第2章-一般血細胞學(xué)檢驗

第二章一般血細胞學(xué)檢驗?zāi)贤ù髮W(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗醫(yī)學(xué)中心陸永輝1第二章一般血液學(xué)檢驗主要內(nèi)容第一節(jié)

外周血液血細胞形態(tài)學(xué)檢驗第二節(jié)

紅細胞檢驗第三節(jié)白細胞檢驗

2第二章一般血液學(xué)檢驗外周血細胞由骨髓、淋巴器官造血產(chǎn)生，經(jīng)生長發(fā)育成熟釋放入外周血紅細胞白細胞：中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞血小板3第二章一般血液學(xué)檢驗外周血正常白細胞形態(tài)4第二章一般血液學(xué)檢驗嗜酸細胞淋巴細胞單核細胞中性粒細胞血小板

嗜堿細胞外周血紅細胞、血小板形態(tài)5第二章一般血液學(xué)檢驗血細胞生長發(fā)育成熟過程1.造血干細胞2.造血祖細胞3.原始細胞4.幼稚細胞5.成熟細胞6第二章一般血液學(xué)檢驗血細胞生長發(fā)育成熟階段紅細胞：原始→早幼→中幼→晚幼→網(wǎng)織→成熟紅細胞白細胞--中性粒細胞：原始粒細胞→中性早幼粒→中幼?！碛琢！鷹U狀核→分葉核細胞

--嗜酸、嗜堿粒細胞：原始粒細胞→嗜酸（堿）早幼?！杏琢！碛琢！人幔▔A）粒細胞

--淋巴細胞：原始淋巴細胞→幼稚淋巴細胞→淋巴細胞

--單核細胞：原始單核細胞→幼稚單核細胞→單核細胞血小板：由巨核細胞產(chǎn)生7第二章一般血液學(xué)檢驗第一節(jié)外周血液血細胞形態(tài)學(xué)檢驗一、血細胞涂片的制作和染色1.血涂片的制作手工涂片法自動推片法8第二章一般血液學(xué)檢驗良好血涂片的質(zhì)量標(biāo)準血膜距片端1/3處始，長≥25mm，兩側(cè)邊距≥5mm，由厚到薄連續(xù)均勻涂開，始端平直，末端舌狀，邊緣光滑，厚薄適宜無畫線、裂隙、顆粒，頭、體、尾分清。9第二章一般血液學(xué)檢驗2、血涂片的染色最經(jīng)典、最常用主要成分：堿性美蘭（亞甲藍）與酸性伊紅染色原理：物理吸附、化學(xué)親和與電荷作用的共同結(jié)果。各種細胞成分的化學(xué)性質(zhì)不同，對染料的親和力各異，呈現(xiàn)粉紅、紫色、藍色、紫紅等不同色彩。瑞氏染色10第二章一般血液學(xué)檢驗瑞氏染液氯化亞甲藍（MCl）與伊紅化鈉（NaE）的甲醇溶液甲醇是Wright染料良好溶劑，固定細胞形態(tài)，將蛋白質(zhì)沉淀為顆粒網(wǎng)狀增加接觸面提高染料吸附解離成M+（亞甲藍）和E-（伊紅）磷酸鹽緩沖液（pH6.4-6.8）11第二章一般血液學(xué)檢驗瑞氏染色步驟1.血涂片平放于染色架2.瑞氏染液數(shù)滴覆蓋血膜，固定1min3.加等量緩沖液與染液混勻，染5-10min4.自來水沖去染液，吸（吹）干鏡檢12第二章一般血液學(xué)檢驗不同化學(xué)物質(zhì)的染色結(jié)果堿性蛋白質(zhì)（血紅蛋白、嗜酸顆粒）與酸性伊紅結(jié)合，染成粉紅色酸性蛋白質(zhì)（核蛋白、淋巴胞質(zhì)）與堿性美蘭或天青（亞甲藍氧化物）結(jié)合，染成紫色或藍色中性顆粒與伊紅和亞甲藍均結(jié)合，染成淡紫紅色13第二章一般血液學(xué)檢驗血片瑞氏染色結(jié)果紅細胞呈粉紅色，略有碟狀感中性粒細胞核深紫紅色，胞質(zhì)淡紅，顆粒細小紫紅色嗜酸性粒細胞核紫紅色，胞漿充滿粗大橘紅色顆粒嗜堿性粒細胞核淡紫紅色，胞質(zhì)淡紅，大小不等黑紫色顆粒淋巴細胞核深紫紅色，胞質(zhì)淡藍透明，偶見紫紅色顆粒，單核細胞核淡紫紅色，胞質(zhì)淡藍或灰藍色，細小紫紅色顆粒血小板染紫紅色或藍紫色偏酸偏堿、時間長短，染色有差異。14第二章一般血液學(xué)檢驗染色效果的影響因素染液濃度：濃度高，染色較深，濃度低，染色較淡染色時間：時間長，染色較深，時間短，染色較淡或未著色溫度：溫度高，細胞著色快，溫度低，著色慢pH：pH低，H+增多，細胞成分與伊紅親和力占優(yōu)，染色偏紅，pH高，和美蘭親和力大，染色偏藍細胞數(shù)量：細胞多則染液濃度略高，染色時間略長染液濃度略低，染色時間長些，染色效果好15第二章一般血液學(xué)檢驗瑞氏染色與吉姆薩染色

