NY/T 684-2003犬瘟熱診斷技術(shù)

犐犆犛１１．２２０

犅４１

中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

犖犢／犜６８４—２００３

犬瘟熱診斷技術(shù)

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２００３０７３０發(fā)布２００３１００１實(shí)施

中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

書

犖犢／犜６８４—２００３

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ為規(guī)范性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)診斷中心。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：田克恭、王宏偉、遇秀玲、陳西釗、王傳彬。

Ⅰ

書

犖犢／犜６８４—２００３

犬瘟熱診斷技術(shù)

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了犬瘟熱（ＣＤ）的臨床診斷、犬瘟熱病毒（ＣＤＶ）的分離與鑒定、免疫酶試驗(yàn)和免疫酶組

織化學(xué)方法等診斷技術(shù)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于犬瘟熱的診斷。

２臨床診斷要點(diǎn)

２．１臨床癥狀

ＣＤ的臨床表現(xiàn)多種多樣，與ＣＤＶ的毒力，環(huán)境條件，宿主的年齡、品種及免疫狀態(tài)有關(guān)。病犬體

溫升高至４０℃以上，鼻流清涕至膿性鼻汁，膿性眼屎，有咳嗽、呼吸急促等肺炎癥狀，腹下可見米粒大丘

疹。病程長的犬足枕角質(zhì)層增生。病后期ＣＤＶ侵害大腦時(shí)則出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，頭、頸、四肢抽搐。

２．２病理變化

ＣＤＶ為泛嗜性病毒，對(duì)上皮細(xì)胞有特殊的親和力，因此病變分布非常廣泛。新生幼犬感染ＣＤＶ通

常表現(xiàn)胸腺萎縮。成年犬多表現(xiàn)結(jié)膜炎、鼻炎、氣管支氣管炎和卡他性腸炎。表現(xiàn)神經(jīng)癥狀的犬通?？?/p>

見鼻和腳墊的皮膚角化病。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的大體病變包括腦膜充血，腦室擴(kuò)張和因腦水腫所致的腦脊

液增加。

ＣＤＶ的包涵體通常呈嗜酸性，位于胞漿內(nèi)，直徑１μｍ～５μｍ，可在粘膜上皮細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞、白細(xì)

胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元中發(fā)現(xiàn)。核內(nèi)包涵體多位于被覆上皮細(xì)胞、腺上皮細(xì)胞和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。

３病毒分離與鑒定

３．１材料準(zhǔn)備

３．１．１試劑

３．１．１．１改良最低要素營養(yǎng)液（ＤＭＥＭ）培養(yǎng)基，配方見第Ａ．１章。

３．１．１．２非洲綠猴腎細(xì)胞（Ｖｅｒｏ細(xì)胞）。

３．１．１．３標(biāo)準(zhǔn)陽性血清：ＣＤＶ單克隆抗體，中和抗體效價(jià)１∶１０２４。

３．１．１．４標(biāo)準(zhǔn)陰性血清：無ＣＤＶ感染的犬血清。

３．１．１．５新生牛血清處理：用無血清ＤＭＥＭ洗滌細(xì)胞兩次，加入培養(yǎng)液二分之一量的新生牛血清，

３７℃吸附１ｈ。吸附后的新生牛血清分裝，置－２０℃?zhèn)溆谩?/p>

３．１．１．６青霉素、鏈霉素。

３．１．２器材

ａ）細(xì)胞培養(yǎng)瓶；

ｂ）吸