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實(shí)驗(yàn)六家兔尿生成的調(diào)節(jié)一、目的要求1.觀察泌尿系統(tǒng)組成和結(jié)構(gòu)特點(diǎn);2.觀察并掌握腎的顯微結(jié)構(gòu)3.學(xué)習(xí)用輸尿管插管法記錄尿量的方法;4.觀察幾種因素對(duì)家兔尿生成的影響;二、基本原理尿生成的過(guò)程包括:腎小球的濾過(guò)作用和腎小管和集合管的重吸收作用及分泌作用。在整體內(nèi),這三個(gè)過(guò)程往往受到生理性的調(diào)節(jié),凡影響這些過(guò)程的因素,都可影響尿的生成而引起尿量的改變。三、動(dòng)物和器材兔手術(shù)臺(tái)、常用手術(shù)器械、細(xì)塑料管、1ml、5ml、20ml及50ml注射器、棉線、紗布、氣管插管20%氨基甲酸乙酯溶液、10%葡萄糖溶液、肝素生理鹽水溶液(100單位/ml)、0.9%生理鹽水、垂體后葉素(5單位/ml)、腎上腺素(1:10000)四、方法和步驟1.麻醉家兔:家兔稱(chēng)重,按5mL/kg體重的劑量,由耳緣靜脈注射20%烏拉坦,將兔子仰臥位固定于解剖板上。
四、方法和步驟2.氣管插管術(shù):剪去兔喉部的毛,用手術(shù)刀切開(kāi)咽喉部位的皮膚(約6cm),用止血鉗和鑷子鈍性分開(kāi)結(jié)締組織,剝離肌肉,暴露氣管,穿線后分離氣管,在甲狀軟骨下數(shù)第三和第四軟骨環(huán)之間,切橫切口,插入氣管插管,用穿好的線扎緊氣管和插管。在氣管兩側(cè)深部可見(jiàn)左右頸總動(dòng)脈穿線備用3.動(dòng)脈插管:鈍性分離左側(cè)迷走神經(jīng)及左頸總動(dòng)脈,將動(dòng)脈頭端的備用線盡可能靠頭端結(jié)扎,然后在另一備用線的向心側(cè)用動(dòng)脈夾夾閉。輕輕提起動(dòng)脈頭端的結(jié)扎線,用銳利的眼科剪在靠近扎線的稍后方,沿向心方向斜向剪開(kāi)動(dòng)脈上壁。用彎頭眼科鑷輕輕挑起剪開(kāi)的動(dòng)脈上壁,將準(zhǔn)備好的動(dòng)脈插管插入動(dòng)脈管內(nèi),順勢(shì)推進(jìn)6~8mm。用備用線扎緊插管,余線固定在插管的分支上,以免滑脫。輕輕取下動(dòng)脈夾,可見(jiàn)動(dòng)脈血與插管內(nèi)液體混合。此時(shí)顯示器上出現(xiàn)血壓的波動(dòng)曲線。4.輸尿管插管——剪去下腹部兔毛,在恥骨聯(lián)合上1.5cm處做正中切口約4cm,沿腹白線切開(kāi)腹膜,暴露膀胱三角并將膀胱翻向體外,分離兩側(cè)輸尿管,在近膀胱端結(jié)扎,在結(jié)扎的上部剪一斜口,向腎臟方向插入充滿(mǎn)生理鹽水的導(dǎo)尿管,結(jié)扎固定后,進(jìn)行輸尿管導(dǎo)尿。5.記錄正常動(dòng)脈血壓和每分鐘尿的滴數(shù)。6.記錄正常尿滴數(shù)。計(jì)數(shù)10分鐘。以下每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)前均須記數(shù)一正常值作為對(duì)照。
如果基礎(chǔ)尿量較少可以適當(dāng)靜脈一定量的生理鹽水或葡萄糖溶液)。
四、方法和步驟5.停止記錄5分鐘后,耳緣靜脈注射0.9%溫?zé)嵘睇}水30ml后觀察觀察血壓及尿量的變化。記錄10-15分鐘尿液分泌的滴數(shù)。6.停止記錄5分鐘后,耳緣靜脈注射1:10000腎上腺素0.5ml后觀察血壓及尿量的變化。記錄10-15分鐘尿液分泌的滴數(shù)。7.停止記錄5分鐘后,耳緣靜脈注射20%葡萄糖15ml后分別在給藥前、給藥后5min、10min、15min觀察血壓及尿量的變化。記錄10-15分鐘尿液分泌的滴數(shù)。四、方法和步驟8.停止記錄5分鐘后,耳緣靜脈注射5單位/ml的垂體后葉激素0.4ml后觀察血壓及尿量的變化。記錄10-15分鐘尿液分泌的滴數(shù)。(靜脈注射速尿(5mg/kg))9.泌尿系統(tǒng)模型10.腎的顯微結(jié)構(gòu)模型(腎小體)注意事項(xiàng):1.整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程盡量少出血.
