第二、三章 實驗動物遺傳學(xué)、微生物學(xué)分類1

第二章實驗動物的遺傳學(xué)分類

李超英實驗動物的遺傳學(xué)分類本章重點掌握的內(nèi)容1、近交系和其他類型的近交系定義2、近交系的命名、特征及生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用價值3、封閉群和雜交群定義4、封閉群和雜交群的命名5、封閉群和雜交群在生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用價值近交：即近親繁殖，是指一群體中有目的的選用遺傳學(xué)上血緣關(guān)系較近的雌雄個體之間進行交配。近交衰退：即近交后代出現(xiàn)生長、成活、生育、抗病、適應(yīng)環(huán)境能力減退的現(xiàn)象。近交程度：近交系數(shù)（F）：根據(jù)近親交配的世代數(shù)，將基因的純化程度用百分比來表示。F=0%，F(xiàn)=100%。Fn=[1-(1-△F)n]*100%近交系動物：是指經(jīng)過20代以上連續(xù)全同胞或親子交配，品系內(nèi)所有個體都可追溯到上20代或更遠代數(shù)的一對共同祖先的動物群。第一節(jié)近交系動物

近交系動物的命名

用1-4個大寫英文字母表示兩個大寫英文字母間加入1-2個阿拉伯?dāng)?shù)字來表示非正規(guī)命名：129、101、615等品系關(guān)系相近，同一來源的不同品系近交系動物的命名

代數(shù)表示，在品系符號后括號里寫上代數(shù)，在代數(shù)前加寫F書寫品系命名符號要寫全國際公認的品系縮寫有：AKR---AK、BALB/c---C、CBA---CB、C3H---C3、C57BL---B、C57BL6---B6、C57BL/10---B10、C57BR---BR、C57L---L、DBA/1---D1、DBA/2---D2、HRS/J---HR，RⅢ---R3二、亞系的特點及命名

亞系：是由一個近交系分離出來的具有各不相同特性的品系。亞系的命名三、支系特點及命名

種群轉(zhuǎn)移如：C57/6J/Lac經(jīng)人為處置形成支系精卵或胚胎移植“e”如：C3HeB、卵巢移植“o”、奶母代乳“f”、人工喂養(yǎng)“h”

人工喂養(yǎng)加奶母代乳“hf”、冷凍保存“p”

去除或植入垂直感染的病毒如C3H/HEN-MTV+支系：是亞系內(nèi)的小分類，一般由一個亞系引到另一個單位形成的新亞系，也可經(jīng)人為處置形成支系。近交品系動物綜合表示法

如：DBA/1fLACA/LacC57BL/6J特殊類型的近交系動物

重組近交系動物：以兩個無關(guān)的高度近交的品系進行交配，產(chǎn)生F2代后，再進行全同胞交配達20代以上而育成的近交品系。重組近交系動物的命名重組近交系動物的應(yīng)用

分離分析、連鎖分析、功能分析重組同類系：由兩個近交系雜交后，子代與兩個親代近交系中的一個近交系進行數(shù)代回交，再經(jīng)無對特殊基因選擇的近親交配而育成的近交系重組同類系的命名特殊類型的近交系動物

同源突變近交系：指兩個近交系除了一個指明位點等位基因不同外，其它遺傳基因全部相同的品系。同源導(dǎo)入近交系：是通過基因?qū)氲姆椒▽⒁粋€目的基因?qū)肽硞€近交系的基因組內(nèi)。分離近交系：是在培育近交系的同時，采取一定的交配方法，迫使個別基因位點上的基因處于雜合狀態(tài)。命名

同源突變近交系的命名：如C57BL/6J-bg;C57BL/6J-bg/+

同源導(dǎo)入近交系的命名：如B10·129-H-2b近交系特征

基因純合性

遺傳穩(wěn)定性

同源性

表形均一性對外界的敏感性個體性可辨性分布廣泛性資料可查性近交系動物的應(yīng)用

近交系小鼠的應(yīng)用：組織移植制作疾病動物模型比較遺傳學(xué)研究

封閉群動物的特點及應(yīng)用封閉群（Closedcolony）的正確概念是指引種于某親本或同源親本的動物，讓其不以近交形式，也不與群外動物雜交而繁衍的動物群，目的是要求整個群體盡量防止近親交配而保持著遺傳變異，也就是說既保持群體的一般特性，又保持動物的雜合性。至于個體間差異的程度因引種來源的不同而有不同，如引種于一般雜種，則個體間差異就大；如果引種于有近交歷史的動物，則個體間差異就小。第二節(jié)封閉群動物的特點及應(yīng)用命名如：N：NIH、Han:NMRI特點1.保持一定的雜合性

2.保持相對的穩(wěn)定性3.個體差的大小取決于祖代

4.繁殖力、抗病力強5.群體中存在有模型價值的突變基因應(yīng)用人類遺傳研究、毒性實驗、藥物篩選等等預(yù)試驗、學(xué)生教學(xué)和一般實驗

常用的封閉群動物小鼠有KM、ICR、NIH、CFW、LACA等，大鼠有SD、Wister等，豚鼠主要有英國短毛種等，家兔有日本大耳白兔、新西蘭白兔、中國本兔等。第三節(jié)系統(tǒng)雜交動物的特點及應(yīng)用

雜交一代動物：兩個近交品系動物之間進行有計劃交配所獲得的第一代動物。命名例如：C57BL/6♀×DBA/2♂→B6D2F1，DBA/2♀×C57BL/6♂→D2B6F1

系統(tǒng)雜交動物的特點及應(yīng)用

特征1.具有雜交優(yōu)勢2.遺傳和表型上的一致性3.雜合的遺傳組成4.作為疾病研究的模型應(yīng)用干細胞研究免疫學(xué)研究細胞動力學(xué)研究單克隆抗體研究第四節(jié)突變系動物