瑞氏染色：細胞質(zhì)成分、中性顆粒等染色效果好，細胞核染色不如吉姆薩染色效果。吉姆薩染色：細胞核和寄生蟲著色較好，胞質(zhì)和中性顆粒著色較差。復(fù)合染色取長補短。16第二章一般血液學(xué)檢驗大小異常染色異常形態(tài)異常

結(jié)構(gòu)異常2、異常紅細胞形態(tài)17第二章一般血液學(xué)檢驗大小異常

aMicrocyte

小紅細胞bMegalocyte巨紅細胞

cMacrocyte大紅細胞dAnisocytosis

紅細胞大小不均18第二章一般血液學(xué)檢驗紅細胞大小異常小紅細胞：(d<6μm)缺鐵性貧血、鐵粒幼、珠蛋白生成障礙大紅細胞：(d>10μm)溶血性貧血、巨幼貧巨紅細胞：(d>15μm)巨幼細胞性貧血紅細胞大小不均：巨幼貧、重度增生性貧血19第二章一般血液學(xué)檢驗染色異常A.Normochromaticerythrocyte

正常色素性紅細胞B.Hypochromaticerythrocyte

低色素性紅細胞C.Hyperchromaticerythrocyte高色素性紅細胞D.Polychromaticerythrocyte嗜多色性紅細胞20第二章一般血液學(xué)檢驗紅細胞染色異常正常色素性紅細胞：淡紅色圓盤狀，中央生理蒼白區(qū)（Normal、AA）低色素性紅細胞：中央淺染區(qū)擴大（IDA）高色素性紅細胞：中央淺染區(qū)縮小或消失（巨幼貧、球形紅細胞增多癥）嗜多色性紅細胞：灰藍或灰紅色，胞體較大（增生性貧血-溶貧）21第二章一般血液學(xué)檢驗形態(tài)異常類型很多，原因復(fù)雜。A.Spherocyte

球形B.Sicklecell

鐮形

C.Rouleauxformation緡錢狀D.Acanthocyte

棘形

E.Targetcell靶形

22第二章一般血液學(xué)檢驗A.Schistocyte裂片形B.Teardropcell淚滴形

C.Meniscocyte新月形

D.Stomatocyte

口形E.Elliptocyte

橢圓形23第二章一般血液學(xué)檢驗紅細胞形態(tài)異常（一）球形紅細胞：直徑略小，厚度增加，球形，無中央淺染區(qū)（球形紅細胞增多癥）鐮形紅細胞：細胞膜變形如鐮刀狀（HbS?。┚囧X狀紅細胞：銅錢串樣（骨髓瘤）棘形紅細胞：表面針尖狀突起，間距不規(guī)則，長寬不一，不同于皺縮紅細胞（β-脂蛋白缺乏癥）靶形紅細胞：直徑增大，厚度變薄，中央、邊緣深染，間蒼白區(qū)，形如靶(珠蛋白生成障礙）24第二章一般血液學(xué)檢驗紅細胞形態(tài)異常（二）裂片形紅細胞：碎片，有刺形、盔形、三角形、扭轉(zhuǎn)形等（DIC）淚滴形紅細胞：淚滴狀或梨形（骨纖）新月形紅細胞：殘缺如新月（瘧疾）口形紅細胞：中央蒼白區(qū)扁平狀，有裂縫，如嘴形或魚口（口形紅細胞增多癥）橢圓形紅細胞：紅細胞膜缺陷，橢圓形或桿形（橢圓形紅細胞增多癥、巨幼貧）25第二章一般血液學(xué)檢驗結(jié)構(gòu)異常