2.進(jìn)行每一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)后,必須待尿液分泌基本恢復(fù)正常,再作下一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)3.本實(shí)驗(yàn)需作多次靜脈注射,應(yīng)特別注意保護(hù)耳緣靜脈,靜脈穿刺從近耳尖處開(kāi)始,逐次移向耳根4.實(shí)驗(yàn)前給動(dòng)物多吃些多汁的青綠飼料?;蛴孟鹌?dǎo)管向其胃中灌入40~50毫升清水,以增加其基礎(chǔ)尿量。5.各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)順序的安排是:在尿流量增多的基礎(chǔ)上進(jìn)行減少尿生成的實(shí)驗(yàn),在尿量少的基礎(chǔ)上進(jìn)行促進(jìn)尿生成的實(shí)驗(yàn)。思考題1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,試分析尿量發(fā)生變化的機(jī)理?2.分析抗利尿激素引起尿量變化的機(jī)理,有何實(shí)際意義?3.你還能加入何種實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目?去甲腎上腺素可與入球和出球小動(dòng)脈平滑肌中α受體結(jié)合并使之收縮,入球小動(dòng)脈收縮程度大于出球小動(dòng)脈,這樣腎小球毛細(xì)血管血壓和血流量降低,尿量減少。高滲葡萄糖可以使血糖濃度超過(guò)腎糖閾,近曲小管對(duì)濾液中高濃度的葡萄糖無(wú)法完全重吸收,而使小管液中溶質(zhì)濃度增加,引起滲透性利尿作用,因而使尿量增加。
血液容度降低,血壓下降;血中糖份增加,人的代謝降低,交感神經(jīng)興奮度降低,血壓降低。刺激迷走神經(jīng)后,其末梢釋放的乙酰膽堿與心肌細(xì)胞膜上M受體結(jié)合,使心率減慢,心輸出量減少,血壓下降,使腎小球毛細(xì)血管壓降低,有效濾過(guò)壓減少,尿液生成減少。如果刺激迷走神經(jīng)使血壓下降至6.65kPa(50mmHg),將會(huì)使有效濾過(guò)壓降至零,而出現(xiàn)無(wú)尿。正常人一次飲清水1升后正常人一次飲清水1升后,約半小時(shí)尿量可達(dá)最大值,隨后尿量減少,2~3小時(shí)后恢復(fù)到原來(lái)水平,此現(xiàn)象稱(chēng)為水利尿。尿量增加的原因是:大量飲清水后,使血漿晶體滲透壓下降和血容量增加,對(duì)下丘腦視上核及其周?chē)臐B透壓感受器刺激減弱,于是抗利尿激素釋放量明顯減少,以至遠(yuǎn)曲小管和集合管對(duì)水的重吸收減少,尿量排出增多。它是臨床上用來(lái)檢測(cè)腎稀釋能力的一種常用的試驗(yàn)。
靜脈快速滴注1升0.9%氯化鈉溶液靜脈快速滴注大量生理鹽水后,一方面血漿蛋白質(zhì)被稀釋?zhuān)寡獫{膠體滲透壓降低,腎小球有效濾過(guò)壓增加;
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