第二章：微生物的純培養(yǎng)與顯微技術(shù)

第二章：微生物的純培養(yǎng)與顯微技術(shù)1、微生物學(xué)基礎(chǔ)實驗技術(shù)—分離、培養(yǎng)與顯微技術(shù)對建立微生物學(xué)的意義；微生物由于個體微小，絕大多數(shù)情況下都是利用群體來研究其屬性，微生物物種（菌株）一般也是以群體的形式進行繁衍、保存。由于在通常情況下純培養(yǎng)物能較好地被研究、利用和保證結(jié)果的可重復(fù)性，因此，把特定的微生物從自然界混雜存在的狀態(tài)中分離、純化出來的純培養(yǎng)技術(shù)是進行微生物學(xué)研究的基礎(chǔ)。相應(yīng)地，微生物個體微小的特點也決定了顯微技術(shù)是進行微生物研究的另一項重要技術(shù)，因為絕大多數(shù)微生物的個體形態(tài)及其內(nèi)部結(jié)構(gòu)只能通過顯微鏡才能進行觀察和研究。2、如何理解過大、過小的（微）生物其生長速度都較慢？答疑的時候老師也沒完全說明白3、常見光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡的種類以及它們的特點、應(yīng)用范圍？常見光學(xué)顯微鏡有普通光學(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡等。普通光學(xué)顯微鏡：利用目鏡和物鏡兩組透鏡系統(tǒng)來放大成像，放大倍數(shù)最高只能達到1000~1500倍。最小可分辨距離

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暗視野顯微鏡：利用聚光器實現(xiàn)斜射照明，光線由樣品反射或折射后進入物鏡，因此視野是暗的而樣品是亮的，樣品與背景反差增大。主要用于觀察生活細菌的運動性，看不見內(nèi)部細微結(jié)構(gòu)。相差顯微鏡：細胞各部分的折射率及厚度差異→光程差→相位差→環(huán)狀光闌和相差板→振幅差（明暗差）。用于觀察在普通光學(xué)顯微鏡下不易看到的活細胞和細胞內(nèi)的細微結(jié)構(gòu)。N。熒光顯微鏡：紫外線照射下，發(fā)熒光的物體在黑暗背景下表現(xiàn)為光亮的有色物體?？捎^察特異的細胞，應(yīng)用于免疫學(xué)、環(huán)境微生物學(xué)、分子生物學(xué)。常見電子顯微鏡有透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡等。透射電子顯微鏡：以波長比可見光短得多的電磁波取代可見光來成像，可提高分辨能力。電鏡鏡筒中為高真空，采用電磁圈來匯聚光線，用熒光屏來觀察或用膠片記錄影像。N。掃描電子顯微鏡：電子束被磁透鏡匯聚成極細的電子“探針”，在樣品表面進行“掃描”，激發(fā)樣品表面放出二次電子。用于觀察樣品的表面結(jié)構(gòu)。掃描隧道顯微鏡：利用量子力學(xué)的隧道效應(yīng)。需要樣品有一定導(dǎo)電性，可不損壞樣品。目前分辨率最高，橫向達到0.1~0.2nm，縱向達到0.001nm。直接觀察生物大分子。N。原子力顯微鏡：利用激光裝置來檢測探針和樣品之間的相互作用?？捎^察不導(dǎo)電樣品。4、決定顯微鏡觀察效果的因素是什么？是分辨率（最小可分辨距離）和反差（樣品與背景的區(qū)別程度）。（兩個因素：波長、振幅）5、為什么說掃描隧道顯微鏡、原子力顯微鏡不屬于電子顯微鏡？掃描隧道顯微鏡、原子力顯微鏡與電子顯微鏡的原理不同，不是利用電子束來成像。6、為什么觀察細菌一般要使用油鏡，油鏡為何能提高分辨率？因為：油鏡利用折射率與玻璃相近的介質(zhì)（如香柏油，n=1.52），很多原來由于在透鏡及載片表面的反射和折射而損失的光線可以進入物鏡，使照明亮度提高，改善觀察效果。7、染色前在載玻片上固定微生物細胞的目的是什么？有哪些常用方法？其目的是：殺死細菌并使菌體黏附于玻片上；增加其對染料的親和力。常用方法有酒精燈火焰加熱和化學(xué)固定兩種。8、有哪些常用觀察活體的制片方法，活體觀察有何優(yōu)點和缺點？有壓滴法、懸滴法和壓（埋）片法。優(yōu)點：活體觀察可以避免一般染色制樣時的固定作用對微生物細胞結(jié)構(gòu)的破壞；缺點：由于微生物細胞透明，無法觀察細致形態(tài)。9、對基因工程菌進行高密度培養(yǎng)的目的是什么？有什么常用方法？外源基因表達產(chǎn)量與細胞濃度正相關(guān)。（1）選取最佳培養(yǎng)基成分和各成分含量。（2）補料，這是工程菌高密度培養(yǎng)的重要手段之一。（3）提高溶解氧的濃度，提高好氧菌和兼性厭氧菌培養(yǎng)時的溶氧量也是高密度培養(yǎng)的重要手段之一。（4）防止有害代謝產(chǎn)物的生成。10、什么是二元培養(yǎng)物？在什么情況下使用二元培養(yǎng)物？培養(yǎng)物中只含有兩種微生物，并有意識地保持兩者之間的特定關(guān)系。有些情況下無法獲得純培養(yǎng)，這時使用二元培養(yǎng)物作為替代。如病毒。11、什么是菌落和菌苔？菌落（colony）：單個（或聚集在一起的一團）微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞生長群體。菌苔（lawn）：眾多菌落連成一片。12、常用純種分離的方法有哪些？為什么純種分離是微生物學(xué)研究的第一步？使用微生物的純培養(yǎng)物有何局限？什么是宏基因組？常用方法：固體培養(yǎng)基：稀釋分離法、劃線分離法；液體培養(yǎng)基：稀釋法；單細胞（孢子）分離。見第1題。局限：不可培養(yǎng)微生物：顯微鏡觀察計數(shù)出來的細胞數(shù)遠遠大于用各種培養(yǎng)基培養(yǎng)出來的菌落數(shù)。宏基因組（Metagenome）是特定小生境中全部微小生物遺傳物質(zhì)的總和——通過基因工程獲得新的功能基因。13、為什么要求在特定的培養(yǎng)基上觀察菌落的特征？不同微生物在特定培養(yǎng)基上生長形成的菌落或菌苔一般都具有穩(wěn)定的特征（形狀、顏色等），可以成為對該微生物進行分類、鑒定的重要依據(jù)。培養(yǎng)基不同，菌落形態(tài)會發(fā)生變化。第三章：原核微生物的細胞形態(tài)及繁殖方式1、廣義和狹義的細菌指哪些微生物？狹義的細菌指細胞細短(直徑約0.5μm，長度0.5—5μm)、胞壁堅韌、通常以二分分裂來繁殖的原核生物。廣義的細菌包括真細菌、放線菌、藍細菌、支原體、立克次氏體和衣原體等原核微生物。