basophilicstipplingcell

Howell-Jolly’sbody

cabotring

nucleatederythrocyte

26第二章一般血液學(xué)檢驗A.Basophilicstippling

嗜堿點彩紅細胞B.Howell-Jolly’sbody

豪-焦小體C.Cabotring

卡波環(huán)D.Nucleatederythrocyte

有核紅細胞E.Haemoplasmodium

寄生蟲27第二章一般血液學(xué)檢驗紅細胞結(jié)構(gòu)異常嗜堿點彩紅細胞：胞質(zhì)有藍黑色顆粒，重金屬（鉛、汞等）中毒表現(xiàn)豪-焦小體：紅細胞胞質(zhì)中暗紫紅圓形小體，核殘余，巨幼貧、溶貧、脾切増多卡波氏環(huán)：紅細胞胞質(zhì)中紫紅細線圈狀或8字結(jié)構(gòu)，見于溶貧、巨幼貧、鉛中毒、白血病有核紅細胞：幼稚紅細胞，見于新生兒、溶貧、惡性造血疾患、骨纖等寄生蟲：瘧原蟲、微絲蚴、利什曼原蟲等。28第二章一般血液學(xué)檢驗三、白細胞形態(tài)檢查29第二章一般血液學(xué)檢驗中性粒細胞核的變化核左移、核右移核變性Pelger-Huet畸形中毒性改變核棘突鼓槌小體30第二章一般血液學(xué)檢驗1、中性粒細胞核象變化成熟幼稚31第二章一般血液學(xué)檢驗核左移(shifttotheleft)核右移(shifttotheright)？32第二章一般血液學(xué)檢驗核左移定義：外周血桿狀核粒細胞增多和幼稚細胞出現(xiàn)，常由急性感染、失血、中毒、免疫低下引起。再生性左移：伴WBC增多，機體反應(yīng)性強，骨髓造血旺盛，常見于急性感染、失血、中毒退行性左移：WBC不增或降低，骨髓釋放受抑，見于嚴重感染或抵抗力低下33第二章一般血液學(xué)檢驗核右移定義：外周血中性分葉核粒細胞增多，5葉核以上>3%，是造血功能衰退或造血物質(zhì)缺乏表現(xiàn)。常伴WBC減少，見于惡性貧血、巨幼貧、使用抗代謝藥炎癥恢復(fù)期一過性出現(xiàn)，進行期出現(xiàn)示預(yù)后不良。34第二章一般血液學(xué)檢驗核變性核固縮：染色質(zhì)凝集呈深紫色粗大塊狀核溶解：胞核膨脹，著色淺淡，常伴核膜碎裂，細胞衰老死亡表現(xiàn)核碎裂：核裂解成數(shù)塊35第二章一般血液學(xué)檢驗空泡變性棒狀小體中毒顆粒杜勒小體顆粒消失Chediak-Higashi畸形2、中性粒細胞胞質(zhì)變化36第二章一般血液學(xué)檢驗A.D?hlebody杜勒小體B.toxicgranulation

中毒顆粒C.Vacuolation空泡變性D.Auerbody

棒狀小體

37第二章一般血液學(xué)檢驗中性粒細胞胞質(zhì)變化

空泡變性：胞質(zhì)、核出現(xiàn)空泡（脂肪變性）

--（嚴重感染和中毒）中毒顆粒：比中性顆粒大，（紫）黑色杜勒小體（藍斑）：圓（梨）形天藍或藍黑色，-（胞質(zhì)毒性變化，核質(zhì)發(fā)育失衡）棒狀小體：紅色細桿狀，急粒、急單可見，M3明顯-（急性白血病診斷及鑒別診斷）38第二章一般血液學(xué)檢驗淋巴細胞形態(tài)異常異型淋巴細胞：病毒感染或過敏性疾病等刺激淋巴細胞增生，出現(xiàn)形態(tài)變化

Ⅰ-空泡型

Ⅱ-不規(guī)則型

Ⅲ-幼稚型褪變型淋巴細胞：放射損傷，核變性（核固縮、核碎裂、雙核、衛(wèi)星核）39第二章一般血液學(xué)檢驗空泡型（漿細胞型）不規(guī)則型（單核細胞型）幼稚型（未成熟細胞型）異型淋巴細胞A異型淋巴細胞漿細胞型B異型淋巴細胞幼稚型C單核細胞型40第二章一般血液學(xué)檢驗異型淋巴細胞形態(tài)特征Ⅰ-空泡型：胞質(zhì)豐富（核質(zhì)1:1）深藍泡沫樣，有空泡，核偏固縮似漿細胞Ⅱ-不規(guī)則型：胞體較大花邊狀，胞質(zhì)量多（核質(zhì)1:2）淺藍或藍色透明感，核圓或不規(guī)則，較細致疏松，似單核細胞，

Ⅲ-幼稚型：胞體較大，胞質(zhì)量多（核質(zhì)2:3），藍或深藍，核大較規(guī)則，細致疏松，似幼稚細胞41第二章一般血液學(xué)檢驗第二節(jié)

紅細胞檢驗42第二章一般血液學(xué)檢驗紅細胞生理生長發(fā)育：造血干細胞→紅系祖細胞→原紅→早幼紅→中幼紅→晚幼紅→網(wǎng)織紅→成熟紅細胞骨髓中原始紅細胞→網(wǎng)織紅細胞約72h網(wǎng)織紅細胞→成熟紅細胞約48h紅細胞平均壽命120d在脾臟破壞，由單核巨噬細胞清除主要功能：作為呼吸載體（血紅蛋白）,結(jié)合、運輸O2和CO2，

進行氣體交換43第二章一般血液學(xué)檢驗紅細胞生成必需的元素鐵葉酸維生素B12蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、糖類、無機離子44第二章一般血液學(xué)檢驗淡紅色雙凹圓盤狀，直徑6.7-9.5μm，中央蒼白區(qū)。表面積/體積比值大；增加氣體透過面積有變形能力1、正常紅細胞形態(tài)45第二章一般血液學(xué)檢驗嗜酸細胞淋巴細胞單核細胞中性粒細胞血小板

嗜堿細胞外周血瑞氏染色紅細胞形態(tài)46第二章一般血液學(xué)檢驗1、方法顯微鏡計數(shù)法血細胞分析儀法一、紅細胞計數(shù)47第二章一般血液學(xué)檢驗顯微鏡計數(shù)法48第二章一般血液學(xué)檢驗紅細胞計數(shù)干擾因素冷凝集-RBC聚集導(dǎo)致計數(shù)假性減低溶血-假性減低白細胞顯著增多-假性增高，須減去WBC數(shù)大血小板增多-假性增高49第二章一般血液學(xué)檢驗成年男性：（4.09~5.74）×1012/L成年女性：（3.68~5.13）×1012/L新