突變系動物：是指正常染色體的基因發(fā)生了變異的，形成具有各種遺傳缺陷的動物。命名：同同源近交系應(yīng)用：

培養(yǎng)多種腫瘤模型動物、肥胖病(ob/ob)、糖尿病(db/db)、肌萎縮癥模型（dy/dy)、自身免疫病第三章實驗動物的微生物學(xué)分類

李超英第一節(jié)實驗動物的微生物與寄生蟲控制

一級：conventionalanimals二級：cleananimals三級：specificpathogenfreeanimals四級：germfreeanimalsgnotobioticanimals實驗動物微生物等級2001版國家標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)微生物和寄生蟲等級對實驗動物等級進行了重新設(shè)定。小鼠清潔級SPF級無菌級大鼠清潔級SPF級無菌級地鼠普通級清潔級SPF級無菌級豚鼠普通級清潔級SPF級無菌級家兔普通級清潔級SPF級無菌級犬普通級SPF級猴普通級SPF級一、普通動物（Conventionalanimal，簡稱CV動物）定義：不帶有嚴(yán)重危害動物自身健康和人獸共患病病原體的動物。飼養(yǎng)條件：普通開放環(huán)境來源：經(jīng)微生物學(xué)檢查不帶有上述病原體的動物，或SPF動物降級。應(yīng)用：豚鼠、兔、犬、猴等大動物的實驗研究。普通動物特點：1、微生物學(xué)特點要求不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動物烈性傳染病的病原。2、飼養(yǎng)管理飼養(yǎng)于開放系統(tǒng)。但仍然對溫度，濕度，飼料，墊料，飲水，衛(wèi)生等有一定控制。3、生理學(xué)特點外觀健康，飲食排泄正常，無異常分泌物，無臨床癥狀，臟器無眼觀病灶。普通動物的應(yīng)用：僅可作為生物醫(yī)學(xué)中教學(xué)示教之用，或作為某些科學(xué)研究為探索方法而從事的予試驗之用，不可供科研、生產(chǎn)和檢定之用，由于普通級動物繁殖力強，生產(chǎn)量大，生產(chǎn)成本低，適宜作一般性的教學(xué)實驗和預(yù)實驗用。二、清潔動物（Cleananimal，簡稱CL動物）定義：清潔動物：除普通動物應(yīng)排除的病原外，不攜帶對動物危害大和科研干擾大的病原微生物控制級別介于SPF動物和普通動物之間的動物飼養(yǎng)條件：屏障系統(tǒng)大規(guī)模生產(chǎn)來源：SPF動物擴群應(yīng)用：各種科研、教學(xué)用大小鼠清潔級動物1、微生物特點清潔級動物比普通級動物要求排除的微生物和寄生蟲多，但比SPF動物少。清潔級動物除肉眼觀察無病外，尸體解剖時，主要臟器、組織無論是肉眼觀看還是病理組織切片均應(yīng)無病變。清潔級動物2、來源清潔動物來源于SPF動物、無菌動物、悉生動物或剖腹產(chǎn)動物。清潔級動物3、飼養(yǎng)管理清潔級動物飼養(yǎng)于溫濕度恒定的萬級空氣凈化的屏障系統(tǒng)中。其所用的飼料、墊料、飲用水、籠器具等都經(jīng)過消毒滅菌處理。工作人員需換滅菌工作服、鞋、帽、口罩等進入動物室進行操作。清潔級動物的應(yīng)用：清潔級動物是根據(jù)我國國情而設(shè)立的等級動物。它較普通級動物健康，又較SPF級動物易達到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在動物實驗中可免受動物疾病的干擾，其敏感性與重復(fù)性亦較好。目前在我國已成為適用于科研的標(biāo)準(zhǔn)級別的實驗物。三、無特定病原體動物（Specificpathogenfreeanimal，簡稱SPF動物)定義：指不攜帶特定病原體（細菌、病毒、寄生蟲），但帶有未知的微生物群的動物。飼養(yǎng)條件：屏障系統(tǒng)內(nèi)大規(guī)模生產(chǎn)/隔離器內(nèi)保種最初來源：將無菌動物/悉生動物轉(zhuǎn)移到屏障系統(tǒng)中飼養(yǎng)繁殖SPF動物1、微生物特點

SPF動物除一、二級動物應(yīng)排除的病原體外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對研究實驗干擾大的病原。2、來源

SPF動物來源于無菌動物或剖腹產(chǎn)動物。SPF動物3.飼養(yǎng)管理

SPF動物必須飼養(yǎng)在溫濕度恒定的萬級空氣凈化的屏障系統(tǒng)中，實行嚴(yán)格的微生物控制。SPF動物的應(yīng)用：目前國際上公認SPF動物適用于所有科研實驗，是國際標(biāo)準(zhǔn)級別的實驗動物。它的應(yīng)用價值在于它無人畜共患病，無主要傳染病，無對實驗研究可能產(chǎn)生干擾的微生物。各種疫苗生產(chǎn)所采用的動物應(yīng)為SPF動物。四、無菌動物（Germfreeanimal，簡稱GF）定義：指用現(xiàn)有的實驗手段檢測，動物的體表體內(nèi)不攜帶其它生命體（包括一切微生物和寄生蟲）的實驗動物。飼養(yǎng)條件：無菌隔離器內(nèi)來源：第一代通過無菌剖腹產(chǎn)術(shù)，人工哺乳獲得；以后通過無菌動物雌雄交配繁殖或無菌剖腹產(chǎn)術(shù)，保姆鼠代奶擴群。種類培育者及育成時間小鼠Pleasants,1959大鼠Reyniers1946；Gustafsson,1948豚鼠Miyakawa1958;Tanami,1959;兔Wostmann1959;Luckey,1963狗Glimsedt,1946貓Bleby,1969山羊、綿羊Smith,1961,1966豬Whitenair,1960馬Drummond等,1973猴Reyniers,1942雞Reyniers,1943鵪鶉Woodard等,1965;Miles,1966無菌動物特點：1.微生物特點：在動物體內(nèi)外任何部位均檢不出任何活的微生物和寄生蟲。

“無菌”是個相對的概念，只是根據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)知識和檢驗方法在一定時期內(nèi)不能檢出病原體而已。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在認為是無菌的動物或許將來可以檢出病原體而不是無菌動物。無菌動物特點：2.形態(tài)學(xué)特點：消化系統(tǒng)

