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文檔簡介
實驗11植物的組織培養(yǎng)一、實驗目的:1.進行菊花的組織培養(yǎng)2.嘗試植物激素的應用
二、實驗原理:植物體細胞全能性繁殖方式:無性繁殖(有絲分裂)優(yōu)勢:繁殖速度快而且可以保持親本的優(yōu)良性狀三、植物組織培養(yǎng)基本過程胚狀體細胞排列松散、無規(guī)則的薄壁細胞,分裂能力強液體懸浮培養(yǎng)四、植物組織培養(yǎng)的條件1、離體(外植體)外植體的選擇:嫩枝或新生芽(細胞分化程度低,生理狀態(tài)好,容易脫分化和再分化)2、營養(yǎng)條件:培養(yǎng)基配置(1)成分:
大量元素(N源)、
微量元素
、有機物(C源)、激素(生長素、細胞分裂素等)、瓊脂(2)類型:MS培養(yǎng)基發(fā)芽培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基3、不同植物激素使用順序和使用量書P604、環(huán)境條件適宜的PH、溫度和光照等注意:①整個操作及培養(yǎng)過程中,都需要一個無菌環(huán)境②脫分化:一般遮光處理再分化:需要適宜光照制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒
接種
生芽定植五、實驗步驟
移栽鍛煉沖洗—酒精—次氯酸鈉2次—無菌水沖洗
生根書P60從狀苗此時的組織或細胞為離體的,即細胞所生活的環(huán)境為液體有機物營養(yǎng)環(huán)境,而不是能體現其整個植物體的光能自養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,是脫分化、再分化的過程,隨著芽和根的形成,就具有了自養(yǎng)的能力,是由細胞到一個個體的演變過程。1、高等植物是光能自養(yǎng)型生物,為什么在植物組織培養(yǎng)過程中還需要提供有機物培養(yǎng)基?2、培養(yǎng)過程中為什么需要進行光照思考?1、培養(yǎng)基的滅菌(高壓蒸汽滅菌)2、外植體的消毒(酒精、次氯化鈉3、接種的無菌操作(酒精、酒精燈)4、無菌箱中的培養(yǎng);5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。3、在整個操作過程中,是如何來實現無菌環(huán)境的?激素使用的先后順序對細胞分裂和分化的影響。使用順序實驗結果先生長素,后細胞分裂素有利于分裂但不分化先細胞分裂素,后生長素細胞既分裂也分化 同時使用分化頻率提高 生長素/細胞分裂素比值結果比值高時 促根分化,抑芽形
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