成。HIV結(jié)構(gòu)的蛋白組成：核心蛋白：p24、p17、p12，逆轉(zhuǎn)錄酶、RNA、蛋白酶等。包膜蛋白：gp41(跨膜蛋白)

gp120(外膜蛋白)

HIV病毒顆粒結(jié)構(gòu)圖(a)模擬圖；(b)電鏡圖2、致病機(jī)制HIV侵犯細(xì)胞：CD4+細(xì)胞（包括CD4+T細(xì)胞，單核細(xì)胞，巨噬細(xì)胞，神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞等）。CD4分子是gp120天然受體。gp120構(gòu)型改變，gp41暴露。gp41插入靶細(xì)胞膜，病毒核心進(jìn)入。HIV在靶細(xì)胞內(nèi)復(fù)制。3、主要免疫學(xué)特征機(jī)體CD4+細(xì)胞減少，尤其是CD4+T細(xì)胞減少，功能受損；CD4/CD8<0.5；Th1和Th2平衡失調(diào)，早期以Th1為主，AIDS期Th2占優(yōu)；B細(xì)胞多克隆激活（gp120屬超抗原）,產(chǎn)生多種自身Ab；抗原提呈細(xì)胞功能降低。4、臨床表現(xiàn)及預(yù)防AIDS典型臨床表現(xiàn)機(jī)會(huì)性感染：卡氏肺囊蟲，白色念珠菌，單純皰疹等伴發(fā)腫瘤：Kaposi肉瘤神經(jīng)系統(tǒng)異常AIDS的預(yù)防AIDS的傳播途徑性接觸傳播血源性傳播母嬰傳播AIDS的高危人群男性同性戀者靜脈吸毒者女患者所生嬰兒有異性HIV性伴侶第二節(jié)免疫缺陷病常用檢驗(yàn)項(xiàng)目

重點(diǎn)提示B細(xì)胞缺陷病的檢測(cè)T細(xì)胞缺陷病的檢測(cè)吞噬細(xì)胞缺陷病的檢測(cè)補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷病的檢測(cè)獲得性免疫缺陷綜合癥的檢測(cè)（一）B細(xì)胞數(shù)量的檢測(cè)B細(xì)胞表面SmIg檢測(cè)：--方法：免疫熒光法，流式細(xì)胞分析法。--意義：測(cè)算B細(xì)胞數(shù)量，判斷B細(xì)胞的成熟情況。B細(xì)胞表面CD10、CD19、CD20、CD22等抗原檢測(cè)--方法：流式細(xì)胞術(shù)。--意義：可了解B細(xì)胞的數(shù)量、亞型及分化成熟情況。一、B細(xì)胞缺陷病的檢測(cè)（二）血清Ig的測(cè)定方法：IgG、IgM和IgA多采用免疫濁度法，IgD和IgE多采用ELISA。意義：所有Ig都減少但程度較輕(IgG1g/L～5g/L);選擇性IgA缺陷(IgA<0.05g/L)。注意：患者多為嬰幼兒，應(yīng)參照不同年齡組標(biāo)準(zhǔn)；不同檢測(cè)方法有差異，應(yīng)多次檢測(cè)。一、B細(xì)胞缺陷病的檢測(cè)（一）T細(xì)胞數(shù)量的檢測(cè)檢測(cè)內(nèi)容：T細(xì)胞總數(shù)和T細(xì)胞亞群。檢測(cè)方法：免疫熒光技術(shù)或流式細(xì)胞術(shù)。臨床意義：

--外周血T細(xì)胞總數(shù)低于1.2109/L，提示可能存在細(xì)胞免疫缺陷。二、T細(xì)胞缺陷病的檢測(cè)

（二）T細(xì)胞功能的檢測(cè)皮膚試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)抗原：結(jié)核菌素，白色念珠菌液；毛癬菌素；鏈激酶-鏈道酶；腮腺炎病毒液等。結(jié)果判斷：3種以上抗原皮試陽性者為正常，少于2種陽性或48h反應(yīng)直徑小于10mm，則提示細(xì)胞免疫缺陷或反應(yīng)性降低。二、T細(xì)胞缺陷病的檢測(cè)

（三）T細(xì)胞增殖試驗(yàn)方法：用非特異性刺激劑（常用PHA）刺激淋巴細(xì)胞，3H-TdR摻入法檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)。意義：T細(xì)胞缺陷患者增殖應(yīng)答能力降低，增殖低下程度與免疫受損程度一致。二、T細(xì)胞缺陷病的檢測(cè)（一）白細(xì)胞計(jì)數(shù)（二）運(yùn)動(dòng)功能的檢測(cè)（三）吞噬和殺傷試驗(yàn)（四）NBT還原試驗(yàn)三、吞噬細(xì)胞缺陷病的檢測(cè)（一）總補(bǔ)體活性測(cè)定：補(bǔ)體溶血試驗(yàn)。（二）單個(gè)補(bǔ)體成分測(cè)定：C3、C1q、C4、B因子、C1酯酶抑制物等。四、補(bǔ)體系統(tǒng)缺陷病的檢測(cè)（一）HIV抗原檢測(cè)：ELISA檢測(cè)HIV-P24（二）HIV抗體檢測(cè)：感染后2月～3月可出現(xiàn)

--初篩試驗(yàn)：ELISA,免疫金層析

--確認(rèn)試驗(yàn)：免疫印跡（三）CD4+T細(xì)胞計(jì)數(shù)五、AIDS的檢測(cè)HIV抗體檢測(cè)判斷標(biāo)準(zhǔn)：①HIV抗體陽性：至少2條膜帶(gp41/gp120/gp160)或1條膜帶與p24同時(shí)出現(xiàn)。②HIV抗體陰性：無HIV抗體特異性條帶出現(xiàn)。③HIV抗體可疑：有條帶出現(xiàn)，但不足以確認(rèn)。AIDS淋巴細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果判斷：①患者淋巴細(xì)胞總數(shù)減少，常<1.5109/L；②CD4+T細(xì)胞數(shù)絕對(duì)值下降，<0.5109/L時(shí)易發(fā)生機(jī)會(huì)感染，<0.2109/L時(shí)發(fā)生典型AIDS；③CD4/CD8比值下降，常<0.5，比值越低，細(xì)胞免疫功能受損越嚴(yán)重。本章小結(jié)免疫缺陷?。↖DD）是免疫系統(tǒng)先天發(fā)育障礙或后天損傷所引起的各種臨床綜合癥，分為原發(fā)性（PIDD）和繼發(fā)性（SIDD）兩類。主要臨床特征是易感染、易發(fā)惡性腫瘤和自身免疫病。PIDD包括B細(xì)胞、T細(xì)胞、T和B細(xì)胞聯(lián)合、吞噬細(xì)胞和補(bǔ)體缺陷病。Bruton綜合癥和DiGeorge綜合征分別是原發(fā)性B細(xì)胞和原發(fā)性T細(xì)胞缺陷病