2、細菌的基本形態(tài)與特殊形態(tài)有哪些？細菌的基本形態(tài)有球菌、桿菌和螺旋菌（弧菌、螺菌）。細菌的特殊形態(tài)有（1）柄細菌prosthecaebacteria（2）絲狀細菌（3）支原體（無壁）mycoplasma3、什么是細菌的衰頹形、畸形？為什么細胞形態(tài)會受環(huán)境條件的影響？衰頹形：營養(yǎng)缺乏，自身代謝廢物積累過多，細胞衰老?；危和饨缋砘蛩卮碳ぃ璧K了細胞的發(fā)育，從而引起形態(tài)的異常變化。與細菌的代謝有關(guān)。4、細菌的繁殖方式有哪些？（1）均等分裂：二分分裂、復(fù)分裂(蛭弧菌)；（2）不均等分裂：異型分裂、出芽繁殖；（3）有性繁殖。5、簡述柄桿菌的生活史。p370細胞延長，以收縊方式行二分分裂，無隔膜→一端長出一根鞭毛，成為游動細胞→與母細胞脫離，游動→固著在新的基物上→鞭毛消失，由長鞭毛處形成新柄。6、簡述螺旋體的主要形態(tài)特征。菌體細長、彎曲呈螺旋狀，細胞外圍裹以細胞質(zhì)膜和細胞壁，形成原生質(zhì)柱，外面纏繞著周質(zhì)鞭毛，也稱軸絲，軸絲與原生質(zhì)柱再由3層膜包圍，稱為外鞘。7、簡述黃色粘球菌的生活史及研究粘細菌的意義。營養(yǎng)細胞聚集成細胞堆→產(chǎn)生粘孢子→形成子實體→產(chǎn)生粘孢子→發(fā)芽粘細菌具有社會性行為，有多細胞分化，有序聚集、排列。研究其分化的發(fā)生以及其細胞間的信號通路，對于理解生命進化和分化發(fā)育的分子機制有重要意義。兩組分系統(tǒng)的數(shù)量與組成；粘細菌的基因組在原核生物中是最大的；粘細菌的運動與信號傳導(dǎo)。8、研究放線菌對人類的生產(chǎn)實踐、科學(xué)研究、生態(tài)環(huán)境有何主要應(yīng)用？抗生素物質(zhì)轉(zhuǎn)化與固氮，生產(chǎn)酶制劑與維生素9、鑒于尋找新的抗生素需要花費巨大的人力、物理，改造現(xiàn)有的抗生素是生產(chǎn)新藥的重要途徑，改造方法有哪些？基因工程、化學(xué)合成、半化學(xué)合成10、鏈霉菌的主要形態(tài)特征是什么？鏈霉菌的基內(nèi)菌絲和氣生菌絲發(fā)達，產(chǎn)生多種形態(tài)的孢子絲和孢子。鏈霉菌的基內(nèi)菌絲與孢子絲的顏色常不一致，因此其菌落的正反面顏色也不一樣。有時還產(chǎn)生色素。11、放線菌的繁殖方式有哪些？菌絲斷裂（諾卡氏菌）；分生孢子（鏈霉菌）；孢囊孢子（鏈孢囊菌、弗蘭克氏菌）。12、藍細菌的異形胞消除氧氣的機制是什么？異型胞僅含少量藻膽素，缺乏光和系統(tǒng)Ⅱ，所以不產(chǎn)生氧氣或固定CO2。在異型胞內(nèi)通過NH3+CH2O->谷氨酸鹽過程中消耗氧氣。13、簡述蛭弧菌的生活史及主要的實際應(yīng)用。蛭弧菌的生活史分為非寄生和寄生兩個階段。寄生階段：蛭弧菌侵入宿主（細菌）細胞，在膜壁之間形成蛭質(zhì)體→宿主細胞膨脹，蛭弧菌分裂→宿主細胞破裂釋放子代蛭弧菌。實際應(yīng)用：防治農(nóng)業(yè)有害細菌、人畜致病菌。14、簡述支原體的生物學(xué)特點？支原體無細胞壁，只有細胞膜，細胞非常小，柔軟而形態(tài)多變。革蘭氏陰性。部分為致病菌。可用人工培養(yǎng)基直接培養(yǎng)。15、簡述衣原體的生活史。衣原體在宿主細胞內(nèi)存在原體和始體兩種形態(tài)。具有感染性的原體通過胞飲作用進入宿主細胞，被宿主細胞膜包圍形成空泡，原體逐漸增大為始體。始體無感染性，在空泡內(nèi)以二分裂方式反復(fù)繁殖，形成大量新的原體，積聚于細胞質(zhì)內(nèi)成為各種形狀的包涵體，宿主細胞破裂，釋放出原體。16、立克次氏體的主要生物學(xué)特點是什么？哪些證據(jù)表明線粒體可能起源于類似立克次氏體的原核生物？立克次氏體是原核微生物，革蘭氏陰性。營嚴格的活細胞內(nèi)寄生，主要以昆蟲為媒介，寄生在它們的消化管表皮細胞中，通過節(jié)肢動物叮咬和排泄物傳播給人和其他動物。缺乏糖酵解途徑；存在腺苷酸轉(zhuǎn)化系統(tǒng)；可以利用三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物和谷氨酸；基因組序列的同源性。17、比較支原體、衣原體、立克次氏體與病毒的異同。特征支原體立克次氏體衣原體病毒核酸種類DNA、RNADNA、RNADNA、RNADNA或RNA核糖體有有有無大分子合成有部分部分無合成ATP有缺陷嚴重缺陷無增殖中結(jié)構(gòu)完整性保持保持保持喪失抗生素敏感敏感敏感敏感不敏感18、Woese通過比較16srRNA序列將所有的生物分為三域，為何選擇16srRNA序列作為分類依據(jù)？Woese的結(jié)論有何科學(xué)意義？這種分類方法又有何局限？為什么說古生菌有可能是最早的生命形式？1.rRNA參與生物蛋白質(zhì)的合成，在生物漫長的進化過程，其功能保持不變。2.16SrRNA分子中，既含有高度保守的序列區(qū)域，又有中度保守和高度變化的序列區(qū)域，適用進化距離不同的各類生物親緣的關(guān)系。3.16SrRNA相對分子質(zhì)量大小適中，便于序列分析。4.16SrRNA普遍存在于真核生物和原核生物中。三域之間的相似性低于60%，而域內(nèi)的相似性高于70%，后得到其他生物大分子的驗證。Woese用這把尺子對微生物系統(tǒng)發(fā)育進行了開拓性研究，首次提出了涵蓋整個生命界的系統(tǒng)樹，發(fā)現(xiàn)了生命的第三種形式——古生菌。局限：只能得出樹狀進化，而細菌的進化是網(wǎng)狀的，進化過程中有基因的橫向轉(zhuǎn)移。古生菌有可能是最早的生命形式：部分生活于極端環(huán)境。19、簡述古生菌與細菌的主要區(qū)別？為什么說古生菌是細菌的形式，真核生物的內(nèi)涵？古生菌細胞形態(tài)獨特，細胞壁、細胞膜的組成與細菌不同，基因組較小。基因轉(zhuǎn)錄和翻譯系統(tǒng)界于細菌與真核生物之間。20、古生菌、細菌與真核生物的異同點。特征細菌古菌真核生物細胞大小0.2μm0.2μm2μm核膜無無有遺傳物質(zhì)染色體一條（環(huán)狀），質(zhì)粒一條（環(huán)狀），質(zhì)粒多條（線狀），細胞器DNA細胞壁肽聚糖假肽聚糖，蛋白質(zhì)纖維素、幾丁質(zhì)細胞膜脂肪酸，酯鍵，直鏈異戊二烯，醚鍵，分枝，甾醇脂肪酸，酯鍵，直鏈，甾醇第四章：原核微生物的細胞結(jié)構(gòu)與功能1、細菌細胞壁的功能有哪些？