第九章-淋巴細(xì)胞

淋巴細(xì)胞學(xué)習(xí)目標(biāo)掌握T、B細(xì)胞重要的表面分子及作用掌握T、B細(xì)胞的功能熟悉分群方法及各群概況第一節(jié)T淋巴細(xì)胞T細(xì)胞是胸腺(thymus)依賴性淋巴細(xì)胞的簡(jiǎn)稱T細(xì)胞執(zhí)行特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答，并在TD-Ag誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。一、T細(xì)胞表面分子和作用TCR-CD3復(fù)合物CD4和CD8分子協(xié)同刺激分子受體絲裂原結(jié)合分子其他

（一）TCR-CD3復(fù)合物

1、TCR:T細(xì)胞抗原受體兩型

TCRαβTCRγδ四種肽鏈:αβγδTherearetwotypesofTCRa/bandg/d.TheyareexpressedbydifferenttypesofTcells.*只能識(shí)別APC表面的抗原肽-MHC分子復(fù)合物*

胞漿區(qū)短，不能轉(zhuǎn)導(dǎo)活化信號(hào)*

識(shí)別有雙重特異性特點(diǎn):TCR

識(shí)別MHC/抗原肽復(fù)合分子TCR抗原肽MHCT細(xì)胞抗原遞呈細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)T細(xì)胞的第一活化信號(hào)γ,δ,ε,ζ,η2、CD3分子有免疫受體酪氨酸活化基序（ITAM）五種肽鏈TheinvariantCD3componentsarerequiredforTCRsurfaceexpressionandfortransmittingantigensignaltothecell.CD3componentsareinvariant,i.e.,identicalinallTcells.（二）CD4和CD8分子CD4分子:結(jié)合MHCⅡ類分子β2結(jié)構(gòu)域CD8分子:結(jié)合MHCⅠ類分子α3結(jié)構(gòu)域CD4為HIV的受體功能輔助TCR識(shí)別抗原（又稱TCR輔助/共同受體)參與細(xì)胞活化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。Figure3-14（三）協(xié)同刺激分子受體CD28和CD152（CTLA-4）：配體為B7CD40L:配體為CD40，表達(dá)于APCCD2：配體為L(zhǎng)FA-3（CD58）等。LFA-1和ICAM-1:介導(dǎo)T細(xì)胞與APC間的粘附與APC表面協(xié)同刺激分子結(jié)合,產(chǎn)生協(xié)同刺激信號(hào)（第二信號(hào)）作用CD28和CD152（CTLA-4）--B7的配體B7包括B7.1(CD80）B7.2(CD86)表達(dá)于APCCTLA-4胞漿內(nèi)有ITIM基序，轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制性信號(hào)（四）絲裂原結(jié)合分子ConAPHAPWMCD4MHC-IITCR/CD31ICAM-1B7-1B7-2LFA-1LFA-1ICAM-3LFA-3B7-1CD28CD28LFA-1ICAM-3CD22參與T細(xì)胞活化的膜表面分子T細(xì)胞APCCTLA-4—T淋巴細(xì)胞表面分子的作用參與T細(xì)胞識(shí)別抗原T細(xì)胞的活化、增殖、分化及效應(yīng)功能的發(fā)揮區(qū)別T細(xì)胞及T細(xì)胞亞群的重要標(biāo)志二、T淋巴細(xì)胞亞群（一）據(jù)所處的活化階段分群初始T淋巴細(xì)胞效應(yīng)T淋巴細(xì)胞記憶性T淋巴細(xì)胞（二）據(jù)表達(dá)TCR的類型分群TCRαβ+T細(xì)胞TCRγδ+T細(xì)胞:只能識(shí)別多種病原體表達(dá)的共同抗原

（三）據(jù)CD分子的表達(dá)分群CD4+T細(xì)胞識(shí)別外源性抗原肽活化后分化為T(mén)h細(xì)胞CD8+T細(xì)胞識(shí)別內(nèi)源性抗原肽活化后分化為CTL細(xì)胞