生

兒：（5.2~6.4）×1012/L嬰

兒：（4.0~4.3）×1012/L兒

童：（4.0~4.5）×1012/L2、參考范圍50第二章一般血液學(xué)檢驗紅細胞醫(yī)學(xué)決定水平醫(yī)學(xué)決定水平：對疾病診斷、治療、預(yù)后有決定意義的生物學(xué)指標(biāo)>6.8×1012/L對癥治療<3.5×1012/L診斷貧血<1.5×1012/L考慮輸血

51第二章一般血液學(xué)檢驗3、臨床應(yīng)用A、生理性增多新生兒、高原生活、劇烈運動、精神因素等。（1）增多52第二章一般血液學(xué)檢驗（B

）絕對性增多：繼發(fā)性心、肺疾病代償增異常血紅蛋白病生

某些腫瘤等原發(fā)性真性紅細胞增多癥病理性增多（A）相對性增多：血漿水分丟失，血液濃縮，絕對數(shù)沒有發(fā)生變化。53第二章一般血液學(xué)檢驗生理性減少

兒童、孕婦、老年人。病理性減少A、骨髓造血功能低下，如再障。B、造血原料缺乏，如缺鐵貧、巨幼貧。C、紅細胞破壞增加，如溶貧。D、紅細胞丟失過多，如失血。（2）減少54第二章一般血液學(xué)檢驗二、血紅蛋白測定（hemoglobin，Hb）55第二章一般血液學(xué)檢驗血紅蛋白結(jié)構(gòu)種類珠蛋白和亞鐵血紅素結(jié)合蛋白，4條珠蛋白肽鏈各包裹一個亞鐵血紅素，分子量64458HbA（α2β2）——占成人Hb90%以上HbA2（α2δ2）HbF（α2γ2）——占新生兒、嬰兒Hb70%左右血紅蛋白衍生物：Hi、HbCo、HbS56第二章一般血液學(xué)檢驗1、測定方法氰化高鐵血紅蛋白法（HiCN

）十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測定法（SDS-Hb）疊氮高鐵血紅蛋白法（HiN3）57第二章一般血液學(xué)檢驗氰化高鐵血紅蛋白法（HiCN

）原理：血紅蛋白（除HbS）Fe2+被高鐵氰化鉀氧化成Fe3+,形成高鐵血紅蛋白（Hi），與氰根離子形成氰化高鐵血紅蛋白（HiCN），540nm有最大吸收峰，吸光度與血紅蛋白濃度成正比。ICSH和WHO推薦標(biāo)準參考方法58第二章一般血液學(xué)檢驗HiCN測定法干擾因素脂血-假性增高有核細胞大量增多-假性增高其它引起濁度升高的因素59第二章一般血液學(xué)檢驗2、參考范圍新生兒：（180~190）g/L；兒

童：（120~140）g/L；成年男性：（131~172）g/L；成年女性：（113~151）g/L；老年人（70歲以上）：男性：（94~122）g/L；女性：（87~112）g/L；60第二章一般血液學(xué)檢驗血紅蛋白臨床應(yīng)用血紅蛋白增高：成男>170g/L，成女>160g/L血紅蛋白減低（貧血）：成男<120g/L，成女<110g/L輕度貧血-90g/L<Hb<參考值下限中度貧血-60g/L<Hb≤90g/L重度貧血-30g/L<Hb≤60g/L極重度貧血-Hb≤30g/L61第二章一般血液學(xué)檢驗測定方法微量法（WHO推薦）溫氏比容法血液分析儀法三、血細胞比容測定（hematocrit，Hct）紅細胞比容（packedcellvolume，PCV）即紅細胞壓積（Hct）,指在一定條件下經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細胞在全血標(biāo)本中所占體積的比值。62第二章一般血液學(xué)檢驗離心法結(jié)果讀取離心血液分五層：血漿層血小板層白細胞和有核紅細胞層還原紅細胞層帶氧紅細胞層讀取還原紅細胞層表面刻度/100或紅細胞柱長/全層高63第二章一般血液學(xué)檢驗血液分析儀法PCV=MCV×RBC數(shù)（L/L）64第二章一般血液學(xué)檢驗【參考范圍】男性：0.380~0.508L/L女性：0.335~0.450L/L【臨床應(yīng)用】●紅細胞比容增高：相對性增多（血液濃縮）。絕對性增高（紅細胞增多）?！窦t細胞比容降低：見于各種貧血。65第二章一般血液學(xué)檢驗四、紅細胞相關(guān)參數(shù)1、紅細胞平均容積（meancorpuscularvolume,MCV）。MCV=紅細胞比容每升血液中紅細胞數(shù)原理：血細胞通過分析儀電極小孔引起電阻改變，產(chǎn)生脈沖信號，振幅與體積成正比，脈沖數(shù)即細胞數(shù)?！緟⒖挤秶?/p>