固定細胞外型和提高機械強度；細胞的生長、分裂和鞭毛運動所必需；機械屏障（MW>800）；抗原性和致病性；噬菌體的侵染位點；一些抗生素的敏感性。2、簡述G+、G-細菌細胞壁的組成與結(jié)構(gòu)。G+細胞壁有較厚的網(wǎng)狀肽聚糖層，磷壁酸結(jié)合在細胞壁（細胞膜）上；G-細菌細胞壁肽聚糖層薄，其外有外膜（或稱外壁，由脂多糖、磷脂和脂蛋白等蛋白質(zhì)組成），外膜與細胞膜間有周質(zhì)空間。3、簡述金黃色葡萄球菌蛋白A的特點與應(yīng)用：金黃色葡萄球菌蛋白A以共價鍵與肽聚糖結(jié)合，十分穩(wěn)定，用4mol/L尿素、硫氰鹽酸、6mol/L的鹽酸胍和pH2.5的酸性條件，以及加熱煮沸均不影響其活性。能與人及多種哺乳動物血清IgG分子結(jié)合。廣泛用于純化抗體和廣譜第二抗體。3、試述革蘭氏染色的步驟與機制。（1）初染：用草酸銨結(jié)晶紫染液染色1min，用水沖洗。（2）媒染：加革氏碘液沖去殘余水分，用碘液覆蓋1min，用水沖洗。（3）脫色：載片斜置，滴加95%乙醇，并輕輕搖動載片，至乙醇液不再呈紫色（30s），立即用水沖洗，并用濾紙輕輕吸干。（4）復(fù)染：用蕃紅染液染色1min，用水沖洗。革蘭氏陽性菌的細胞壁含肽聚糖量較高，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)致密，經(jīng)乙醇脫水孔徑縮小，使結(jié)晶紫與碘形成的大分子復(fù)合物難被脫色，復(fù)染后細胞呈紫色。而革蘭氏陰性菌肽聚糖層薄，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)疏松且類脂含量高，經(jīng)乙醇處理細胞壁孔徑變大，結(jié)晶紫與碘形成的復(fù)合物溶出，復(fù)染后細胞呈紅色。4、什么是細菌的內(nèi)毒素與外毒素？細菌在生長過程中合成并分泌到胞外的毒素稱外毒素，通常為蛋白質(zhì)，具有強免疫原性，毒性作用強。按其作用部位可分為細胞毒素、神經(jīng)毒素和腸毒素。許多革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌均可產(chǎn)生外毒素。內(nèi)毒素即革蘭氏陰性菌細胞壁脂多糖（LPS），于菌體裂解時釋放，相對毒性較弱，且沒有器官特異性。5、簡述抗酸性染色的步驟及機制?？顾嵝匀旧脕頇z驗抗酸細菌。過程：堿性品紅和苯酚染色，加熱→蒸餾水沖洗→酸性酒精（3%鹽酸+95%乙醇）脫色→水洗后，加入美蘭復(fù)染?？顾峒毦始t色，一般細菌呈藍色。分支桿菌的細胞壁有特殊的脂類物質(zhì)——分枝菌酸，分支菌酸厚且呈蠟質(zhì)，可以抵御酸性酒精的脫色作用。6、什么是L型細菌、原生質(zhì)體和球狀體？L型細菌是細菌在某些環(huán)境條件下（實驗室或宿主體內(nèi)）通過自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細胞壁缺陷變異型。原生質(zhì)體是在人為條件下，用溶菌酶處理或在含青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)而抑制新生細胞壁合成而形成的僅由一層細胞膜包裹的，圓球形、對滲透壓變化敏感的細胞，一般由革蘭氏陽性細菌形成。球狀體是采用上述同樣方法，針對革蘭氏陰性細菌處理后而獲得的殘留部分細胞壁（外壁層）的球形體。7、簡述肽聚糖合成的主要步驟及細菌萜醇的結(jié)構(gòu)與功能。（1）在細胞質(zhì)中的合成A由葡萄糖合成N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸B由N-乙酰胞壁酸合成“Park”核苷酸（2）在細胞膜上的合成：連接N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸“Park”核苷酸需要穿過疏水的細胞膜雙分子層—類脂載體細菌萜醇（3）在細胞膜外的合成A轉(zhuǎn)糖基作用（橫向連接）B轉(zhuǎn)肽作用（縱向連接）抗生素的作用機制：與“五”肽尾末端的D-丙氨酰-D-丙氨酸結(jié)構(gòu)類似，競爭性抑制轉(zhuǎn)肽酶的活性。8、古生菌的細胞壁主要有哪些類型？細胞壁組成的哪個特點決定了嗜鹽菌的生長對鹽有一定的依賴性？假肽聚糖細胞壁（甲烷桿菌）；硫酸化多糖細胞壁（鹽球菌）；獨特多糖細胞壁（甲烷八疊球菌）；糖蛋白細胞壁（鹽桿菌）；蛋白質(zhì)細胞壁。細胞壁帶強負電荷，環(huán)境中的高濃度Na+可以維持細胞壁的穩(wěn)定性。當外環(huán)境中的Na＋被降低，或?qū)⒃诟啕}溶液中的嗜鹽菌移入低鹽溶液中，由于賴以維持細胞壁穩(wěn)定性的Na＋的減少，會導(dǎo)致細胞壁一塊塊地破裂，最后嗜鹽菌的細胞被裂解。9、古生菌細胞膜區(qū)別于細菌細胞膜的主要特點有哪些？。（1）親水頭（甘油）與疏水尾（烴鏈）之間是通過醚鍵連接，真細菌則是通過酯鍵連接；（2）古生菌中組成疏水尾的烴鏈是異戊二烯的重復(fù)單位；（3）古生菌的細胞膜存在著獨特的單分子層(熱原體)或單、雙分子層的混合；（4）在甘油分子的3-C上，可連接與真細菌和真核生物不同的基團，如硫酸酯、多糖等；（5）含有獨特脂質(zhì)，如細菌紅素，α—胡蘿卜素，β—胡蘿卜素、視黃醛等。10、細菌內(nèi)儲藏物的種類、特點是什么？有什么應(yīng)用？不同微生物其儲藏性內(nèi)含物不同；微生物合理利用營養(yǎng)物質(zhì)的一種調(diào)節(jié)方式；儲藏物以多聚體的形式存在，有利于維持細胞內(nèi)環(huán)境的平衡，避免不適合的pH，滲透壓等的危害。聚-β-羥丁酸是生產(chǎn)醫(yī)用塑料、生物降解塑料的良好原料。異染粒在白喉棒桿菌和結(jié)核分枝桿菌中極易見到，可用于這些細菌的鑒定。11、芽孢是如何被發(fā)現(xiàn)的？其概念、生物學(xué)特點是什么？1876，科赫首先發(fā)現(xiàn)芽孢。1877，丁道爾發(fā)現(xiàn)，肉與新鮮蔬菜的汁液煮沸幾分鐘可滅菌；干草的汁液煮沸幾小時不能滅菌；其他的汁液無法重復(fù)干草的結(jié)果。同年，科恩在顯微鏡下觀察到“內(nèi)生孢子”。某些細菌在其生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形、厚壁、含水量極低、抗逆性極強的休眠體，稱為芽孢（endospore或spore）。產(chǎn)芽孢的細菌多為桿菌，也有一些球菌、螺菌。芽孢是整個生物界中抗逆性最強的生命體，耐熱、輻射、化學(xué)藥物。