(1)盲腸肥大

(2)腸道肌層薄，腸絨毛變細變短

(3)肝臟變小無菌動物特點：循環(huán)系統(tǒng)

(1)心臟變小

(2)白細胞數(shù)變少，且數(shù)量波動范圍小免疫系統(tǒng)(1)胸腺，淋巴組織，網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)發(fā)育不良(2)脾臟小，無二級濾泡無菌動物特點：2.生理學(xué)特點：免疫功能

(1)血清中IgG、IgM水平低，幾乎不存在丙種球蛋白和特異性抗體

(2)免疫應(yīng)答速度慢，過敏反應(yīng)、對異體移植物的排斥反應(yīng)以及自身免疫現(xiàn)象消失或減弱生長率

(1)不同種屬不同

(2)無菌鳥類生長率高于同種普通鳥

(3)無菌大、小鼠與普通鼠差不多

(4)無菌豚鼠和無菌兔比普通的慢代謝和營養(yǎng)無菌動物血中含氮量少，腸管對水的吸收率低，代謝周期比普通動物長體內(nèi)不能合成維生素B和K，易產(chǎn)生這兩種維生素的缺乏癥抗輻射能力無菌動物抗輻射能力強，抗實驗性燙傷和抗休克死亡能力也強于普通動物壽命無菌動物的壽命普遍長于普通動物六、悉生動物（Gnotobioticanimal，簡稱GN）定義：又稱已知菌動物，指動物體內(nèi)帶有明確的微生物種類的動物。飼養(yǎng)條件：無菌隔離器內(nèi)來源：人為將已知的微生物投給無菌動物，使其體內(nèi)帶有已知菌單菌動物雙菌動物多菌動物悉生動物特點：微生物特點體內(nèi)攜帶有已知微生物來源無菌動物植入微生物飼養(yǎng)管理

必須飼養(yǎng)在溫濕度恒定的百級空氣凈化的隔離系統(tǒng)中，實行嚴(yán)格的微生物控制。其他與無菌動物比較。悉生動物腸道內(nèi)存在細菌可以合成維生素，不會像無菌動物一樣發(fā)生維生素缺乏癥。抵抗力、生活力較強，易于飼養(yǎng)管理。無菌動物和悉生動物的應(yīng)用

1、動物模型研究可建立具有人正常菌叢或致病菌叢的動物模型2、老年病學(xué)研究無菌動物普遍壽命比普通動物長，說明微生物和機體老化有關(guān)。普通大鼠壽命2年，而無菌大鼠壽命3—4年。

3、心血管病研究實驗證實腸道微生物可以分解膽汁酸，降低血液中膽固醇水平。

4、免疫學(xué)研究中的應(yīng)用

無菌動物體內(nèi)既無抗原也無特異性抗體，處于一種“原始狀態(tài)”，很適合用于各種免疫功能的研究。如，無菌動物暴露于微生物，先產(chǎn)生α球蛋白，再產(chǎn)生β球蛋白，最后產(chǎn)生γ球蛋白。制備高效價，無交叉反應(yīng)的特異性抗體

5、腫瘤學(xué)研究如，制備人體腫瘤模型需要免疫抑制動物，而普通動物給予免疫抑制劑后常繼發(fā)感染死亡，所以可以應(yīng)用無菌動物。研究垂直傳染的致癌病原，如白血病病毒。某些微生物的代謝產(chǎn)物可以降解無害的蘇鐵素，使其致癌。6、毒理學(xué)研究如：研究發(fā)現(xiàn)青霉素過敏是因為腸道菌代謝引起，而非青霉素本身。豆類中毒也是由腸道細菌的代謝活動引起的。7、營養(yǎng)學(xué)的研究無菌動物是研究營養(yǎng)的良好模型，很多營養(yǎng)成分是靠細菌產(chǎn)生的。如VB和VK是靠腸道細菌合成的，無菌動物體內(nèi)不能合成VB和VK，所以可以用來研究哪些細菌合成了哪些維生素。8、其他放射醫(yī)學(xué)研究、宇航中應(yīng)用、微生物等

第二節(jié)衛(wèi)生防疫一、傳染病流行環(huán)節(jié)1、傳染源：有癥狀或無癥狀的病原攜帶者2、傳播途徑：3、易感動物傳播途徑：水或食物傳播空氣飛沫傳播蟲媒傳播接觸傳播：直接或間接垂直傳播二、防疫與隔離措施1、小型實驗動物一旦染病，不可用藥治療和疫苗接種原因：干擾實驗結(jié)果成為潛在感染源經(jīng)濟上不合算2、應(yīng)采取嚴(yán)格的飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生防疫制度

預(yù)防和控制措施預(yù)防措施1）從有資質(zhì)的實驗動物供應(yīng)商處采購動物2）制定科學(xué)的飼養(yǎng)管理和操作規(guī)程,嚴(yán)格按操作規(guī)程進行飼養(yǎng)管理和動物實驗3）定期進行微生物學(xué)監(jiān)測4）徹底消滅飼養(yǎng)室內(nèi)外的野鼠5）大動物接種疫苗2.控制措施1）重要傳染病感染要及時捕殺、消毒、隔離2）大動物隔離治療3）不明死亡原因要剖檢明確診斷傳染性疾病對實驗動物生產(chǎn)和動物實驗研究的影響引起動物死亡和質(zhì)量下降（鼠痘、仙臺病毒感染、兔瘟、犬出血性腸炎等）人獸共患?。馨图毎}絡(luò)叢腦膜炎病毒感染、流行性出血熱、B病毒感染第三節(jié)實驗動物常見的傳染性疾病易污染實驗動物組織培養(yǎng)的病毒動物種類病毒種類猿猴犬兔豚鼠倉鼠大鼠小鼠雞SV40、腺病毒、皰疹病毒、腸道病毒、泡沫病毒腺病毒、皰疹病毒、副流感病毒、呼腸孤病毒痘病毒、乳多空病毒、皰疹病毒皰疹病毒、副流感病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒微小病毒、淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒微小病毒、皰疹病毒、冠狀病毒淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒、呼腸孤病毒、乳多空病毒、白血病病毒、冠狀病毒白血病病毒、腺病毒、皰疹病毒、粘病毒一、常見人畜共患病毒性疾病