80～92fl（1fl=10-15L）66第二章一般血液學(xué)檢驗２、紅細胞平均血紅蛋白量（meancorpuscular

hemoglobin,MCH）MCH=血紅蛋白量每升血液中紅細胞數(shù)【參考范圍】

27～31pg（1pg=10-12g)67第二章一般血液學(xué)檢驗３.紅細胞平均血紅蛋白濃度（meancopuscularhemoglobinconcentration，MCHC）MCHC=紅細胞比容【參考范圍】

320～360g/L血紅蛋白量68第二章一般血液學(xué)檢驗４.紅細胞體積分布寬度（RDW）定義：是反映外周血紅細胞體積差異的參數(shù)，通過變異系數(shù)或標(biāo)準差定量表示紅細胞體積分布的離散程度?！緟⒖挤秶?/p>

成人：≤15.0%

新生兒：男≤15.9%女≤16.2%69第二章一般血液學(xué)檢驗【臨床應(yīng)用】根據(jù)上述指標(biāo)可進行貧血的形態(tài)學(xué)分類。四、紅細胞相關(guān)參數(shù)70第二章一般血液學(xué)檢驗MCVMCHMCHC大細胞性貧血＞正常＞正常正常正常細胞性貧血正常正常正常單純小細胞貧血＜正常＜正常正常小細胞低色素性貧血＜正常＜正常＜正常各種貧血時三項指數(shù)的變化71第二章一般血液學(xué)檢驗幾種貧血類型的MCV和RDW變化72第二章一般血液學(xué)檢驗五、網(wǎng)織紅細胞（reticulocyte，Ret）計數(shù)界于晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間的過渡型細胞。因其胞質(zhì)中殘存的核糖核酸經(jīng)堿性染料活體染色后，呈現(xiàn)點狀或線網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，故名網(wǎng)織紅細胞。73第二章一般血液學(xué)檢驗１.計數(shù)方法（1）顯微鏡計數(shù)法：染色后油鏡計數(shù)1000個RBC中Ret數(shù)米勒(Miller)窺盤法該方法可明顯提高計數(shù)的準確性。

A31B將Miller窺盤放在顯微鏡目鏡中,通過窺盤中大小方格間的9比1比例關(guān)系計算RBC數(shù)和網(wǎng)織RBC。74第二章一般血液學(xué)檢驗網(wǎng)織紅細胞類型Ⅰ型（絲球型）顆粒呈致密塊狀Ⅱ型（網(wǎng)型）顆粒呈疏松網(wǎng)狀Ⅲ型（破網(wǎng)型）顆粒松散Ⅳ型（點粒型）顆粒點狀散在顆粒越多越密越幼稚外周血Ⅳ型占60%以上75第二章一般血液學(xué)檢驗（２）血液分析儀法

新亞甲藍-VCS檢測法以超活染料新亞甲藍（NMB）著色網(wǎng)織紅細胞內(nèi)殘存的RNA漂去紅細胞內(nèi)血紅蛋白（酸性漂洗液）在流式通道，運用VCS三維技術(shù)，將網(wǎng)織紅細胞與成熟紅細胞、白細胞、血小板、和有核紅細胞區(qū)分開來76第二章一般血液學(xué)檢驗抗凝全血噻唑橙染色，用流式細胞儀分析樣本中10000個細胞，報告網(wǎng)織紅細胞百分比和平均熒光強度。熒光強度越強，細胞越幼稚。流式細胞儀分析簡便，結(jié)果精確、靈敏，消除了取樣帶來的誤差。（3）流式細胞儀法：77第二章一般血液學(xué)檢驗成人：0.005～0.015（0.5%～1.5%)新生兒：0.03～0.06兒童：0.005~0.075

絕對值：成人(24～84)×109/L２.參考范圍78第二章一般血液學(xué)檢驗（1）評價骨髓增生能力，判斷貧血類型

增多表示紅細胞生成旺盛，降低是無效紅細胞造血指征。再障時，明顯降低。絕對值低于5×109/L可做為急性再障的輔助診斷指標(biāo)。失血、多數(shù)溶血性貧血患者網(wǎng)織紅細胞可明顯增高，脾亢輕度增高。營養(yǎng)不良性貧血網(wǎng)織紅細胞可正常、輕度升高或降低。３.網(wǎng)織紅細胞臨床應(yīng)用79第二章一般血液學(xué)檢驗

（2）評價療效

網(wǎng)織紅細胞反應(yīng)：IDA或巨幼細胞貧血分別給予鐵劑、維生素B12或葉酸治療2~3d后，網(wǎng)織紅細胞計數(shù)值開始上升，7~10d達到最高(10%左右)；兩周以后逐漸降至正常水平，紅細胞、血紅蛋白開始升高。 骨髓移植、EPO治療后：若骨髓開始恢復(fù)造血功能，網(wǎng)織紅細胞計數(shù)值上升。80第二章一般血液學(xué)檢驗（3）放、化療監(jiān)測