在適宜的條件下產(chǎn)生并可以重新轉(zhuǎn)變成為營養(yǎng)態(tài)細胞。12、簡述芽孢的結(jié)構(gòu)、耐熱機制及研究芽孢的意義。耐熱機制：滲透調(diào)節(jié)皮層膨脹學(xué)說：芽孢衣的透性差->皮層產(chǎn)生高滲透壓->奪取芽孢核心的水分->核心部位含水量的稀少->耐熱機制的關(guān)鍵。DPA—Ca2+：與DPA的螯合會使芽孢中的生物大分子形成一種穩(wěn)定而耐熱的凝膠。細菌重要的形態(tài)特征，可用于細菌鑒定；分離、篩選芽孢菌；保藏菌種；滅菌的指標。研究芽孢的意義還有研究其抗逆性機理；細胞決定、分化以及發(fā)育；不對稱分裂；兩組分系統(tǒng)；抗生素；感受態(tài)；生物被膜等。13、什么是伴孢晶體？有何實際應(yīng)用？少數(shù)芽孢桿菌，例如蘇云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)在其形成芽孢的同時，會在芽孢旁形成一顆菱形或雙錐形的堿溶性蛋白晶體——δ內(nèi)毒素，稱為伴孢晶體。特點：不溶于水，容易溶于堿性溶劑；對蛋白酶類不敏感。生物農(nóng)藥—細菌殺蟲劑，伴孢晶體對200多種昆蟲尤其是鱗翅目的幼蟲有毒殺作用。14、什么是孢囊，有何特點？細菌還有哪些其他的休眠結(jié)構(gòu)？固氮菌在缺乏營養(yǎng)的條件下，圍繞營養(yǎng)細胞的細胞壁外形成的附加層，抗干旱、機械破壞、紫外，不耐熱。為不完全的休眠結(jié)構(gòu)。其他的休眠結(jié)構(gòu)有粘孢子（粘細菌）、外生孢子（生絲微菌屬）等。15、什么是菌膠團、莢膜、粘液層和Slayer；莢膜的功能是什么？K抗原指的是細菌的哪種抗原？菌膠團：包裹在細胞群外的糖被。莢膜：固定在細胞壁上的糖被。功能：1保護作用：干旱、噬菌體、宿主白細胞的吞噬；2貯藏養(yǎng)料；3透性屏障和離子交換系統(tǒng)；4表面附著（如齲齒）；5信息識別；6堆積代謝廢物。粘液層：松散地連接在細胞壁上的糖被。S層：一層包圍在原核微生物細胞壁外、由大量蛋白質(zhì)或糖蛋白亞基以方塊形或六角形方式排列的連續(xù)層。K抗原即莢膜抗原。16、細菌鞭毛的形態(tài)特征有哪些？如何判斷細菌具有鞭毛？生長在某些細菌體表的長絲狀、波曲的蛋白質(zhì)附屬物，數(shù)目從一根到幾十根不等，具有運動能力。鞭毛由基體、鉤形鞘和鞭毛絲組成。革蘭氏陰性菌的鞭毛基體由4個盤狀物即環(huán)（L、P、S、M）組成，其中S環(huán)與M環(huán)構(gòu)成分子馬達的轉(zhuǎn)子，Mot蛋白為馬達定子，F(xiàn)li蛋白（C環(huán)）為馬達的鍵鈕。鞭毛馬達的能量來自細胞膜內(nèi)外的質(zhì)子梯度。鉤形鞘連接鞭毛絲和基體，為彎形，可旋轉(zhuǎn)。鞭毛絲由許多鞭毛蛋白亞基螺旋排列而成，末端有一冠蛋白。革蘭氏陽性菌的鞭毛結(jié)構(gòu)相對簡單。A電鏡觀察；B鞭毛染色；C暗視野顯微鏡直接觀察細菌懸液；D半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)：穿刺法接種細菌，經(jīng)培養(yǎng)后若在穿刺線周圍有呈混濁的擴散區(qū)，說明長有鞭毛；E平板上菌落的直接觀察：菌落形狀大、薄且不規(guī)則，邊緣極不圓整，說明有鞭毛。17、細菌有哪些趨性？什么是趨化反應(yīng)？有趨化性、趨光性、好氧、厭氧。趨化反應(yīng)：細菌朝向或離開化學(xué)物質(zhì)而運動。18、細菌菌毛與性毛的形態(tài)特征有那些？菌毛與性毛的功能是什么？H抗原指的是細菌的哪種抗原？菌毛纖細、中空、短直、數(shù)量較多，成分為蛋白質(zhì)。結(jié)構(gòu)簡單，無基體等復(fù)雜構(gòu)造，由許多菌毛蛋白亞基圍繞中心作螺旋狀排列，著生于細胞膜上。用于黏附而非運動。性毛構(gòu)造、成分與菌毛相同，但比菌毛長、粗，數(shù)量僅一至少數(shù)幾根。一般見于革蘭氏陰性菌的雄性菌株中，功能是向雌性菌株傳遞遺傳物質(zhì)。有的性毛還是RNA噬菌體的特異性吸附受體。H抗原即鞭毛抗原。19、鞘細菌中鞘的功能有哪些？可防御原生動物和某些細菌的攻擊；鞘上一般有固著器，可附著于固形物上；當水中營養(yǎng)不足時，鞘可隨水流動而富集營養(yǎng)。第五章：真核微生物的細胞形態(tài)及繁殖方式1、真菌的主要特點是什么？不含葉綠體、化能有機營養(yǎng)、具有真正的細胞核（核仁和核膜在核分裂中仍保持）、含有線粒體等細胞器，通常以孢子進行繁殖，有各種有性和無性孢子，孢子不運動。不運動的真核微生物。其個體一般較原核微生物大。2、真菌在人類生產(chǎn)實踐和科學(xué)研究中有哪些應(yīng)用？又有哪些危害？釀造工業(yè)與食品；食用與藥用；青霉素等抗生素；甾類激素藥物；單細胞蛋白以及核苷酸、輔酶A、核黃素等生化制劑。一些真菌有致病性，可引起農(nóng)作物病害或人畜疾病。3、從哪些方面可理解真菌與植物的密切關(guān)系？植物的親密合作者：>70%的植物有菌根（植物的根與真菌的共生體），包括谷類、豌豆、土豆、洋蔥及蘋果；植物病菌：70%的植物疾病由真菌引起，如稻瘟病、小麥銹病、馬鈴薯晚疫病等；分解者：纖維素及木質(zhì)素的降解。4、真菌主要分為哪幾個類群，其主要分類依據(jù)是什么？低等真菌:菌絲體(如果有的話)沒有橫隔，多核。高等真菌：菌絲有橫隔，陸生；分生孢子或配子(如果有的話)是不運動的。酵母:單細胞，卵圓形，通過出芽或裂殖進行無性生殖。5、酵母的無性及有性繁殖方式有哪幾種？A芽殖是主要的無性繁殖方式。B二分分裂繁殖。C擲孢子：擲孢酵母。D節(jié)孢子：地霉屬。E厚垣孢子：白色假絲酵母。有些酵母菌的有性繁殖通過子囊孢子的方式進行（屬于子囊菌），也有一些以接合孢子或擔(dān)孢子的方式進行有性繁殖。6、什么是假絲酵母？什么是二型態(tài)？什么是假酵母？酵母菌進行芽殖后，長大的子細胞不與母細胞立即分離，并繼續(xù)出芽，細胞成串排列，這種菌絲狀的細胞串就稱為假菌絲。二型態(tài)：在不同的生長條件下，一些真菌的營養(yǎng)體呈現(xiàn)兩種不同的細胞形態(tài)，即絲狀形態(tài)（M）和酵母狀形態(tài)(Y)。假酵母：只有無性繁殖過程。真酵母：既有無性繁殖，又有有性繁殖過程。7、簡述酵母三種類型的生活史？營養(yǎng)體只能以單倍體形式存在（核配后立即進行減數(shù)分裂）。如八孢裂殖酵母。營養(yǎng)體只能以雙倍體形式存在（核配后不立即進行減數(shù)分裂）。