標準解讀
《WS/T 66-1996 全血膽堿酯酶活性的分光光度測定方法 羥胺三氯化鐵法》是一項用于測定全血中膽堿酯酶活性的技術(shù)標準。該標準主要適用于醫(yī)學檢驗領(lǐng)域,特別是對于有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中毒的診斷具有重要意義,因為這類物質(zhì)能夠抑制膽堿酯酶活性,導致乙酰膽堿在體內(nèi)積累,進而引發(fā)一系列臨床癥狀。
標準詳細描述了使用羥胺與三氯化鐵反應生成有色化合物的方法來間接測量膽堿酯酶活性的過程。具體步驟包括樣品采集、處理以及通過添加特定試劑后觀察顏色變化并利用分光光度計讀取吸光度值。其中,羥胺作為底物,在膽堿酯酶作用下轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物;隨后加入三氯化鐵溶液,形成的絡合物呈現(xiàn)出特定波長下的最大吸收峰,從而實現(xiàn)對酶活性水平的定量分析。
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- 現(xiàn)行
- 正在執(zhí)行有效
- 1996-10-14 頒布
- 1997-05-01 實施
文檔簡介
W8中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T66-1996全血膽堿酯酶活性的分光光度測定方法羥胺三氯化鐵法Blood--Determinatoinofcholinesteraseactivity-Spectrophotometricmethod-Hydroxylamine-ferricchloridemethod1996-10-14發(fā)布1997-05-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布
中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準全血膽堿酯酶活性的分光光度測定方法WS/T66-1996輕胺三氯化鐵法Blood-Determinatoinofcholinesteraseactivity-Spectrophotometricmethod-Hydroxylamine-ferricchloridemethod主題內(nèi)客與適用范園本標準規(guī)定了血中膽堿酯酶活性的分光光度測定方法羥胺三氯化鐵法。本法最低檢測濃度為2.4rmol/L。本標準適用于正常人和接觸有機磷農(nóng)藥人員血中膽堿酯酵活性的測定。2原理血液膽堿酯酶使乙酰膽破分解為膽堿和乙酸。未被膽堿酯酶水解而剩余的乙酰膽堿與堿性經(jīng)胺反應,生成乙酰羥胺,然后,與三氯化鐵在酸性溶液中反應,形成紅色羥后酸鐵絡合物。顏色深度與剩余乙酰膽堿的量成正比。在波長520m比色定量,由水解的乙酰膽堿的量計算膽堿酯酶活性。儀器3.1分光光度計,10mm比色杯3.2比色管,10mL。3.3替通漏斗,40mmm。3.4恒溫水浴箱,控溫士0.5℃。3.5采血針頭。3.6血色素吸管,有20rL刻度。4試劑本標準所用試劑均為分析純試劑。4.1實驗用水,蒸館水或具同等純度的去離子水。4.2鹽酸,940-1.198/mL。43鹽酸溶液(1+2)。4.44堿性羥胺溶液,臨用前將139g/L鹽酸羥胺溶液和140g/L氫氧化鈉溶液等體積混合。4.5磷酸鹽緩沖液(pH-7.20),準確稱取碑酸氫二鈉(Na.HPO,·12H.O)8.36g和磷酸二氫鉀(KH.PO.)1.36g,用水溶解并稀釋到500mL,保存在冰箱內(nèi)。4.6三氯化鐵溶液,稱取10g三氯化鐵(FeCl,·6H.O)加0.84mL鹽酸(4.2),然后加水100mL。則存于棕色瓶中。4.7氯化乙酰膽藏標準液,精確稱取乙酰膽堿1.2716g,用磷酸鹽緩沖液(4.5)溶解,并稀釋到100mL,此溶液1mL相當于70“mol乙酰膽堿,為備液。臨用前
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