機體接受放、化療后，如出現(xiàn)骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，然后才檢測到網(wǎng)織紅細胞的降低。而停止放、化療，骨髓功能恢復(fù)后，又見上述指標(biāo)依次上升?？芍笇?dǎo)臨床醫(yī)師適時調(diào)整治療方案，避免造成嚴重的骨髓抑制。81第二章一般血液學(xué)檢驗網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)（RMI）RMI=（HFR+MFR）/LFR×100%HFR、MFR、LFR-高、中、低熒光強度網(wǎng)織紅細胞，熒光強度高，網(wǎng)織紅細胞越幼稚RMI增高是RBC造血早期標(biāo)志，較Ret計數(shù)敏感82第二章一般血液學(xué)檢驗網(wǎng)織紅細胞類型Ⅰ型（絲球型）顆粒呈致密塊狀Ⅱ型（網(wǎng)型）顆粒呈疏松網(wǎng)狀Ⅲ型（破網(wǎng)型）顆粒松散Ⅳ型（點粒型）顆粒點狀散在顆粒越多越密越幼稚外周血Ⅳ型占60%以上83第二章一般血液學(xué)檢驗RPI=病人網(wǎng)織紅細胞%/2×病人PCV/正常人PCV（男0.45，女0.40）臨床應(yīng)用：＞3提示溶血性貧血或急性失血性貧血；＜2提示為骨髓增生低下或紅細胞系成熟障礙性貧血。網(wǎng)織紅生成指數(shù)（Reticulocyteproductionindex,RPI）84第二章一般血液學(xué)檢驗嗜堿性點彩紅細胞計數(shù)發(fā)育過程中因化學(xué)損傷，胞質(zhì)殘留RNA變性沉淀的未成熟紅細胞。血涂片瑞氏染色后油鏡下計數(shù)1000個RBC中點彩紅細胞的百分數(shù)參考范圍<=0.01%重金屬（鉛、汞等）中毒顯著增高惡貧、溶貧、鐵粒幼、白血病、惡性腫瘤、瘧疾可增高85第二章一般血液學(xué)檢驗嗜堿性點彩紅細胞與嗜多色性紅細胞86第二章一般血液學(xué)檢驗概念紅細胞在一定條件下單位時間內(nèi)沉降的速度，簡稱血沉，是反映紅細胞聚集性的指標(biāo)。病理情況下血沉可明顯加快。六、血細胞沉降率（erythrocytesedimentationrate,ESR）87第二章一般血液學(xué)檢驗魏氏法：取靜脈血1.6ml，按4:1比例與檸檬酸鈉溶液（0.4ml）混勻，吸入清潔、干燥的標(biāo)準魏氏血沉管至“0”刻度處。血沉管在室溫下（18～25℃）垂直放置于血沉架，避免陽光直照、振動和血液外溢。1h后，血漿凹液面底部至沉降紅細胞柱頂部之間距離，即為血沉結(jié)果，以mm/h報告。

１.測定方法88第二章一般血液學(xué)檢驗動態(tài)監(jiān)測法：根據(jù)紅細胞界面隨時間下降的原理，采用光電管每隔60s動態(tài)監(jiān)測紅細胞沉降的位置，得到沉降高度-時間曲線,動態(tài)分析血沉過程。光密度法：利用激光為光源，對毛細管中的微量抗凝全血照射，動態(tài)檢測紅細胞聚集和沉降的變化過程，而后通過光密度的變化換算成魏氏法的相關(guān)結(jié)果。89第二章一般血液學(xué)檢驗參考范圍

魏氏法成年男性：0-15mm/h

成年女性：0-20mm/h許多疾病血沉加快缺乏特異性，用于篩查90第二章一般血液學(xué)檢驗２.影響血沉的因素

（１）血漿因素正電荷的大分子物質(zhì)（凝血因子I、球蛋白）：血沉加快;負電荷的蛋白質(zhì)（白蛋白）：血沉減慢;脂類：膽固醇，甘油三脂，利于紅細胞聚集，血沉加快;卵磷脂使血沉減慢;分子多聚體藥物：使紅細胞聚集，如白明膠等。91第二章一般血液學(xué)檢驗（２）紅細胞因素紅細胞數(shù)量：一般數(shù)量減少，阻力減小，血沉加快，數(shù)量增多，血沉減慢;紅細胞形態(tài)：直徑大，厚度薄，紅細胞易形成緡錢狀，血沉加快，形態(tài)異常或大小不均，血沉減慢。紅細胞表面電荷破壞：病毒、細菌感染，血沉加快。92第二章一般血液學(xué)檢驗（３）技術(shù)因素血沉管的位置：傾斜，血沉加快；

溫度：室溫越高，血沉加快；

時間：2h內(nèi)測定抗凝劑的使用:稀釋度大，血沉加快；

標(biāo)本因素：脂血、凝塊、溶血

93第二章一般血液學(xué)檢驗３.臨床應(yīng)用

（1）生理性加快

?婦女月經(jīng)期，妊娠1月以上；

?兒童；

?老年人，特別是70歲以上。94第二章一般血液學(xué)檢驗（2）病理性加快

?各種炎癥

?組織損傷及壞死

?惡性腫瘤

?高球蛋白血癥?貧血?高膽固醇血癥95第二章一般血液學(xué)檢驗病理性加快感染是最常見原因，動態(tài)觀察疾病活動性及變化；鑒別心梗、肺梗與心絞痛，腫瘤篩查與良惡鑒別貧血肝硬化腎炎免疫系統(tǒng)疾病96第二章一般血液學(xué)檢驗第三節(jié)白細胞檢驗白細胞為有核細胞，分為中性粒細胞，嗜酸性粒細胞，嗜堿性粒細胞，淋巴細胞和單核細胞五種。97第二章一般血液學(xué)檢驗外周血正常白細胞形態(tài)98第二章一般血液學(xué)檢驗白細胞成熟過程祖細胞釋放入外周血液血循環(huán)血管壁