1.淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒感染（Lymphocyticchoriomeningitisvirusinfection)病原：LCMV（Arenaviridae,Lymphocyticchoriomeningitisvirus）流行病學(xué)：

傳染源:感染LCMV的野小鼠或?qū)嶒炐∈髠鞑ネ緩剑航佑|傳播，垂直傳播易感動物：小鼠、倉鼠、人臨床癥狀：小鼠無癥狀，人流感樣、腦膜炎診斷：血清學(xué)檢查，樣品腦內(nèi)注射預(yù)防和控制：徹底消滅飼養(yǎng)室周圍的野鼠和家鼠，避免鼠類的排泄物污染的飲食，避免吸入被污染的塵埃。

1.鼠痘（Mousepox,Infectiousectromelia）病原學(xué)：鼠痘病毒（Poxviridae,mousepoxvirus）流行病學(xué)：傳染源：病鼠，野生小鼠很少發(fā)生傳播途徑：接觸傳播、消化道傳播易感動物：小鼠（某些品系易感，某些品系抵抗）臨床癥狀：痘斑、脫腳、斷尾診斷：流行病學(xué)，臨床癥狀，病毒分離，實驗室檢查預(yù)防和控制：

預(yù)防：嚴(yán)格執(zhí)行規(guī)章制度，不從無生產(chǎn)許可證單位購買動物?？刂疲翰稓⒉∈?，消毒飼養(yǎng)室3.狂犬病（Rabies)病原：Rhabdovirus流行病學(xué)：傳染源:感染Rhabdovirus的犬、貓、狼和蝙蝠等傳播途徑：接觸傳播（唾液）

易感動物：所有哺乳動物

臨床癥狀：潛伏期、前驅(qū)期、急性神經(jīng)癥狀期和麻痹期即昏迷死亡期

診斷：1.

狂犬病特異性抗原

2.

在腦組織中存在Negri體（狂犬病病毒包涵體）

3.

在腦組織或唾液中用細胞培養(yǎng)分離到病毒預(yù)防和控制：禁止野犬進入動物房周圍，對實驗犬和實驗人員接種狂犬病疫苗4.流行性出血熱病毒感染（Epidemichemorrhagicfevervirusinfection）病原：流行性出血熱病毒（Bunyaviridae,Hantavirus)流行病學(xué)：

傳染源：帶毒野鼠和實驗大鼠傳播途徑：咬傷接觸傳播，氣溶膠吸入易感動物：大小鼠及其它嚙齒類動物臨床癥狀：大小鼠無臨床癥狀，人感染后得流行性出血熱，典型表現(xiàn)有發(fā)熱、出血和腎臟損害三類主要癥狀

診斷：血清學(xué)檢查，病毒分離預(yù)防和控制：

預(yù)防：飼養(yǎng)區(qū)內(nèi)外捕殺野鼠，不從無生產(chǎn)許可證單位購買動物。控制：捕殺血清學(xué)檢查陽性大小鼠鼠，消毒、隔離5.猴皰疹病毒感染（B-Virusinfection)病原：CercopithecineHerpesvirusType1流行病學(xué)：傳染源:感染B病毒的非人靈長類動物傳播途徑：接觸傳播（咬傷、抓傷）易感動物：猴、人臨床癥狀：發(fā)熱、頭痛、器官壞死、出血性休克、嚴(yán)重致死診斷：血清學(xué)檢查預(yù)防和控制：對進入實驗室的猴做徹底的檢疫，避免接觸野生猴類6.仙臺病毒感染（Sendaivirusinfection）病原學(xué)：仙臺病毒（Paramyxoviridae,Sendaivirus）流行病學(xué)：

傳染源：病鼠傳播途徑：呼吸道易感動物：所有實驗動物臨床癥狀：肺炎仙臺病毒感染肺病變對麻醉實驗和吸入毒理學(xué)研究等產(chǎn)生嚴(yán)重干擾7.鼠肝炎（Mousehepatitis）病原：鼠肝炎病毒（Coronaviridae,Mousehepatitisvirus）流行病學(xué)：

傳染源：隱性感染鼠、病鼠傳播途徑：消化道，接觸傳播易感動物：小鼠臨床癥狀：乳鼠死亡，裸鼠“wastesyndrome”感染鼠肝炎的裸鼠wastesyndrome裸鼠的肝臟病變8.犬細小病毒?。–anineParvovirusdisease）病原：犬細小病毒（CanineParvovirus）流行病學(xué)：

傳染源：病犬傳播途徑：消化道易感動物：犬臨床癥狀：糞便呈咖啡色或番茄醬色樣的血便，嚴(yán)重者機體休克、昏迷死亡或呈心肌炎型

診斷:流行病學(xué)，臨床癥狀、實驗室檢查預(yù)防和控制：引進動物時執(zhí)行嚴(yán)格的檢疫制度，發(fā)現(xiàn)感染鼠后及時撲殺，剖腹產(chǎn)重建鼠群9.犬瘟熱（CanineDistemper)

病原：犬瘟熱病毒（CanineDistemperVirus）流行病學(xué)：

傳染源：病犬或海豹等野生動物傳播途徑：消化道易感動物：犬臨床癥狀：鼻眼流漿液性分泌物，發(fā)熱，食欲廢絕、鼻鏡干裂，或出現(xiàn)急性腸胃炎和神經(jīng)癥狀犬瘟熱典型癥狀診斷:流行病學(xué)，臨床癥狀、實驗室檢查預(yù)防和控制：禁止野犬進入動物房周圍，飼養(yǎng)人員不得與寵物狗或其它草狗接觸，一旦發(fā)現(xiàn)感染，則對其隔離或撲殺，并對環(huán)境做徹底消毒。二.立克次體疾病立克次體是介于細胞與病毒之間的微生物，具有以下特點：