（四）據(jù)功能分群Th細(xì)胞:初始CD4+Th，可分化為T(mén)h1、Th2、Th3CTL(Tc)細(xì)胞:表達(dá)TCRαβ、CD8分子調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tr）:在免疫應(yīng)答負(fù)調(diào)控及自身免疫耐受中發(fā)揮作用。CD4+Th細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)抗原類型和濃度局部微環(huán)境APC類型:Mφ提呈抗原TH1細(xì)胞B細(xì)胞提呈抗原TH2細(xì)胞激素作用TCD8CD4CD4+25+Th1Tc2Tc1Th2Th3Tr1PeripheralTlymphocyte5-10%30%60%Thymus三、T淋巴細(xì)胞功能（一）CD4+Th細(xì)胞Th1細(xì)胞細(xì)胞免疫,介導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)。Th2細(xì)胞促進(jìn)體液免疫參與超敏反應(yīng)抗寄生蟲(chóng)感染Th3細(xì)胞Th1、B、CTL和NK增殖和功能。

+_

（二）CD8+

殺傷性T細(xì)胞(CTL)的功能抗腫瘤抗病毒參與移植排斥反應(yīng)。Figure3-11（三）調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tr)的功能

抑制CD4+和CD8+T細(xì)胞的活化與增殖第二節(jié)B淋巴細(xì)胞CD80/86CD40FcmRCD32BCRMHC-II一、B細(xì)胞膜表面分子CD19CD20（離子通道）CD79aCD79bCD21CD23（一）B細(xì)胞抗原受體復(fù)合物

（Bcellreceptor,BCR)

mIg：不成熟B細(xì)胞表達(dá)mIgM成熟B細(xì)胞表達(dá)mIgM與mIgD功能：結(jié)合特異性抗原

Ig（CD79a)/Igβ(CD79b)胞漿區(qū)有ITAM基序。

功能:轉(zhuǎn)導(dǎo)抗原與BCR結(jié)合所產(chǎn)生

的信號(hào)

參與Ig從胞內(nèi)向胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)。BCR（二）輔助受體增強(qiáng)B細(xì)胞對(duì)抗原刺激的敏感性。

CD19/CD21/CD81/CD225:CD21：C3d受體（三）協(xié)同刺激分子CD40：組成性表達(dá)于成熟B細(xì)胞CD80和CD86:為B細(xì)胞活化提供第二信號(hào)協(xié)助活化的B細(xì)胞提呈抗原給T細(xì)胞作用(四)絲裂原受體LPSPWM表面分子T細(xì)胞B細(xì)胞抗原受體復(fù)合物TCR-CD3mIgCD79a/CD79b輔助受體CD4/CD8CD19/CD21/CD81/CD225協(xié)同刺激分子CD28*CD40LLFA-2（CD2）ICAM-1/LFA-1CD40*CD80/CD86絲裂原受體PHA、ConAPWMLPS、PWM二、B細(xì)胞亞群B-1細(xì)胞B-2細(xì)胞B-1與B-2細(xì)胞的異同性質(zhì)B-1B-2表面標(biāo)志CD5+CD5-初次產(chǎn)生時(shí)間胎兒期出生后特異性多反應(yīng)性單特異性分泌的IgIgM>IgGIgG>IgM體細(xì)胞高頻突變低/無(wú)高對(duì)碳水化合物應(yīng)答較強(qiáng)可能對(duì)蛋白質(zhì)應(yīng)答較弱是參與免疫應(yīng)答類型固有性

適應(yīng)性三、B淋巴細(xì)胞功能產(chǎn)生抗體:針對(duì)病毒和胞內(nèi)細(xì)菌的感染→中和作用針對(duì)胞外復(fù)制的細(xì)菌→調(diào)理作用提呈抗原參與免疫調(diào)節(jié)外顯子1