如路德類酵母。營養(yǎng)體既可以單倍體也可以雙倍體形式存在，都可進行出芽繁殖。如釀酒酵母。8、霉菌菌絲有哪些特化結(jié)構(gòu)？其功能是什么？9、霉菌菌絲橫隔的功能有哪些？有孔隔膜：支持菌絲強度；允許細胞質(zhì)、細胞器、細胞核的流動。封閉隔膜：菌絲受損后，迅速堵塞以防止細胞質(zhì)流失；也隔離衰老的菌絲；生殖細胞的隔離：細胞分化。10、霉菌的無性繁殖方式有哪些？菌絲斷裂、節(jié)孢子、厚垣孢子、孢囊孢子、分生孢子、芽生孢子。11、霉菌的有性繁殖方式有哪些？霉菌有性繁殖有什么特點？卵孢子、接合孢子、子囊孢子、擔(dān)孢子。A霉菌的有性繁殖不如無性繁殖那么經(jīng)常與普遍，多發(fā)生在特定條件下，往往在自然條件下較多，在一般培養(yǎng)基上不常見。B有性繁殖方式因菌種不同而異，有的兩條營養(yǎng)菌絲就可以直接結(jié)合，有的則由特殊的性細胞（性器官）--------配子囊或由配子囊產(chǎn)生的配子來相互交配，形成有性孢子。C核配后一般立即進行減數(shù)分裂，因此菌體染色體數(shù)目為單倍，雙倍體只限于接合子。D霉菌的有性繁殖存在同宗配合和異宗配合兩種情況。E霉菌的有性孢子包括接合孢子、子囊孢子、擔(dān)孢子等。12、什么是真菌的準性生殖，有什么應(yīng)用？在不進行有性生殖（減數(shù)分裂）的情況下發(fā)生基因重組的生殖過程。在該過程中染色體的交換和染色體的減少不象有性生殖那樣有規(guī)律，而且也是不協(xié)調(diào)的。利用準性生殖既可以進行遺傳學(xué)的研究，也可以進行工業(yè)育種。13、簡述鎖狀聯(lián)合的過程。擔(dān)子菌的次生菌絲每一個細胞都有二個核，其中一個核來自母本，一個來自父本，當雙核細胞進行細胞分裂時，在二個核之間處生一個短小彎曲的分枝，核移動，一個核進入鉤，一個留在菌絲。兩個核分裂后，鉤中保留一個核，菌絲中二個核一往前一個往后移，鉤狀突起向下彎曲與細胞壁接觸溶化，分枝基部生分隔膜（分隔中間有孔道），在原分支外形成一隔膜，產(chǎn)生一個新細胞雙核體，在分隔處保留一個橋形結(jié)構(gòu)稱鎖狀聯(lián)合。保證每個菌絲細胞內(nèi)都含有兩個不同性別的核。為進行有性生殖，通過核配形成擔(dān)子打下基礎(chǔ)。14、簡述黑根霉的生活史。黑根霉的有性生殖和水綿的接合很相似。2個不同接合型的菌株靠近，菌絲上生出側(cè)枝，側(cè)枝頂端膨大而成配子囊。配子無鞭毛。2個不同接合型的配子囊互相接觸，融合為一，其中配子兩兩融合而成多個合子。合子經(jīng)過一段休眠后，減數(shù)分裂而成多個單倍性核，其中一個發(fā)育成新的菌絲。菌絲成長，頂端發(fā)育成孢子囊，產(chǎn)生無數(shù)黑色孢子。孢子再萌發(fā)成新的菌絲（n）。所以黑根霉的生活史中只有合子是二倍性的，其余階段，包括菌絲，都是單倍性的。第六章：真核微生物的細胞結(jié)構(gòu)與功能1、真菌細胞壁的主要特點是什么？葡聚糖是酵母細胞壁的主要成分；幾丁質(zhì)是其他高等陸生真菌的主要成分。“鋼筋混凝土”結(jié)構(gòu)：鋼筋——纖維狀物質(zhì)：主要是糖苷鍵連接成的微纖絲，賦予細胞壁堅韌的機械性能；混凝土——無定形的基質(zhì)，如甘露聚糖和蛋白質(zhì)等，混填在纖維狀物質(zhì)構(gòu)成的網(wǎng)內(nèi)或網(wǎng)外，充實細胞壁的結(jié)構(gòu)。2、酵母細胞壁的主要成分及特點是什么？成分：葡聚糖、甘露聚糖、蛋白質(zhì)和幾丁質(zhì)，還有少量脂質(zhì)。葡聚糖在內(nèi)層，是賦予酵母細胞機械強度的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。甘露聚糖位于外側(cè)，呈網(wǎng)狀，去除后細胞仍維持正常形態(tài)。蛋白質(zhì)夾在中間。幾丁質(zhì)分布于芽痕周圍。3、簡述霉菌（粗糙脈胞霉）細胞壁的主要結(jié)構(gòu)特點。最外層無定形的葡聚糖（87nm）；中層為糖蛋白嵌埋在蛋白質(zhì)基質(zhì)中，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)（49nm）。內(nèi)層為蛋白質(zhì)層（9nm）。最內(nèi)層由幾丁質(zhì)微纖維組成。（18nm）4、真菌與細菌鞭毛的差別有哪些？功能與原核生物的鞭毛相同。構(gòu)造：9+2，基體9+0。運動機理：揮鞭式。消耗能量形式：ATP。細胞壁的依賴性上有差別。5、簡述微體的功能。過氧化物酶體：主要有依賴黃素的氧化酶和過氧化氫酶，能保護細胞免受過氧化氫毒害，還能氧化分解脂肪酸。乙醛酸循環(huán)體：與孢子萌發(fā)有關(guān)。6、簡述真菌液泡的功能與溶酶體功能相似，內(nèi)含各種酶（蛋白酶、纖維素酶等）；可調(diào)節(jié)細胞滲透壓，貯藏營養(yǎng)物，與細胞質(zhì)進行物質(zhì)交換。7、膜邊體、幾丁質(zhì)酶體及氫化酶體的功能是什么？膜邊體：分泌水解酶或與細胞壁合成、分泌、膜的增生、胞飲有關(guān)。幾丁質(zhì)酶體：運送幾丁質(zhì)合成酶，參與新細胞壁的合成而使頂端延伸。氫化酶體：存在于厭氧性的真菌和原生動物中，其功能類似線粒體。第七章：噬菌體1、噬菌體的分類依據(jù)有哪些？核酸種類，形態(tài)，宿主范圍，免疫學(xué)。2、噬菌體進入宿主細胞后會有哪些不同的命運？三種可能的命運：1，慢性繁殖；2，裂解；3，溶源性3、如何理解噬菌體在細菌的進化過程中具有重要的意義？基因水平轉(zhuǎn)移的重要載體。致病菌中原噬菌體編碼毒力因子，并構(gòu)成了基因多樣性的主要差異，在細菌致病性的進化過程中發(fā)揮了重要作用。4、為什么擴增噬菌體時要用對數(shù)生長期的敏感菌？因為對數(shù)期的細菌形態(tài)、生理穩(wěn)定，繁殖速度快，利于噬菌體擴增。5、裂性噬菌體的復(fù)制周期中通常包括哪些步驟？什么是早期轉(zhuǎn)錄與晚期轉(zhuǎn)錄？吸附、侵入、早期轉(zhuǎn)錄、DNA復(fù)制、晚期轉(zhuǎn)錄、裝配、釋放。早期轉(zhuǎn)錄：病毒核酸復(fù)制以前的轉(zhuǎn)錄。所轉(zhuǎn)錄的基因為早期基因，涉及病毒核酸的復(fù)制，調(diào)節(jié)病毒基因組的表達，以及改變或抑制宿主細胞大分子合成。晚期轉(zhuǎn)錄：病毒核酸開始復(fù)制或復(fù)制后的轉(zhuǎn)錄。所轉(zhuǎn)錄的基因為晚期基因，涉及毒粒的結(jié)構(gòu)蛋白。