血液學(xué)一般檢查實(shí)驗(yàn)課學(xué)習(xí)資料

血液學(xué)一般檢查實(shí)驗(yàn)課【器材】試管、試管架。2ml吸管、吸耳球。微量吸管、膠吸頭、干脫脂棉。玻璃棒。改良Neubauer計(jì)數(shù)板、蓋玻片、綢布。顯微鏡。MicropipettesMarkers:10ul20ulWarningline【試劑】

紅細(xì)胞稀釋液：枸椽酸鈉1.0g，36%甲醛液1.0ml，氯化鈉0.6g，加蒸餾水至100ml，混勻，過濾兩次后備用?！緲?biāo)本】

EDTA-K2抗凝靜脈血或末梢血?！静僮鳌?/p>

1．加稀釋液

紅細(xì)胞稀釋液2ml于小試管。2．采血及加血

顛倒混勻樣本，用微量吸管吸取全血10μl，擦去管尖外部余血。將吸管插入小試管中紅細(xì)胞稀釋液的底部，輕輕放出血液，并吸取上層紅細(xì)胞稀釋液清洗吸管2～3次。3．充池

充入計(jì)數(shù)池，放置2～3min。4．計(jì)數(shù)

將光圈調(diào)到最小，光線調(diào)暗，用低倍鏡找到計(jì)數(shù)區(qū)和格子線，用高倍鏡計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)4角和正中，共5個中方格內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)。5．計(jì)算紅紅紅紅紅

紅細(xì)胞數(shù)/L=N/5*25*201*10*10E6 =(N/100)*1012【參考值】

①成年人：男性（4.09～5.74）×1012/L，女性(3.68～5.13)×1012/L。②新生兒：(5.2～6.4)×1012/L。③嬰兒：(4.0～4.3)×1012/L。④兒童：(4.0～4.5)×1012/L。五個中方格計(jì)數(shù)和求均值乘以中方格數(shù)量乘以稀釋倍數(shù)將0.1微升體積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)換算成升【注意事項(xiàng)】1．器材2．試劑

3．標(biāo)本4．稀釋液及稀釋倍數(shù)5．采血6．充池7．計(jì)數(shù)白細(xì)胞計(jì)數(shù)【目的】掌握顯微鏡法白細(xì)胞計(jì)數(shù)（whitebloodcellcount）的方法?！驹怼?/p>

采用白細(xì)胞稀釋液將血液稀釋一定的倍數(shù)，同時破壞溶解紅細(xì)胞。將稀釋的血液注入血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)數(shù)一定體積內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)，經(jīng)換算即可求出每升血液中的白細(xì)胞數(shù)量。【器材】同紅細(xì)胞計(jì)數(shù),0.5ml吸管【試劑】

白細(xì)胞稀釋液：2％冰乙酸溶液【標(biāo)本】

EDTA-K2抗凝靜脈血或末梢血?！静僮鳌?．加稀釋液

吸取白細(xì)胞稀釋液0.38ml小試管中。2．采血及加血

顛倒混勻樣本，用微量吸管吸取全血20μl，擦去管尖外部余血。將吸管插入小試管中白細(xì)胞稀釋液的底部，輕輕放出血液，并吸取上層白細(xì)胞稀釋液清洗吸管2～3次。3．混勻

待細(xì)胞懸液完全變?yōu)樽睾稚?．充池

再次將小試管中的細(xì)胞懸液混勻。吸取細(xì)胞懸液1滴，注入計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池中，室溫下靜置2～3min，待白細(xì)胞完全下沉后再做白細(xì)胞計(jì)數(shù)。5．計(jì)數(shù)

將光圈調(diào)到最小，光線調(diào)暗，用低倍鏡找到計(jì)數(shù)區(qū)和格子線，用低倍鏡（或高倍鏡）下計(jì)數(shù)四角4個大方格內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)。6．計(jì)算

白細(xì)胞數(shù)/L=（N/4）*20*10*10E6=(N/20)*109【參考值】

①成人：（4～10）×109/L②兒童：（15～20）×109/L；6個月～2歲：（11～12）×109/L。③新生兒：（15～20）×109/L四個大方格計(jì)數(shù)和求均值后乘以稀釋倍數(shù)將0.1微升體積內(nèi)的細(xì)胞數(shù)換算成升【注意事項(xiàng)】類似于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。應(yīng)注意白細(xì)胞較紅細(xì)胞少，因此充池更加注重均勻。稀釋倍數(shù)，因細(xì)胞多少而異。試驗(yàn)結(jié)束后將用過的標(biāo)本、蓋玻片、微量吸管和紙屑等丟到大垃圾桶將玻璃試管用水沖洗干凈倒