①需在活細胞內(nèi)生長，在代謝衰退的細胞內(nèi)生長旺盛；

②具典型的細胞壁、有DNA和RNA，呈短小、多形性球桿狀，染色后光學(xué)顯微鏡可以查見

③對抗生素敏感人畜共患的實驗動物立克次體疾病疾病名稱病原感染媒介動物人類臨床癥狀傳染途徑昆士蘭熱：Q熱（Qfever）Coxiellaburnetii畜禽類（綿羊、山羊、牛、豬、犬、雞）發(fā)熱、發(fā)抖、頭痛、虛弱、不適、出汗，有些病例引發(fā)肺炎伴有咳嗽、胸痛等癥狀。另外也有急性或慢性肉芽腫型肝炎的報告空氣感染、消化道亦可感染、尿、糞便、乳汁污染均可感染貓抓熱（Cat-Scratchfever）Bartonellahenselae貓、犬、猴、豬傷口出現(xiàn)紅斑丘疹數(shù)日后形成皰痂、淋巴結(jié)炎，發(fā)熱、不適、厭食、頭痛、脾腫大咬傷、抓傷立克次體痘或斑疹熱（Rickettsialpox）Rickettwsiaakari小鼠、大鼠、田鼠皮膚有丘疹、發(fā)冷、發(fā)熱、頭痛、肌痛由螨蟲傳染三.人畜共患常見細菌性疾病1.沙門氏菌?。⊿almonella）病原：沙門氏菌流行病學(xué)：

傳染源：患病動物和無癥狀帶菌動物傳播途徑：消化道易感動物：嚙齒類、兔臨床癥狀：突然死亡，腹瀉診斷：臨床癥狀，病原菌分離豚鼠的脾臟病變小鼠肝臟病變預(yù)防和控制：對動物的食物和飲水進行嚴(yán)格消毒，一旦發(fā)現(xiàn)有動物染病，立即撲殺并對環(huán)境徹底消毒。2.布氏桿菌?。˙rucellosis）病原：Brucellasuis流行病學(xué)：

傳染源：患病犬、牛、豬、羊傳播途徑：接觸感染（口、皮膚、黏膜）易感動物：犬、牛、豬、羊臨床癥狀：體重減輕、睪丸炎、不育診斷：臨床癥狀，病原菌分離五.常見的實驗動物寄生蟲病1.體外寄生蟲（節(jié)肢動物）病原：Ectoparasites（虱子、螨）流行病學(xué)：傳染源：帶蟲動物傳播途徑：接觸傳播宿主：各種動物臨床癥狀：診斷:臨床癥狀、實驗室檢查預(yù)防和控制：籠具和墊料要徹底消毒，一旦診斷出有外寄生蟲病，應(yīng)剖腹產(chǎn)重建動物群或重新引種，有經(jīng)濟價值的大動物可用殺蟲劑治療。2.弓形蟲病病原：Toxoplasmagondii生活史：

滋養(yǎng)體，假包囊，包囊寄生在人的除紅細胞以外的有核細胞內(nèi)。

人、小鼠、家鼠1.寄生部位：2.終宿主：3.中間宿主：4.感染階段：貓和貓科動物。其它哺乳類，鳥類，爬行類等成熟卵囊，假包囊，包囊。經(jīng)口感染。經(jīng)損傷的皮膚或粘膜感染。經(jīng)眼結(jié)膜感染。經(jīng)接觸被卵囊污染的土壤，水源感染。經(jīng)輸血，器官移植感染。經(jīng)節(jié)肢動物攜帶感染。經(jīng)貓，狗唾液感染。感染途徑：感染弓形蟲多數(shù)為隱性感染。主要危害眼和N系統(tǒng)孕婦常有流產(chǎn)，早產(chǎn)，死產(chǎn)。死胎或畸胎。幼齡大鼠常導(dǎo)致致死性肺炎預(yù)防和控制：禁止貓進入動物房周圍，一旦感染撲殺整個感染群第四章實驗動物環(huán)境生態(tài)學(xué)李超英第一節(jié)環(huán)境因素對實驗動物的影響一、實驗動物環(huán)境控制的重要性

實驗動物幾乎終身被限制在一個極其有限的環(huán)境范圍內(nèi)生活，這種環(huán)境就成了實驗動物賴以生存的條件。動物實驗在實驗前和實驗中控制各種環(huán)境因素十分重要。甚至可以說沒有環(huán)境控制就沒有動物實驗。

genotype基因型發(fā)育環(huán)境

developmental

phenotype表現(xiàn)型周圍環(huán)境

proximate

dramatype演出型1959年Russell和Burch提出的影響實驗結(jié)果的遺傳和環(huán)境因素動物對實驗處理的反應(yīng)可用以下公式表示：

R=（A+B+C）×D+ER：實驗動物的總反應(yīng)A：動物種的共同反應(yīng)B：品種品系特有的反應(yīng)C：個體反應(yīng)（個體差異）D：環(huán)境影響E：實驗誤差環(huán)境因素與動物的總反應(yīng)呈正相關(guān)，要盡量減少D的變化，排除實驗處理以外的影響。二、實驗動物環(huán)境因素的分類1、氣候因素：溫度、濕度、氣流、風(fēng)速等；2、理化因素：氧、二氧化碳、粉塵、臭味、噪音、照度、殺蟲劑、消毒劑、有害化學(xué)物質(zhì)等；3、居住因素：房屋、籠具、墊料等；4、營養(yǎng)因素：飼料、水等；5、生物因素：同種生物因素：社會地位、勢力范圍、咬斗和飼養(yǎng)密度等異種生物因素：微生物、人和其它動物的關(guān)系環(huán)境對實驗動物質(zhì)量和動物試驗結(jié)果的影響是多因素聯(lián)合作用的結(jié)果。多種因素是共存的。所以在論述實驗動物的環(huán)境時，應(yīng)該按復(fù)合環(huán)境（environmentalcomplex)狀態(tài)加以考慮。三、各種環(huán)境因素對實驗動物質(zhì)量和動物試驗結(jié)果的影響1、溫度：最適宜溫度20-25℃，溫差：3或4℃溫度對動物的影響：新陳代謝：低溫時新陳代謝增加，攝食增加散熱：除靈長類，其他動物汗腺不發(fā)達或無汗腺，高溫時散熱困難，難以維持體溫恒定臟器重量：負相關(guān)生殖：高溫時雄性睪丸萎縮，精子活力下降；雌性動物性周期紊亂，泌乳下降對動物實驗的反應(yīng)性

