標(biāo)準(zhǔn)解讀

《GB/T 33410-2016 生化試劑中蛋白酶K活性檢測方法》是一項國家標(biāo)準(zhǔn)，旨在為生化試劑中的蛋白酶K活性提供統(tǒng)一的測定方法。該標(biāo)準(zhǔn)適用于以牛胰腺或微生物發(fā)酵法生產(chǎn)的蛋白酶K活性測定。

根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)，蛋白酶K活性的測定基于其對特定底物（如酪蛋白）的水解能力來評估。具體步驟包括準(zhǔn)備一系列不同濃度的蛋白酶K溶液，并將其與固定量的底物混合，在一定條件下進(jìn)行反應(yīng)。之后，通過測量產(chǎn)物量或者未被分解的底物量來計算酶活性單位?；钚詥挝煌ǔ６x為在指定條件下每分鐘內(nèi)能夠催化一定量底物轉(zhuǎn)化所需的酶量。

標(biāo)準(zhǔn)還詳細(xì)規(guī)定了實驗所需的各種條件，比如pH值、溫度、反應(yīng)時間等參數(shù)的選擇依據(jù)，以及如何準(zhǔn)確地配制樣品和對照組。此外，對于數(shù)據(jù)處理部分也有明確指導(dǎo)，包括如何使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法確定未知樣本的酶活性值，以及誤差分析的方法。


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....

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  • 正在執(zhí)行有效
  • 2016-12-30 頒布
  • 2017-07-01 實施
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GB/T 33410-2016生化試劑中蛋白酶K活性檢測方法_第1頁
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文檔簡介

ICS7104030

G66..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T33410—2016

生化試劑中蛋白酶K活性檢測方法

DeterminationoftheactivityofproteaseKinbiochemicalreagents

2016-12-30發(fā)布2017-07-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T33410—2016

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國生化檢測標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位深圳市計量質(zhì)量檢測研究院中國測試技術(shù)研究院中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院

:、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人林霖周李華賴心田蘭全學(xué)馬愛進(jìn)陳國培李淅潘蘭芳楊國武

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T33410—2016

生化試劑中蛋白酶K活性檢測方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生化試劑中蛋白酶活性檢測方法

K。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于分子生物學(xué)實驗中使用的蛋白酶活性的測定

K。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

蛋白酶K活性單位proteaseKactivityunit

在時內(nèi)水解酪蛋白產(chǎn)生酪氨酸為一個酶活性單位

55℃,pH8.0,1min1μgL-。

注活性單位為或

:U/mg、U/gU/mL。

4原理

蛋白酶是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶可催化含有較多的絲氨酸位點的酪蛋白水解

K,α-。

本方法中采用酪蛋白為反應(yīng)底物經(jīng)蛋白酶催化水解為酪氨酸在處測定吸光度值再

α-,KL-,275nm。

通過測量各個濃度的酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液在處的吸光度值并構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線得出線性回歸方程

L-275nm,,

以外標(biāo)法定量計算蛋白酶的酶活性

。K。

5儀器設(shè)備及器具

51恒溫水浴鍋控溫精度

.:±0.2℃。

52計精確至

.pH:0.01pH。

53紫外可見分光光度計吸光度值精確至

.-:0.001。

54石英比色皿

.1cm。

55電子天平感量

.:0.0001g。

6試劑

除非另有規(guī)定本方法所用試劑均為分析純水為規(guī)定的

溫馨提示

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