現(xiàn)代分離技術(shù)-天然活性成分的層析純化策略復(fù)習(xí)課程

現(xiàn)代分離技術(shù)——天然活性成分的層析純化策略層析方法：反相硅膠優(yōu)點(diǎn)：常用于檢測、少量制備，有硅膠基架的C4，C8，C18以及聚苯乙烯基架的SOURCE介質(zhì)多種選擇，分辨率高。局限性：成本高，介質(zhì)昂貴、放大生產(chǎn)困難2層析方法：大孔樹脂優(yōu)點(diǎn)：常用于組分粗提、流速快、經(jīng)濟(jì)、吸附少局限性：選擇性少，驗(yàn)證文件不健全。合成原料及溶劑殘留問題；缺乏公認(rèn)統(tǒng)一的藥用標(biāo)準(zhǔn)、條件的規(guī)范化、重現(xiàn)性3層析方法：聚酰胺優(yōu)點(diǎn)：多用于提純黃酮、內(nèi)酯類成分局限性：流速慢，驗(yàn)證文件不健全4層析方法：超臨界萃取優(yōu)點(diǎn)：快速、回收率高、CO2成本低、無需處理有機(jī)溶劑局限性：設(shè)備成本高，強(qiáng)極性物質(zhì)提取受限制5層析方法：葡聚糖凝膠優(yōu)點(diǎn)：適合含羥基、氨基、羧基、芳香環(huán)的苷類、黃酮、多酚、丹寧等。可多次使用局限性：流速慢，比硅膠更適合親水性物質(zhì)，可與硅膠為互補(bǔ)技術(shù)。6層析方法：離子交換優(yōu)點(diǎn)：適合生物堿、有機(jī)酸等的分離。有些陰離子交換介質(zhì)也適合苷類、皂苷、黃酮純化，可多次使用局限性：受制于帶電荷物質(zhì)7純化平臺(tái)：生物堿平臺(tái)技術(shù)：〈PH3的酸水提取—陽離子交換SPSepharoseHP—中、高壓硅膠反相生物堿帶堿性，在傳統(tǒng)的硅膠或氧化鋁層析上效果往往不理想。SPSepharoseHP

載量高、易于直接放大，對生物堿有特殊的選擇性，可從酸水粗提物中分離結(jié)構(gòu)近似的十幾種生物堿，一步純化可達(dá)60-80%的純度。8純化平臺(tái)：生物堿中、高壓反相層析如Source15RPC或C18硅膠可將純度提高到90%以上。Source是以聚苯乙烯為基架的反相介質(zhì)，可耐受1M強(qiáng)酸強(qiáng)堿，比傳統(tǒng)的如反相介質(zhì)使用范圍更寬廣，壽命更長。9純化平臺(tái)：有機(jī)酸平臺(tái)技術(shù)：〉PH11的堿水提取—陰離子交換QSepharoseHP或SephadexLH20—中、高壓硅膠反相有機(jī)酸多成鹽，親水性強(qiáng)。帶負(fù)電荷，經(jīng)QSepharoseHP一步純化可達(dá)50%純度，然后再上SephadexLH20可至90%以上。10純化平臺(tái)：皂苷類平臺(tái)技術(shù)：〉PH11的堿水提取—陰離子交換QSepharoseHP—中、高壓硅膠反相皂苷同時(shí)具有強(qiáng)極性的糖基和弱極性的母核。皂苷含羧基11純化平臺(tái)：黃酮苷類平臺(tái)技術(shù)：水和醇提取—陰離子交換QSepharoseFF去色素—SephadexLH20—中、高壓硅膠反相QSepharoseFF是去處植物色素的有效方法，可對提取物進(jìn)行第一步純化，SephadexLH20適合精細(xì)純化12純化平臺(tái)：黃酮、醌、多酚類平臺(tái)技術(shù)：水和醇提取—SephadexLH20—中、高壓硅膠反相SephadexLH2013純化平臺(tái)：內(nèi)酯、萜類平臺(tái)技術(shù)：水和醇提取—中、高壓硅膠反相管道化的加壓硅膠層析可在密閉的環(huán)境下操作，大大提高生產(chǎn)速度、重復(fù)性、安全性、可控性。14純化平臺(tái)：蛋白質(zhì)、活性肽、動(dòng)物毒素平臺(tái)技術(shù)：Sepharose離子交換；Superdex/Sephacryl分子篩層析—SourceＲＰＣ反相層析蛋白類物質(zhì)在純化時(shí)需留意保持其空間結(jié)構(gòu)，避免失活，所以一般采取溫和的離子交換和分子篩層析，寡肽分子則可使用反相層析15純化平臺(tái)：多糖平臺(tái)技術(shù)：水、醇提取—穿透式Sepharose離子交換脫蛋白—Superdex200/Sephacryl300-1000分子篩層析一種藥材里可以含有多種類型的多糖，其結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、功效不一。如香菇中含有水溶性、酸溶性、堿溶性多糖，綜合利用分子篩及離子交換層析可進(jìn)一步獲得各組分純品。多糖中的蛋白質(zhì)可引起