邊緣池循環(huán)池原粒細胞早幼粒中幼粒晚幼粒桿狀核分葉核成熟池(髓內(nèi))分裂池(髓內(nèi))貯備池(髓內(nèi))干細胞99第二章一般血液學(xué)檢驗白細胞生長發(fā)育成熟階段中性粒細胞：原始粒細胞→中性早幼?！杏琢！碛琢！鷹U狀核→分葉核細胞嗜酸、嗜堿粒細胞：原始粒細胞→嗜酸（堿）早幼?！杏琢！碛琢！人幔▔A）粒細胞淋巴細胞：原始淋巴細胞→幼稚淋巴細胞→淋巴細胞單核細胞：原始單核細胞→幼稚單核細胞→單核細胞100第二章一般血液學(xué)檢驗中性粒細胞生長發(fā)育成熟階段101第二章一般血液學(xué)檢驗一、白細胞計數(shù)

是測定單位體積（每升）血液中各種白細胞的總數(shù)。計數(shù)方法：1.顯微鏡計數(shù)法2.血細胞分析儀法

102第二章一般血液學(xué)檢驗１.參考范圍

成人：男（3.97~9.15）×109/L；

女（3.69~9.16）×109/L；

兒童：（8～10）×

109/L

嬰兒：（11～12）×

109/L

新生兒：（15～20）×

109/L103第二章一般血液學(xué)檢驗２.顯微鏡計數(shù)法原理用白細胞稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)并破壞紅細胞后充入計數(shù)池，在顯微鏡下計數(shù)一定容積中的白細胞數(shù)，換算成每升血液中的白細胞總數(shù)。

104第二章一般血液學(xué)檢驗計數(shù)板105第二章一般血液學(xué)檢驗顯微鏡計數(shù)法106第二章一般血液學(xué)檢驗107第二章一般血液學(xué)檢驗計數(shù)方法與原則采血順利，血量準確，稀釋液量正確充分混勻后點樣充入計數(shù)池計數(shù)9大方格中四角4個方格，弓形移動壓線細胞數(shù)左不數(shù)右，數(shù)上不數(shù)下，白細胞數(shù)=N/4×10×稀釋倍數(shù)×106/L出現(xiàn)大量有核紅細胞應(yīng)校正108第二章一般血液學(xué)檢驗（1）經(jīng)驗控制

血涂片RBC:WBC=500:1

WBC(×109/L)WBC/HP4~72~47~104~610~136~1013~1810~20血涂片白細胞分布密度：109第二章一般血液學(xué)檢驗二、白細胞分類計數(shù)

（differentialcount，DC）顯微鏡分類計數(shù)法110第二章一般血液學(xué)檢驗外周血五種白細胞111第二章一般血液學(xué)檢驗白細胞形態(tài)特征（一）中性粒細胞：圓形，胞質(zhì)豐富，顆粒較多，細小均勻紫紅色，核分葉或桿狀，染色質(zhì)粗，緊密成團，深紫紅色嗜酸粒細胞：圓形，顆粒橘紅色，粗大整齊均勻，充滿胞質(zhì)，核多二葉眼鏡狀，染色質(zhì)粗，染紫紅色嗜堿粒細胞：圓形，胞質(zhì)量少淡紅色，顆粒紫黑色，大小不均，排列不齊，常覆于核，核分葉不明顯，染色質(zhì)粗，著色淺有模糊感112第二章一般血液學(xué)檢驗白細胞形態(tài)特征（二）淋巴細胞：圓形，有大小，胞質(zhì)很少，藍色透明，無顆粒，偶見少數(shù)粗大不均紫紅色嗜天青顆粒，核圓或腎形，染色質(zhì)粗，緊密成團排列均勻，深紫紅色單核細胞：圓形或橢圓形，胞質(zhì)豐富，淡藍或灰藍色，毛玻璃樣半透明，彌散細小灰塵樣紫紅色嗜天青顆粒，核呈腎形、馬蹄形折疊，染色質(zhì)疏松網(wǎng)狀，淡紫紅色113第二章一般血液學(xué)檢驗瑞氏染液氯化亞甲藍（MCl）與伊紅化鈉（NaE）的甲醇溶液甲醇是Wright染料良好溶劑，固定細胞形態(tài)，將蛋白質(zhì)沉淀為顆粒網(wǎng)狀增加接觸面提高染料吸附解離成M+（亞甲藍）和E-（伊紅）磷酸鹽緩沖液（pH6.4-6.8）114第二章一般血液學(xué)檢驗瑞氏染色步驟1.血涂片平放于染色架2.瑞氏染液數(shù)滴覆蓋血膜，固定1min3.加等量緩沖液與染液混勻，染5-10min4.流水沖去染液，吸（吹）干鏡檢115第二章一般血液學(xué)檢驗1.顯微鏡分類計數(shù)法