三、各種環(huán)境因素對實驗動物質(zhì)量和動物試驗結(jié)果的影響1、溫度：最適宜溫度20-25℃，溫差：3或4℃溫度對動物的影響：新陳代謝：低溫時新陳代謝增加，攝食增加散熱：除靈長類，其他動物汗腺不發(fā)達或無汗腺，高溫時散熱困難，難以維持體溫恒定臟器重量：負相關(guān)生殖：高溫時雄性睪丸萎縮，精子活力下降；雌性動物性周期紊亂，泌乳下降對動物實驗的反應(yīng)性

不同溫度對藥物L(fēng)D50的影響(mg/kg)----------------------------------------------------藥物15.5℃26.7℃------------------------------------------------------

苯異丙氨197.090.0鹽酸脫氧麻黃堿111.033.2麻黃堿477.1565.0表4-1不同環(huán)境溫度時戊巴比妥鈉（95mg/kg）腹腔注射導(dǎo)致大鼠死亡率比較

環(huán)境溫度(℃)給藥動物數(shù)(只)死亡動物數(shù)(只)死亡率(%)

122020100142020100162020100

18201050

202010502220105024201050262073528

20

6

303020115532201680實驗動物的溫度標(biāo)準(zhǔn)范圍：2、濕度：相對濕度，

實際水蒸氣分壓力相對濕度（%）=------------------×100%

飽和水蒸氣分壓力適宜的相對濕度是40%--70%。高溫高濕導(dǎo)致機體蒸發(fā)散熱受阻。高濕利于微生物繁殖和傳播。濕度過低可導(dǎo)致粉塵飛揚，而微生物主要附著在粉塵上，動物室內(nèi)變態(tài)反應(yīng)原的含量隨濕度的下降而上升。低濕，散熱增加，產(chǎn)熱增加，攝食增加低濕，大鼠環(huán)尾癥3、氣流與風(fēng)速換氣次數(shù)，氣流速度，壓強梯度氣流速度和散熱正相關(guān)，實驗動物體表面積與體重的比值較大，對氣流速度更敏感。氣流速度過大或氣流直吹，動物體表散熱過大。氣流速度小，散熱慢。0.1-0.2m/s換氣次數(shù)，潔凈程度越高，要求換氣次數(shù)越多。屏障環(huán)境：10-20次/h隔離環(huán)境：20-50次/h.壓強梯度：潔凈區(qū)高于污染區(qū)合理組織氣流和風(fēng)速可調(diào)節(jié)室內(nèi)溫度和濕度，又可降低室內(nèi)粉塵和有害氣體污染，控制傳染病的流行。

4、光照工作照度150—300lx動物照度15－20lx明暗交替時間12/12或10/14h照度對動物的生殖生理和行為活動有較大影響強光長時間照射引起角膜退行性變化5、噪聲60dB以下音域，人1000~2000Hz,小鼠1000~5000Hz。

引起小鼠聽力性痙攣。對生殖影響較大，如豚鼠流產(chǎn)。引起動物呼吸、心跳、血壓、腎上腺皮質(zhì)激素等生理指標(biāo)變化。

6、空氣潔凈狀況氣體污染，氨14mg/m3有害氣體，氨、甲基硫醇、硫化氫等

顆粒污染，100級，10000級，100000級美國宇航局標(biāo)準(zhǔn)，每立方英尺空氣中直徑0.5微米以上粒子的個數(shù)。

粉塵顆粒，是變應(yīng)原，還是微生物的主要載體。落下菌數(shù)，0（隔離環(huán)境），3（屏障環(huán)境），或30個/皿（普通環(huán)境）在不飼養(yǎng)動物的狀態(tài)下每5～10m2放置1個直徑9cm的血瓊脂培養(yǎng)皿，暴露30min培養(yǎng)48h的菌落數(shù)。7、生物因素動物社會因素和動物飼養(yǎng)密度微生物其它動物實驗人員8、居住因素包括實驗動物室的建筑、飼養(yǎng)籠具、墊料、飲水器和給食器等。動物試驗設(shè)施環(huán)境指標(biāo)：﹝以屏障系統(tǒng)小鼠為例﹞溫度：20~25℃換氣次數(shù)：10~20次/h日溫差：≤3℃氣流速度：0.1~0.2m/s相對濕度：40~70%壓強梯度：20~50Pa噪聲：≤60dB空氣潔凈度：10000級氨濃度：≤14mg/m3落下細菌數(shù)：≤3個/皿照度：（工作）150~300lx（動物）15~20lx晝夜明暗交替時間：12/12或10/14小時密度（>20g):面積0.01m2,高度0.15m第二節(jié)實驗動物設(shè)施一、實驗動物設(shè)施

laboratoryanimalfacility,LAF是進行實驗動物飼養(yǎng)、保種維持、生產(chǎn)、實驗研究、試驗等設(shè)施的總稱。包括實驗動物繁育、生產(chǎn)設(shè)施和動物實驗設(shè)施。二、實驗動物環(huán)境設(shè)施的分類實驗動物設(shè)施根據(jù)對飼養(yǎng)動物的空氣凈化程度分為三類。開放系統(tǒng)(opensystem)屏障系統(tǒng)(barriersystem)隔離系統(tǒng)(isolationsystem)實驗動物中心屏障環(huán)境特點：恒溫（20～26）恒濕（40％～70％）足夠的換氣次數(shù)（10～20次/小時）保證有害氣體濃度降低到最小正向梯度壓差（20～50)使屏障外污染源不能進入萬級空氣潔凈度保證空氣潔凈適合的動物照度(15~20)和對時明暗交替（12h/12h)符合動物生活習(xí)性。11樓IVC系統(tǒng)為動物提供更好的保護。屏障系統(tǒng)實驗動物墊料屏障系統(tǒng)IVCIndividuallyVentilatedCages屏障系統(tǒng)IVCIndividuallyVentilatedCagesIVC的特點IVC(IndividuallyVentilatedCages)是獨立通風(fēng)籠盒的簡稱.它的特點是具有一定的密閉性,同時讓經(jīng)HEPA過濾器的潔凈空氣流入盒內(nèi),使盒內(nèi)保持正壓,減少了可能的感染來源,適合于飼養(yǎng)SPF級動物,以及一些免疫缺陷動物屏障系統(tǒng)層流架隔離系統(tǒng)隔離器的基本構(gòu)造示意圖實驗動物設(shè)施的監(jiān)控監(jiān)控內(nèi)容溫度濕度壓差人員進出情況環(huán)境級別和動物級別的對應(yīng)關(guān)系

