替加環(huán)素藥敏試驗(yàn)方法共識(shí)2014.7修改

替加環(huán)素藥敏試驗(yàn)方法 （一）替加環(huán)素相（二）替加環(huán)素藥敏試驗(yàn)方法標(biāo)（三）替加環(huán)素藥（四）替加環(huán)素藥敏試驗(yàn)方法及影響因(一 替加環(huán)素相關(guān)知識(shí)回 泰閣?有效對(duì)抗四環(huán)素類替加環(huán)素有效對(duì)抗四環(huán)素類兩大耐藥機(jī)制-核糖體保護(hù)和外排泵機(jī)核糖體保護(hù)結(jié)合位點(diǎn)不同，結(jié)合方式獨(dú)具有很高的結(jié)合

外排泵機(jī)外排泵無法識(shí)別替加環(huán)素，不會(huì)將其泵排出蛋白無法識(shí)別或是排出蛋白誘導(dǎo)不-)抗生素酶的降與β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥相DNA與喹諾酮類的耐藥泰泰閣?有效對(duì)抗多種耐藥泰閣?對(duì)常見致病菌(包括耐藥菌)抗菌活（二）替加環(huán)素藥敏試驗(yàn)方法標(biāo)難在：CLSI沒有標(biāo)準(zhǔn)；藥物替加環(huán)素對(duì)MDRO

共識(shí)內(nèi)CLSI替加環(huán)素藥敏操作1替加環(huán)素1替加環(huán)素的保存與藥液配2培養(yǎng)基對(duì)測(cè)定結(jié)果的影3檢測(cè)方法對(duì)測(cè)定結(jié)果的影4判定折點(diǎn)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影5判讀結(jié)果時(shí)的注意事避光、干燥 在≤-20℃冰箱內(nèi)； 培養(yǎng)基存放溫度及存放存放時(shí)間過長對(duì)肉湯稀釋法測(cè)定結(jié)果影響較肉湯培養(yǎng)基中氧含量較高，存放時(shí)間過長會(huì)由于氧化作用而使替加環(huán)素失瓊脂培養(yǎng)基在存放時(shí)會(huì)凝固，用前要煮沸融化，相對(duì)含氧量較培養(yǎng)基、測(cè)定方法CohenStuartJ,etal.AAC.2010Jun;54(6):2746-

BD培養(yǎng)基微量肉湯稀釋法瓊脂稀釋法：用于非苛養(yǎng)菌、需養(yǎng)菌、兼性厭氧菌 儀器法：VITEK2AST-GN16卡，文獻(xiàn) MTS法：用于需氧菌和厭氧菌，文獻(xiàn) Comparativeevaluationoftigecyclinesusceptibilitytestingmethodsforexpanded-spectrumcephalosporin-andcarbapenem-resistantgram-negativepathogens.JClinMicrobiol.2012;50(11):3747-評(píng)價(jià)Vitek2,EtestandMICTestStripMTS241strainscarbapenem-resistantEnterobacteriaceaedAcinetobacterbaumannii.brothmicrodilution(BMD)asthereference*BMD,1-4μg/ml;Vitek2,4-≥8μg/ml;Etest,2-4μg/ml;MTS,0.5-2§Etestproduced0.4/0.8%major§MTSproducednomajorerrorsbut0.4/3.3%verymajorerrors(FDA/EUCASTbreakpoints).★Vitek2tigecyclineresultsrequireconfirmationbyBMDorEtestformultidrug-resistantpathogens.不同方法檢測(cè)替加環(huán)素的體外藥敏結(jié)果[株檢測(cè)方菌株數(shù)（株 MIC(mg/L)MIC 肉湯稀釋鮑曼不動(dòng)桿24克雷伯12瓊脂稀釋鮑曼不動(dòng)桿24克雷伯12鮑曼不動(dòng)桿23克雷伯12鮑曼不動(dòng)桿24克雷伯28 檢測(cè)方法和菌

EA（基）

CA(分類

（重）

菌株數(shù) ME（大 mE(小 瓊脂稀鮑曼不動(dòng)桿 克雷伯 鮑曼不動(dòng)桿 克雷伯 Vitek鮑曼不動(dòng)桿 克雷伯 MICTeststrip將試劑條從冰箱中取出，平衡溫度用無菌拭子將菌液在MH瓊脂上涂抹均勻MIC測(cè)試條（MICteststrip，MTS）E-test法測(cè)量紙片擴(kuò)散法：Basicprinciplesstill折點(diǎn)判讀標(biāo)食品藥 FDA及歐洲藥敏試EUCAST有替加環(huán)素的判斷折CLSI目前無替加環(huán)素對(duì)的折點(diǎn) 替加環(huán)素的FDA標(biāo)抑菌圈直徑SIRSIR≤----≤----≤----≤----≤48≤≤48≤48≤----桿≤----替加環(huán)素藥敏試驗(yàn)質(zhì)控范圍抑菌圈直徑MIC--大腸糞腸-鏈流感菌株來源收集2013.8-2014.5月院內(nèi) 包括：aba72株，CRE9株，MRSA11株。 (3)MH培養(yǎng)基購于溫州康泰生物公司（進(jìn)口分裝 VITEK2AST-GN16卡購于法國梅里埃公司 替加環(huán)素藥敏判斷折點(diǎn)專家建議采 食品藥 FDA標(biāo)準(zhǔn)不同藥敏方法測(cè)定替加環(huán)素對(duì)72株鮑曼不動(dòng)桿菌的抗菌活藥敏方FDA標(biāo)準(zhǔn)范SIR---0不同藥敏方法測(cè)定替加環(huán)素對(duì)9株CRE藥敏方FDA標(biāo)準(zhǔn)范SIR不同藥敏方法測(cè)定替加環(huán)素對(duì)11株MRSA的抗菌藥敏方FDA標(biāo)準(zhǔn)范SIR----統(tǒng)計(jì)學(xué)分析指基本一致率（EA）：兩種方法檢測(cè)MIC相同或相差在1個(gè)稀釋度范圍以內(nèi)的比分類一致率（CA）：按照相同折點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)，敏感、中介、耐藥一致的菌株百分小誤差（mE）:菌株在同一折點(diǎn)判定標(biāo)準(zhǔn)下，被評(píng)估方法將中介判定為敏感或耐（ME）:“假耐。（VME):“假。CLSI規(guī)定可接受的誤差范圍：CA和EA≥90%,VME≤1.5%,ME≤3%,mE≤10替加環(huán)素E-test法、VITEK2儀器法、KB法與MTS法測(cè)定比較結(jié)果藥敏EA（基本VME（假敏感ME（假耐藥mE（小誤差CA(分類鮑曼不動(dòng)桿菌（n=72株E-testVITEK-KB-判S為R判S為CREn9株E-testVITEK-MRSA（n=11株E-test_替加環(huán)素不同藥敏方法之間存在不同差E-test法、儀器法、KB法與MTS法的一致性較 MTS法、瓊脂稀釋法與肉湯稀釋法相關(guān)性較好MRSA、VRE、Eco，VITEK2aba、kpn、eae、ecl，MTS法符合性好；E-test法存在爭(zhēng)議替加環(huán)素藥敏試驗(yàn)的影響折點(diǎn)的選擇：FDA和 性 、陽性菌、厭氧 型天