6、什么是溫和噬菌體？溶源性細菌有哪些特點？如何檢出溶源性細菌？溫和噬菌體是指凡吸附并侵入細胞后，噬菌體的DNA只整合在宿主的核染色體組上，并可長期隨宿主DNA的復(fù)制而進行同步復(fù)制，因而在一般情況下不進行增殖和引起宿主細胞裂解的噬菌體。含有溫和噬菌體的DNA而又找不到形態(tài)上可見的噬菌體粒子的宿主細菌叫溶源性細菌。免疫性：溶源性細菌對其本身產(chǎn)生的噬菌體或外來的同源噬菌體不敏感。外來的同源噬菌體不能增殖，也不導(dǎo)致溶源性細菌裂解。復(fù)愈性：溶源性細胞有時消失了其中的原噬菌體，變成非溶源性細胞，這時即不發(fā)生自發(fā)裂解也不發(fā)生誘發(fā)裂解。原噬菌體引起的溶源性細菌除免疫性外的其他的表型改變，包括溶源菌細胞表面性質(zhì)的改變和致病性轉(zhuǎn)變被稱為溶源轉(zhuǎn)變7、什么是噬菌體的一步生長曲線？它包括幾個時期？各有何特點？以感染時間為橫坐標，病毒的感染效價為縱坐標，繪制出病毒特征性的繁殖曲線。潛伏期：噬菌斑數(shù)不見增加。自病毒在受染細胞內(nèi)消失到細胞內(nèi)出現(xiàn)新的感染性病毒的時間為隱蔽期。隱蔽期+吸附時間=潛伏期。裂解期：噬菌斑數(shù)突然直線上升。平穩(wěn)期：溶液中的噬菌體的效價達到最高點。8、如何測定噬菌體的滴度？（1）噬菌體的物理顆粒計數(shù)（2）病毒感染性的測定：雙層瓊脂法測定噬菌體的效價。10、簡述噬菌體的各種應(yīng)用。重組DNA載體；酶:T4DNAligase、T7RNApolymerase；為動物病毒的研究提供借鑒；細菌的鑒定——噬菌體分型；噬菌體展示；醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。11、在發(fā)酵生產(chǎn)過程中，防止因噬菌體感染引起的“倒罐”的措施有哪些？1，消滅噬菌體的各種來源；2，選育抗性菌株；3，輪換使用生產(chǎn)菌株；4，利用藥物進行防治。下微生物生長與繁殖的定義。微生物生長是細胞物質(zhì)有規(guī)律地、不可逆的增加，導(dǎo)致細胞體積擴大的生物學(xué)過程。繁殖是微生物生長到一定階段，由于細胞結(jié)構(gòu)的復(fù)制與重建并通過特定方式產(chǎn)生新的生命個體，引起生命個體數(shù)量增加的生物學(xué)過程。在微生物學(xué)里,生長定義為細胞數(shù)量的增加。研究微生物的生長主要是研究微生物群體的生長。細菌群體生長有哪些不同時期？其原因是什么？A遲緩期：細菌數(shù)不增加１種子老化：缺乏ATP、重要輔酶、核糖體等２適應(yīng)新環(huán)境的酶系統(tǒng)沒有表達３細胞受損害B對數(shù)生長期：最大生長速率，數(shù)量對數(shù)增加，呈平衡生長（細胞內(nèi)各成分按比例有規(guī)律增長）C穩(wěn)定生長期：生長速率為零，活菌數(shù)最多原因：營養(yǎng)物質(zhì)耗盡、代謝產(chǎn)物積累、pH等環(huán)境變化引起細菌不宜生長D衰亡期：代謝活性降低、衰老自溶原因：營養(yǎng)物質(zhì)耗盡，有毒代謝產(chǎn)物大量積累什么是平衡生長？什么是非平衡生長？在對數(shù)生長期內(nèi)，細胞內(nèi)各成分按比例有規(guī)律地增加，所有細胞組分呈彼此相對穩(wěn)定速度合成。當營養(yǎng)成分或其他環(huán)境因子發(fā)生改變時，發(fā)生非平衡生長，細胞各組分合成速率不一致，調(diào)整適應(yīng)新環(huán)境，直到新的平衡生長的出現(xiàn)。（存在精細的調(diào)節(jié)控制）概念：代時、比生長速率、倍增時間代時：每個細菌分裂繁殖一代所需的時間比生長速率，即每單位數(shù)量的細菌或物質(zhì)在單位時間（h）內(nèi)增加的量，即微分方程中的系數(shù)倍增時間：在群體生長中，細菌數(shù)量增加一倍所需的時間什么是二次生長曲線？什么是葡萄糖效應(yīng)？在有速效碳源存在時，遲效源利用會受到抑制。而速效源利用殆盡時，遲效源會得到利用，表現(xiàn)出明顯的第二次生長曲線。當培養(yǎng)基中存在葡萄糖時，大腸桿菌對其他碳源的利用會受到嚴格抑制，直到葡萄糖完全消耗為止。（操縱子）什么是恒化器連續(xù)培養(yǎng)、恒濁器連續(xù)培養(yǎng)？如何進行連續(xù)培養(yǎng)？連續(xù)培養(yǎng)：在微生物的整個培養(yǎng)期間，通過不斷補充營養(yǎng)物質(zhì)、移出培養(yǎng)物使微生物能以恒定的比生長速率生長并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法恒化器連續(xù)培養(yǎng)：整個培養(yǎng)過程中通過保持培養(yǎng)基中某種營養(yǎng)物質(zhì)(生長速率控制因子)的濃度基本恒定的方式，使細菌的比生長速率恒定，生長“不斷”進行。恒濁器連續(xù)培養(yǎng)：通過連續(xù)培養(yǎng)裝置中的光電系統(tǒng)保持培養(yǎng)基中菌體濃度恒定,使細菌生長連續(xù)進行的一種培養(yǎng)方式。在微生物培養(yǎng)過程中采用開放系統(tǒng)，不斷地補充營養(yǎng)物質(zhì)和以同樣的速率移出培養(yǎng)物。微生物生長的測定方法有哪些？有什么優(yōu)缺點？請舉例說明。1計數(shù)法：細菌、孢子、酵母菌等單細胞微生物的數(shù)量（1）直接計數(shù)法：顯微鏡，細菌計數(shù)板、血細胞計數(shù)扳（2）間接計數(shù)法：活菌計數(shù)法，計數(shù)菌落（3）膜過濾法：樣品中菌數(shù)很低時（4）比濁法：分光光度計2重量法：可以用于單細胞、多細胞及絲狀體微生物濕重：離心或過濾分離菌體，洗滌，直接稱重。發(fā)酵：g菌/L干重：105℃烘干至恒重蛋白質(zhì)量：凱氏定氮法DNA量3生理指標法：微生物的呼吸強度，耗氧量，酶活性，生物熱等微生物生長的溫度三基點是什么？溫度對微生物生長的影響有哪些？最適，最高，最低。影響：（1）酶活性；（2）細胞質(zhì)膜的流動性；（3）物質(zhì)的溶解度。pH對微生物生長的影響是什么？直接影響：酸破壞DNA、ATP等，堿破壞RNA、磷脂間接影響：（1）營養(yǎng)物質(zhì)的離子化程度（2）營養(yǎng)物質(zhì)的吸收（3）有害物對微生物的毒害（4）代謝反應(yīng)中各種酶活性根據(jù)氧與微生物生長的關(guān)系可將微生物分為哪幾種類型？