內(nèi)含子

RNA轉(zhuǎn)錄本mRNA蛋白質(zhì)多肽鏈基因1基因2基因3基因4外顯子2

外顯子4

外顯子3

內(nèi)含子內(nèi)含子染色體DNA完整基因基因的結(jié)構(gòu)、轉(zhuǎn)錄與翻譯V3

Vn

J1

J2

J3

J4

V1

V2

CJ5

前B細(xì)胞DNA

V1

V2

V3

VnJ3

J1

J2

J4

CJ5

基因重排J5

CRNA剪切V2

J4

VLCL

V1

V2

J4

CJ5

成熟B細(xì)胞DNA初級(jí)轉(zhuǎn)錄本V1

V2

J4

CJ5

J4

V2

CmRNA

LVHCm

1.胚系基因

2.基因重排3.重排基因

4.RNA轉(zhuǎn)錄本

5.mRNA剪切6.成熟mRNA7.Igm前體多肽

V1

V2V3Vn

D1D2

D3Dn

J1J2J3J4Cm

Cd

CgCe

Ca

V1

V2D2

J3J4CmCd

CgCe

Ca

V1V2D2J3J4CmCdCgCe

Ca

V2D2J3J4CmCd

V2D2J3CmCd

V2D2J3

CdCmJ4J4

V2D2J3Cm

V2D2J3Cd

LVHCd

Ig重鏈基因重排

7-4 Ig基因及其重排

VVVVVVVVJJJJJK著絲粒

VVVV

VVVPREB1VVJ1L1J2L2J3L3J4L4J5L5J6L6J7L7IGLL1IGLL2IGLL3

VVDDDDVVDDDDJJJJMDG3G1EP1A1GPG2G4E1A295個(gè)IGHV23個(gè)IGHD

9個(gè)IGHD

9個(gè)IGHJ

11個(gè)IGHC900kb

240Kb

22Kb

35Kb

300Kb免疫球蛋白

基因結(jié)構(gòu)

IGH（位于染色體14q32）

IGK（位于染色體2p12-p11）

>1.85Mb0.85Mb多于90個(gè)IGKV

5個(gè)IGKJ

IGKC

11個(gè)IGKVorphons

IGL（位于染色體22q11）

60個(gè)IGLV

800Kb

14Kb

60Kb

670Kb

30Kb

150Kb

7個(gè)IGLJ與

7個(gè)IGLC交替排列

3個(gè)IGLL基因座

7核苷酸CACAGTGACAAAAACC12V23VCACAGTGGGTTTTTGT23V1212

23

J

12J

23

J

D

Ig基因的重信號(hào)序列IGKIGLIGH

9核苷酸

9核苷酸

7核苷酸V、D和J基因片段兩端的重組信號(hào)序列按圖中所示方式組成，以保證V、（D）、J之間的正確重排。

Ig

基因重排序列

CCAAAAACAGGTTTTTGTD4

D3

D23

J1

CACTGTG

CTGACAC

D1

D2

J2

J3

C

5'

3'剪切12bp23bp一個(gè)IGHD（如IGHD2）和一個(gè)IGHJ（如IGHJ2）基因片段通過(guò)其兩側(cè)的23bp-RSS和12bp-RSS被拉攏在一起。它們之間的DNA片段形成環(huán)狀并被剪除，IGHD2和IGHJ2之間被修復(fù)酶連接在一起。

HeavychaindiversitycreatedbyvariablerecombinationAATAGAGATAGAGATGAGGCGTACACTGGTGTAATACACTGGTGTAAGACACTGGTGTAAACCTGGTGTACCGTGTACGTGACGTTTGTACCCAspArgArgArgAsnAspAspAspTyrTyrTryTryTryGlyGlyGlyAsnSerSerTyrTyrTrpTrpGlySerTyrPheTyrSerThrJHVHDS107M603M167S107M603M167