動物級別環(huán)境級別(潔凈度，落下菌)普通動物開放系統(tǒng)(___,30)清潔動物屏障系統(tǒng)(萬級，3)SPF動物屏障系統(tǒng)(萬級，3)無菌動物或悉生動物

隔離系統(tǒng)(百級，0)三、特殊動物實驗設(shè)施感染動物實驗設(shè)施放射性同位素動物實驗設(shè)施(RI)特殊化學(xué)物質(zhì)動物實驗設(shè)施1、感染動物設(shè)施是指使用病原體對動物進行實驗感染的設(shè)施。此種設(shè)施除備有通常動物設(shè)施要求外，還必須具備防止由動物傳染人，動物相互間的交叉感染，動物向設(shè)施外感染的結(jié)構(gòu)和功能。此類設(shè)施設(shè)計的目的是防止生物性危險和有害因素向動物實驗設(shè)施和外界的污染。目前通常采用物理學(xué)隔離，主要是在氣密性結(jié)構(gòu)內(nèi)采用負壓通風(fēng)，以達到防止氣溶膠擴散污染的目的。

NIH：P1，P2，P3，P4美國疾病管理中心：BSL1，BSL2，BSL3，BSL4．我國2004.5.1頒布，10.1實施《實驗室生物安全通用要求》國家標(biāo)準(zhǔn)：一級：對健康成年人已知無致病作用的微生物

二級：對人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物

三級：通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預(yù)防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究(血清學(xué)實驗除外)應(yīng)在三級生物安全防護實驗室中進行。四級：對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。以及上述情況類似的不明微生物，

第三節(jié)屏障系統(tǒng)管理一、人流路線

二、物流路線

三、消毒與滅菌高壓鍋：121℃，0.11Mpa，30分鐘132℃，0.21Mpa，15分鐘傳遞窗：紫外線，表面消毒，30分鐘渡槽：0.1%新潔爾滅浸泡4小時Co60照射2%過氧乙酸噴霧高錳酸鉀、福爾馬林熏蒸四、廢棄動物處理深埋或焚燒第五章實驗動物營養(yǎng)學(xué)李超英水是生命之源1.小鼠小鼠近交系極多，飼料中必需給小鼠充足的營養(yǎng)以維持其生物學(xué)特性和保證實驗正常進行。飼料中18%粗蛋白，4-8%粗脂肪，KM、ICR、BALB/c、DBA/2等品系小鼠均獲得滿意的繁殖效果。若添加0.47%含硫氨基酸可提高小鼠的生長發(fā)育和繁殖性能。小鼠特別需要含亞油酸豐富的日糧。

各種實驗動物的營養(yǎng)需要小鼠對鈣及維生素A、D需要量較高，但同時又對過量維生素A敏感。維生素A過量可導(dǎo)致小鼠繁殖紊亂和胚胎畸形。每公斤飼料中添加維生素E50mg，可顯著提高小鼠受孕率、產(chǎn)仔率。無菌小鼠還應(yīng)注意補充維生素K。2.大鼠應(yīng)滿足各種營養(yǎng)物質(zhì)需要，在飼料中添加0.4%的蛋氨酸和0.48%的賴氨酸，可提高大鼠的生長速度，18-20%的粗蛋白質(zhì)可滿足大鼠的生長、妊娠和泌乳的需要，大鼠對各種營養(yǎng)素的缺乏敏感，應(yīng)特別注意脂肪酸的供給，必需脂肪酸含量占總能量的1.3%，其中亞油酸在飼料中含量不能低于0.3%大鼠對鈣、磷的缺乏耐受力較強，對鎂需要量較多，尤其是妊娠、哺乳時需要量明顯增加。每公斤飼料中添加60mg的維生素E能提高大鼠繁殖率。無菌大鼠還應(yīng)注意補充維生素B12

3.地鼠地鼠飼料中，粗蛋白的含量要求達到21-24%，特別是飼料中的動物性蛋白應(yīng)有一定比例。地鼠像反芻動物一樣能有效地利用非蛋白氮。如蛋白質(zhì)不足，成年地鼠將出現(xiàn)性功能減退，幼鼠則生長發(fā)育遲緩。4.豚鼠豚鼠對某些必需氨基酸特別是精氨酸的需要量較高。對粗纖維的消化能力強，日糧中要含12%--14%的粗纖維。如果粗纖維量不足，豚鼠會出現(xiàn)排糞障礙和脫毛現(xiàn)象。豚鼠對維生素C缺乏特別敏感，缺乏時可致壞血病，生殖力下降，甚至造成死亡。每只豚鼠每日需補10mg維生素C，繁殖階段需補充30mg。5.兔兔日糧應(yīng)補充精氨酸和賴氨酸。兔對缺鈣有較強的耐受能力。雖然其腸道微生物可以合成維生素K和大部分B族維生素，但繁殖時仍需額外補充維生素K。飼料中需要有一定量的粗纖維以維持其正常的消化生理功能，其日糧中粗纖維含量應(yīng)大于11%6.犬犬是肉食動物，犬必須供給足夠的脂肪和蛋白質(zhì)，飼料中動物性蛋白應(yīng)占全部蛋白質(zhì)食物的1/3。犬能耐受高脂肪日糧，要求日糧含有一定量的不飽和脂肪酸。維生素A的需要量較大，亦需補充維生素B12。7.貓貓也是肉食動物，對蛋白質(zhì)需求較高。小貓要求高脂肪酸日糧，生長期貓的日糧要求亞油酸含量不能低于1%。貓屬于不能利用β-胡蘿卜素作為維生素A源動物，因此應(yīng)在飼料中補充維生素A，對維生素E的需求量也較高。8.非人靈長類非人靈長類動物日糧能量的50%以上來自糖代謝。體內(nèi)不能合成維生素C，必須由日糧提供，同時要注意日糧的適口性。除主食外，每天應(yīng)供給一定量的新鮮水果和蔬菜。第四章常用實驗動物