將血液制成涂片，經(jīng)染色后在油鏡下計數(shù)100個白細胞進行分類，求得各種類型白細胞的比值（百分率）。

116第二章一般血液學(xué)檢驗2.參考范圍

cellpercentageabsolutevalueneutrophilicgranulocytebandform1~6％(0.04~0.6)×109/Lneutrophilicgranulocytesegmentedform50~70％(2.0~7.0)×109/Leosinophil0.5~5%(0.02~0.5)×109/L

basophil0~1%(0~1.0))×109/Llymphocyte20~40%(0.8~4.0))×109/L

monocyte3~10%(0.12~1.0))×109/L117第二章一般血液學(xué)檢驗顯微鏡分類計數(shù)要點良好的涂片染色低倍鏡查看細胞分布、染色質(zhì)量，片尾邊緣有無巨大細胞和寄生蟲，體尾交界處油鏡分類，城墻式移動根據(jù)細胞大小、胞質(zhì)色量、顆粒色形、核形密度等形態(tài)染色特征辨別種類,分別計數(shù)幼稚、異常白細胞包括在總數(shù)內(nèi)有核紅細胞報計數(shù)100個白細胞同時所見個數(shù)118第二章一般血液學(xué)檢驗血細胞分析儀法三分類：檢測溶血后的白細胞體積按大小分成3類細胞群五分類：運用VCS技術(shù)分析數(shù)千個白細胞，根據(jù)其體積、核形、胞質(zhì)顆粒特征參數(shù)，分成5類細胞群119第二章一般血液學(xué)檢驗三.白細胞計數(shù)與分類計數(shù)的臨床應(yīng)用

1.中性粒細胞（Neutrophil，N）：具有黏附，趨化，吞噬及殺菌等功能，在機體防御和抵抗病原菌侵襲過程中起著重要作用。數(shù)量最多，對白細胞總數(shù)影響最大。120第二章一般血液學(xué)檢驗光鏡結(jié)構(gòu)電鏡結(jié)構(gòu)121第二章一般血液學(xué)檢驗(1)生理性變化

年齡新生兒WBC升高，一般在20×109/L；3～4天降至10×109/L左右；3月后接近成人水平。122第二章一般血液學(xué)檢驗

運動、疼痛和情緒影響

當(dāng)劇烈運動、疼痛和激動時，WBC↑↑，以N為主，為循環(huán)池和邊緣池細胞重新分布和骨髓釋放增加的結(jié)果。123第二章一般血液學(xué)檢驗日間變化

在安靜和休息時WBC較低?；顒雍瓦M食后較高。下午高于上午。一日之內(nèi)最高值約為最低值的2倍。124第二章一般血液學(xué)檢驗妊娠與分娩

妊娠>5個月，WBC↑。通常在

(12~17)×109/L

，分娩時疼痛和產(chǎn)傷可更高，如無并發(fā)癥產(chǎn)后1周內(nèi)恢復(fù)正常。125第二章一般血液學(xué)檢驗（２）中性粒細胞病理性變化急性感染：化膿性球菌嚴重的組織損傷急性溶血急性大出血急性中毒腫瘤性增多骨髓增殖性疾病病理性增多126第二章一般血液學(xué)檢驗?zāi)承└腥荆℅-桿菌、病毒感染）某些血液病（AA、粒缺）慢性理化損傷（放射、化療）自身免疫性疾病（SLE）脾功能亢進病理性減少127第二章一般血液學(xué)檢驗２.嗜酸性粒細胞（eosinophil，Ｅ）

光鏡結(jié)構(gòu)電鏡結(jié)構(gòu)128第二章一般血液學(xué)檢驗嗜酸粒細胞功能殺傷細菌和寄生蟲抗過敏反應(yīng)調(diào)節(jié)超敏反應(yīng)促炎癥反應(yīng)129第二章一般血液學(xué)檢驗（1）病理性增多

過敏性疾病寄生蟲病某些傳染病及傳染病恢復(fù)期某些皮膚病血液病某些惡性腫瘤130第二章一般血液學(xué)檢驗（2）病理性減少見于傷寒、副傷寒、手術(shù)后嚴重組織損傷以及應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素或促腎上腺皮質(zhì)激素后。131第二章一般血液學(xué)檢驗3.嗜堿性粒細胞（

basophil，B）

光鏡結(jié)構(gòu)電鏡結(jié)構(gòu)132第二章一般血液學(xué)檢驗嗜堿粒細胞功能參與超敏反應(yīng)133第二章一般血液學(xué)檢驗（1）病理性增多

慢粒：嗜堿性粒細胞可>10％;骨髓增生性疾?。喝缯嫘约t細胞增多癥;其他：如嗜堿性粒細胞白血病、脾切除后和某些轉(zhuǎn)移癌。

134第二章一般血液學(xué)檢驗4.淋巴細胞（Lymphocyte，L）

光鏡結(jié)構(gòu)電鏡結(jié)構(gòu)135第二章一般血液學(xué)檢驗淋巴細胞功能細胞免疫體液免疫免疫調(diào)節(jié)136第二章一般血液學(xué)檢驗?zāi)承﹤魅静。喝顼L(fēng)疹、百日咳等。某些傳染病恢復(fù)期和腎移植術(shù)后發(fā)生排斥反應(yīng)時;急慢性淋巴細胞