LightchaindiversitycreatedbyvariablerecombinationCCCCCCTGGCCCTGGProTrpProteinRecombinedDNAGermlineDNACCCCCCTGGCCCCGGProArgCCCCCCTGGCCCCCGProProGenerationofantibodydiversity1multiplegenesDNAV-regionproteins4mutation2variablerecombination3nucleotideadditionV1V3V4V2V5V6VnV

mutationVVVJ1J2JnJ2VVJ1J2JnJ2nucleotidesIg基因的體細(xì)胞高頻突變與抗體分子的親和力成熟7-5Classswitching5’

3’

LVH1LVHnDH1DH7DH13JH

5’

LVH1LVH201LVHnDH1DHDHJHCμCdCg3Cg1Cg2bCg2aCeCa

CμCdCg3Cg1Cg2bCg2aCeCa

3’

3’5’

LVH1LVH200LVDJJHCμCdCg3Cg1Cg2bCg2aCeCa5’

3’LVDJJHCμCd

7-5Classswitching5’

3’

LVH1LVHnDH1DH7DH13JH

5’

LVH1LVH201LVHnDH1DHDHJHCμCdCg3Cg1Cg2bCg2aCeCa

CμCdCg3Cg1Cg2bCg2aCeCa

3’

3’5’

LVH1LVH200LVDJJHCμCdCg3Cg1Cg2bCg2aCeCa5’

3’LVDJJHCμCd

LVHCg

V2D2J3J4

Cg

V2D2J3Cg

V2D2J3Cg

V1

V2D2J3J4

CgCe

Ca

V2D2J3J4CmCd

Cg

V2D2J3Cg1.重排基因2.DNA再次重排

3.RNA轉(zhuǎn)錄本

4.mRNA剪切

5.成熟mRNA

6.Igg前體多肽

V1

V2D2J3J4CmCdCgCe

Ca

Ig分子類別轉(zhuǎn)換的機(jī)理

A

B

抗體分子的類別轉(zhuǎn)換---DNA再次重排

VDJSm

IGHMSg

IGHGSe

IGHE

VDJSmSe

IGHE

再次重排副產(chǎn)物再次重排IGH

基因+IL-4+CD40L重排IGH基因SgIGHG

SmSeIGHM

類別轉(zhuǎn)換機(jī)制

VDJ下游的IGHM、IGHD、IGHG等基因片段被剪除后，VDJ基因片段直接與IGHE相連，所產(chǎn)生的基因編碼IgE分子重鏈。

V-D-JdV-D-JmdPloyAPloyAV-D-JmIgDmRNAIgMmRNAPrimaryRNAtranscript抗體分子的類別轉(zhuǎn)換---RNA替代剪切

LVDJCm2Cm3Cm4SM1M2DNA

PolyAPolyAIgmsmRNA

IgmmmRNA

分泌型與膜型IgM的產(chǎn)生膜型

分泌型Ig重鏈C區(qū)基因的3端含有編碼疏水性跨膜區(qū)的兩個(gè)外顯子（M1、M2）及多腺苷酸化位點(diǎn)（PA）。mRNA轉(zhuǎn)錄本的替代剪切產(chǎn)生兩種不同的mRNA，帶有M1和M2外顯子序列者指導(dǎo)膜型Igm的合成，M1和M2序列被剪除者指導(dǎo)分泌型Igm鏈的合成。

secreted(ms)membrane(mm)MembraneandsecretedIgM7-6 B細(xì)胞發(fā)育表達(dá)Pre-BCR的B細(xì)胞表達(dá)sIgM的未成熟B細(xì)胞B細(xì)胞的中樞免疫耐受表達(dá)sIgD和sIgM的成熟B細(xì)胞Iga/Igb與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)骨髓基質(zhì)細(xì)胞和IL-7在B細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中的作用B祖細(xì)