李超英第一節(jié)小鼠生物學(xué)特性、應(yīng)用及飼養(yǎng)管理

小鼠:哺乳綱、嚙齒目、鼠科、小鼠屬?！?/p>

小鼠的一般特性小鼠面部尖突，嘴臉前有19根觸須，耳聳立呈半圓形，眼睛大而鮮紅；尾長約與體長相等，有平衡、散熱等功能體型小，對環(huán)境反應(yīng)敏感，適應(yīng)能力差生長快習(xí)性性情溫順，膽小怕驚，一般不會主動傷害人，但仍保持有野性的一些習(xí)性，如睡眠、營巢仍固定一處。籠內(nèi)飼養(yǎng)時易于捕捉，一旦逃出籠外，則象野鼠一樣敏捷。小鼠喜居光線暗淡的安靜環(huán)境，喜歡啃咬，習(xí)于晝伏夜動，其進食、交配、分娩多發(fā)生在夜間?；顒痈叻逵?次，一次在傍晚后1～2小時，另一次在黎明前，在飼養(yǎng)和實驗時應(yīng)予以注意。喜群居生理學(xué)特點

生長發(fā)育:生殖生理：消化營養(yǎng)代謝：

第一節(jié)小鼠生物學(xué)特性、應(yīng)用及飼養(yǎng)管理

.生長發(fā)育小鼠是嚙齒類實驗動物中最小的動物，生命周期短，易于飼養(yǎng)管理，出生時體重僅約1.5g，哺乳飼養(yǎng)1～1.5個月即可達18～20g，可供實驗使用。生長發(fā)育小鼠發(fā)育成熟時體長90～125mm，體重20～40g，壽命2～3年。新生小鼠赤裸無毛，皮膚肉紅，不開眼，雙耳與皮膚粘連，初生即可發(fā)聲，嗅覺和味覺反應(yīng)敏感。3日齡臍帶脫落，皮膚由紅轉(zhuǎn)為白色，有色仔鼠可看到顏色，開始長毛并出現(xiàn)胡須。4～6日齡雙耳張開聳立。7～8日齡四肢發(fā)育，開始爬動游走，被毛逐漸濃密，下門齒長出。生長發(fā)育9～l1日齡有聽覺，被毛長齊。12～14日齡開眼，長出上門齒，開始采食并學(xué)習(xí)飲水。3周齡離乳獨立生活。4周齡雌鼠陰腔張開。5周齡雄鼠睪丸降落至陰囊，并開始生成精子。小鼠的生長發(fā)育特點可作為鑒別仔鼠日齡的根據(jù)。生殖生理小鼠成熟期早，繁殖力強，雌鼠35～50日齡，雄鼠45～60日齡性成熟。性周期4～5天。陰栓妊娠期19～21天。哺乳期20～22天。每胎產(chǎn)仔數(shù)8～15只，年產(chǎn)仔6～9胎。小鼠的性活動可持續(xù)1年左右。消化胃容量小,腸道短,盲腸不發(fā)達,消化功能差,不耐饑餓,以谷物性飼料為主。食管襯以厚的角質(zhì)化鱗狀上皮，臨近食管的胃黏膜也是角化的，靠幽門區(qū)為腺體區(qū)營養(yǎng)代謝營養(yǎng)：蛋白質(zhì)>20%，對VE缺乏敏感水的調(diào)節(jié)：對飲水量不足更為敏感，飲水量為4~7ml/d，水分代謝的半衰期為1.1天體溫調(diào)節(jié)：不發(fā)抖產(chǎn)熱，缺乏汗腺，不是真正的溫血動物呼吸：代謝率高、耗氧量大，在靜止?fàn)顟B(tài)下，每小時每克體重約耗氧3.5ml。解剖學(xué)特點

1．小鼠下頜骨的喙?fàn)钔惠^小，髁狀突發(fā)達，運用下頜骨形態(tài)的分析技術(shù)，可進行近交系小鼠遺傳質(zhì)量的監(jiān)測。2．上下頜各有2個門齒和6個臼齒，門齒不斷生長，以經(jīng)常磨損來維持齒端的長度，保持其恒定。3．脾臟有明顯的造血功能，骨髓為紅骨髓而無黃骨髓，終生造血。4．小鼠無汗腺，尾有四條明顯的血管，尾的腹面有一條動脈，背面有一條靜脈，兩側(cè)各有一條靜脈。尾有散熱、平衡、自衛(wèi)等功能。5．小鼠胃容量小(1～1.5ml)，功能差，不耐饑餓，腸道較短，盲腸不發(fā)達，故以谷物性飼料為主。6．小鼠的淋巴系統(tǒng)尤為發(fā)達，外界刺激可使淋巴系統(tǒng)增生，進而可導(dǎo)致淋巴系統(tǒng)疾病。7．雄鼠性成熟后，開始分泌雄性激素，副性腺分泌精液，以推動精子運動，與雄鼠交配后10～12小時，在雌鼠陰道口處形成明顯的白色陰道栓，陰道栓可防止精液倒流，提高受孕率。8.雌鼠為雙角子宮型，呈“丫”型。卵巢多卵多胎，有卵巢系膜包繞，不與腹腔相通，故無宮外孕。乳腺發(fā)達，共有乳頭5對，胸部3對，可延伸至頸背部；腹部2對，可延續(xù)到會陰部和腹部兩側(cè)。

正常生理生化指標(biāo)正常體溫37-39℃，成年小鼠呼吸頻率140-210次/分，心跳平均163次/分。染色體20對。胃容量1~1.5ml，食料量2.8~7g/d，飲水量4~7ml/d，排糞量1.4~2.8g/d，排尿量1~8ml/d小鼠在生物醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用藥