氧對微生物有什么副作用，微生物是通過哪種機制消除這種副作用？專性好氧，兼性好氧，耐氧，專性厭氧，微好氧危害：產(chǎn)生有毒害作用的代謝產(chǎn)物，如超氧基化合物和H2O2通過SOD酶催化O2-分解為H2O2，然后在H2O2酶的作用下生成水什么是不能培養(yǎng)的原核生物活細胞？為什么不能把它視為休眠體？長期在脅迫環(huán)境中生存的原核生物細胞卻不能在實驗室常規(guī)條件下生長。仍能觀察到這些細胞有代謝活性，甚至有細胞形態(tài)的變化，卻不能生長繁殖。什么是群體感應(yīng)？群體感應(yīng)的生理學(xué)意義是什么？群體感應(yīng)(quorumsensing)是細菌根據(jù)細胞密度變化進行基因表達調(diào)控的一種生理行為。借助于信號分子，局部細胞密度提高，信號分子密度也隨之提高；當超過閾值時，細菌QS相關(guān)的基因開始表達，細菌生理發(fā)生改變；進入穩(wěn)定生長期，次級代謝開始旺盛，細胞具有新的生理特點。生理學(xué)意義：細菌細胞個體之間的交流，協(xié)同效應(yīng)細菌次級代謝的調(diào)控機制細菌生物被膜（biofilm）形成的控制機制細菌發(fā)光、運動等生理功能的控制機制細菌毒性及抗性的控制機制概念：滅菌、消毒、防腐、化療滅菌是指利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有微生物的一種措施。滅菌后的物體不再有可存活的微生物。消毒（disinfection）：消毒是利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中的病原微生物的一種措施，它可以起到防止感染或傳播的作用。具有消毒作用的化學(xué)物質(zhì)稱為消毒劑（disinfectant）。一般消毒劑在常用濃度下只能殺死微生物的營養(yǎng)體，對芽孢則無殺滅作用。消毒劑一般用在非生物物體上。防腐（antisepsis）：防腐是某些化學(xué)物質(zhì)或物理因子的作用下，能防止或抑制微生物生長的一種措施，它能防止食物腐敗或防止其他物質(zhì)霉變。具有防腐作用的化學(xué)物質(zhì)稱為防腐劑（antiseptics）。防腐劑對被保護組織的破壞遠沒有消毒劑大?；煟╟hemotherapy）：化療是指利用具有選擇毒性的化學(xué)物質(zhì)如抗生素等對生物體內(nèi)部被微生物感染的組織或病變細胞進行治療，以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細胞，但對機體本身無毒害作用的治療措施。微生物死亡的模式（pattern）有那些特點？種群不是瞬間殺滅，而是以指數(shù)形式下降。在后期，部分細菌產(chǎn)生抗性會使細菌死亡的速率降低。常用于控制微生物生長的物理作用有哪些？1熱2輻射作用：微波；紫外線；X射線、g射線。3過濾作用：微生物不能通過小孔徑濾膜。4干燥和高滲抑菌常規(guī)加壓滅菌法中高壓滅菌和低壓滅菌的條件是什么？巴氏消毒法的條件是什么？高壓蒸汽滅菌：121℃，0.1MPa，20min。低壓滅菌：如112℃，30min滅菌葡萄糖溶液。巴氏消毒法：LTH：62~65℃，30min。HTST：72℃，15s。UHT：135~150℃，2~6s。什么是抗微生物劑？常用的抗微生物劑有哪些？殺死微生物或抑制微生物生長的化學(xué)物質(zhì)。根據(jù)抗微生物程度分為：（1）抑菌劑（bacteriostaticagents）（2）殺菌劑（bactericide）（3）溶菌劑（bacteriolysis）根據(jù)施用對象和用途分為：（1）消毒劑（disinfectant）（2）防腐劑（antisepsis）常用防腐劑：有機汞、0.1%~1%硝酸銀、碘液、70%乙醇、六六粉、陽離子化合物（季銨化合物）、3%過氧化氫溶液。常用消毒劑：HgCl2、CuSO4、碘液、氯氣、含氯化合物、酚化合物、陽離子去垢劑、乙烯氧化物、甲醛、臭氧?？股氐亩x是什么？抗生素是由某些生物合成或半合成的一類次級代謝產(chǎn)物或衍生物，能抑制其他微生物生長或殺死。常用抗生素的殺菌抑菌機制。（1）抑制細胞壁合成：青霉素、萬古霉素（2）干擾細胞膜：多粘菌素、短桿菌肽（3）抑制蛋白質(zhì)合成：鏈霉素、卡那霉素、四環(huán)素、氯霉素、紅霉素（4）抑制DNA合成萘啶酮酸、絲裂霉素（5）抑制RNA合成放線菌素D、利福平抗性菌株、耐藥性出現(xiàn)的原因是什么？（1）細胞質(zhì)膜透性改變，抗生素不能進入胞內(nèi)（2）作用靶位點被修飾改變，對抗生素不敏感（3）合成修飾抗生素的酶，使抗生素失去抗菌活性（4）發(fā)生遺傳變異，合成新物質(zhì)，替代受抑制物質(zhì)（5）光譜譜藥物外派泵系統(tǒng)(multidrugeffluxpumpsystem)（6）persister（微生物經(jīng)抗生素或其它有毒物質(zhì)作用而生存者及其后裔）（7）biofilm（生物被膜）海洋微生物有哪些特點？為什么對海洋微生物的研究引起重視？（參考課本第十五章微生物工業(yè)中第四節(jié)相關(guān)內(nèi)容）組成：多數(shù)為革蘭氏陰性菌、多嗜鹽、河口處有耐鹽菌；形態(tài)：多有鞭毛，常見多形性、可變?yōu)榍蛐?、弧形、絲狀及螺旋狀，個體??；生理：兼性厭氧，生長慢，能在低營養(yǎng)下生活，常產(chǎn)色素，分解蛋白質(zhì)能力強，解糖能力低，多嗜冷，對熱敏感；分布：不均勻，與水深成反比，0~10米——少；10~50米——呈上升變化；50米以下數(shù)量減少；海底沉積物上——多。海洋微生物種類繁多，且絕大多數(shù)尚未被研究、開發(fā)和利用。許多海洋微生物生活在極端環(huán)境，可以開發(fā)特異的生物活性物質(zhì)。海洋微生物的基因?qū)δ芑蚪M學(xué)有巨大價值。海洋微生物在生物技術(shù)的應(yīng)用有重要潛在效益。微生物如何在水環(huán)境的自凈作用以及污水處理中發(fā)揮作用？（污水處理參考課本）微生物在污水環(huán)境中大量繁殖，逐漸把水中的有機物分解成簡單的無機物，同時它們的數(shù)量隨之減少，污水也就逐步凈化變清。好氧處理系統(tǒng)：活性污泥法：復(fù)雜的微生物群落。生物膜法：生物膜將有機物吸附和氧化分解。厭氧處理系統(tǒng)（沼氣發(fā)酵）微生物對土壤的生成有哪些影響？土壤微生物的代謝活動，可改變土壤的理化性質(zhì)，進行物質(zhì)轉(zhuǎn)化，因此，土壤微生物是構(gòu)成土壤肥力的重要因素。合成土壤腐殖質(zhì)：黑色的膠狀物質(zhì)，常與礦物質(zhì)顆粒緊密結(jié)合。 腐生細菌：當土壤溫度較低，通氣差時，腐殖質(zhì)合成速度加快，并得到積累。增加土壤有機物質(zhì)：光合作用（藻類）；固氮作用（固氮菌）。促進營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化：好氧微生物：在溫度高、水分適當、通氣良好的條件下，活動旺盛，腐殖質(zhì)分解，釋放出其中的養(yǎng)分供植物吸收利用。硝化細菌：能把有機肥料分解產(chǎn)生的氨轉(zhuǎn)變?yōu)閷χ参镉行У南跛猁}類。磷細菌：分解磷礦石和骨粉。鉀細菌：分解鉀礦石，把植物不能直接利用的磷和鉀轉(zhuǎn)化為能被植物利用的形式。原生動物：吞食土壤中的細菌、單細胞藻類、真菌孢子和有機物殘片等，對土壤中有機物的分解起著明顯的作用，并促進了物質(zhì)的轉(zhuǎn)化。其他作用：某些真菌能分解纖維素、木質(zhì)素和果膠等，對自然界物質(zhì)循環(huán)起重要作用。真菌菌絲的積累，能使土壤的物理結(jié)構(gòu)得到改善。有哪些主要的極端環(huán)境微生物？極端環(huán)境微生物有哪些應(yīng)用前景？請舉例說明。（請參考課本）嗜熱、嗜冷、嗜壓、嗜鹽、嗜酸、嗜堿嗜熱：高溫發(fā)酵、污水處理嗜冷：研究開發(fā)最適溫度低的酶嗜壓：石油開采嗜鹽：紫膜用于電子器件和生物芯片嗜酸：微生物冶金、生物脫硫嗜堿：生產(chǎn)酶試劑、洗滌劑什么是生物被膜？生物被膜的生理作用及意義是什么？細菌粘附于接觸表面，分泌多糖基質(zhì)、纖維蛋白、脂質(zhì)蛋白等，將其自身包繞其中而形成的大量細菌聚集膜樣物。適應(yīng)不利的環(huán)境；對多種抗微生物劑有抗性；微生物個體之間的“對話”及“社會分工”種群的相互作用有哪些類型？請舉例說明互惠共生。中立、互惠共生(地衣=子囊菌+綠藻/藍細菌)、協(xié)同（固氮菌+纖維單胞菌）、偏利（鏈霉+螞蟻）、偏害(鏈霉+其他霉菌)、捕食、寄生、競爭互惠共生如瘤胃共生、菌根、共生固氮等。什么是菌根？菌根對植物有哪些有益作用？一些真菌和植物根以互惠關(guān)系建立起來的共生體。對植物營養(yǎng)和生長的作用：擴大宿主植物的吸收面。外生菌根真菌絕大部分都能產(chǎn)生某種生長刺激素（如吲哚乙酸），能促進植物生長。內(nèi)生菌根能提高從土壤溶液中吸收養(yǎng)料的效率，特別是對P、Zn、Mo等擴散速度慢的營養(yǎng)元素的吸收利用作用更為有效。對防御植物根部病害的作用：外生菌根根際的微生物群落起著防御病菌侵襲的作用。因為外生菌根根圈的微生物數(shù)量要比非菌根根圈的數(shù)量高的多。機械屏障作用。免疫作用。外生菌根真菌產(chǎn)生抗生素。試驗證明大部分外生菌根都具有抗菌活性，這與它們產(chǎn)生抗生素是有密切關(guān)系的。提高植物抗逆性的作用：植物產(chǎn)生菌根后可以提高宿主植物的抗旱、抗鹽堿、抗極端溫度、濕度和pH以及重金屬毒害的能力。生物固氮有哪些類型？根瘤菌-豆科植物共生固氮體系有哪些特點？生物固氮是指一些特殊類群原核微生物能夠?qū)⒎肿拥€原為氨的過程。自生固氮體系、聯(lián)合（內(nèi)生）固氮體系、共生固氮體系。＃根瘤菌-豆科植物共生固氮體系所固定的氮占全部生物固氮的60％；＃根瘤菌與豆科植物之間有專一性；＃在根瘤中，根瘤菌發(fā)育為特殊的分化形式－類菌體（bacteroid），這種分化形式只有在根瘤細胞里形成，并且充滿根瘤細胞；＃根瘤中有豆血紅蛋白，自由氧濃度低，卻能保證生長所需的氧氣輸送。什么是瘤胃共生？瘤胃共生是指牛羊等反芻動物與瘤胃微生物的共生，反芻動物為微生物提供纖維素等有機養(yǎng)料、無機養(yǎng)料和水分，并創(chuàng)造合適的溫度和厭氧環(huán)境，而瘤胃微生物則可幫助反芻動物消化纖維素和合成大量菌體蛋白。什么是人體正常菌群？其分布與生理作用是什么？定義：在人體各部位經(jīng)常寄居而對人體無害的細菌。分布：皮膚、外耳道、眼結(jié)膜、鼻咽腔、口腔、胃腸道、尿道、陰道等生理功能：拮抗作用(生物屏障：pH、占位性保護、爭奪營養(yǎng)、抗生素與細菌素)、營養(yǎng)作用(代謝、合成纖維素、轉(zhuǎn)化激素)、免疫作用什么是條件致病菌？在什么情況下引起疾??？在一定條件下正常菌群或非致病菌引起機體的感染。細菌方面因素：改變寄生部位、菌群失調(diào)機體方面因素：免疫功能下降試比較外毒素和內(nèi)毒素的特點。外毒素：G+，少數(shù)為G-；胞漿內(nèi)合成后分泌到菌體外，或在細菌死亡溶解后釋放，AB亞單位蛋白質(zhì)；毒性強；穩(wěn)定性差，可甲醛脫毒；毒性有組織器官選擇性；可刺激抗毒素產(chǎn)生；染色體基因/質(zhì)粒編碼內(nèi)毒素：G-；細胞壁成分，菌死亡溶解后釋放；脂多糖(脂類A、核心多糖及O-側(cè)鏈)；毒性弱；耐熱；可刺激抗體產(chǎn)生；毒性無選擇性；染色體基因編碼病原細菌的完整的致病周期有哪些過程？傳染源；轉(zhuǎn)移到寄主；侵入定植；在寄主（細胞）中生長或完成生活周期；回避寄主防御機制；危害寄主；離開寄主回到傳染源或新寄主病原微生物的傳播有哪些途徑？空氣傳播，接觸傳播，媒介傳播Vehicletransmission，病媒傳播Vector-Bornetransmission什么是代謝工程？利用基因工程技術(shù)隊微生物代謝網(wǎng)絡(luò)中特定的代謝途徑進行有精確目標的基因操作，改變微生物原有的調(diào)節(jié)系統(tǒng)，使目的代謝產(chǎn)物的活性或產(chǎn)量得到大幅度提高的一種育種技術(shù)。微生物工業(yè)發(fā)酵有哪些類型？1.微生物菌體發(fā)酵 是以獲得具有某種用途的菌體為目的的發(fā)酵。2.微生物酶發(fā)酵 目前工業(yè)應(yīng)用的酶大多來自微生物發(fā)酵。3.微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵 初級代謝產(chǎn)物 次級代謝產(chǎn)物4.微生物的轉(zhuǎn)化發(fā)酵 微生物的轉(zhuǎn)化是利用微生物細胞的一種或多種酶，把一種化合物轉(zhuǎn)變成結(jié)構(gòu)相關(guān)的更有經(jīng)濟價值的產(chǎn)物?？蛇M行的轉(zhuǎn)化反應(yīng)包括：脫氫反應(yīng)、氧化反應(yīng)、脫水反應(yīng)、縮